影響種公豬精液品質的因素分析

王黎，張護

（1.云南省蒙自市動物衛生監督所，云南蒙自661100 2.紅河州畜牧技術推廣站）

影響種公豬精液品質的因素分析

王黎1，張護2

（1.云南省蒙自市動物衛生監督所，云南蒙自661100 2.紅河州畜牧技術推廣站）

以某豬場飼養的9頭成年種公豬為研究對象，分析年齡和保存時間對種公豬精液品質的影響。結果表明隨著公豬年齡的增長，采精量不斷增加，18月齡左右達到頂峰；隨著保存時間的延長精子活力和活率呈逐步下降趨勢，而畸形率則逐步上升。

精子；活力；活率；畸形率；保存時間

豬人工授精技術是利用人工和器械方法采集公豬精液，對其進行品質檢查，稀釋保存等處理，再用器械把精液送到發情母豬生殖器官內，從而使其受孕的一種配種方法。豬人工授精技術最大的優點是減少群體中所需公豬的總數，增加優良公豬的利用機會。很多學者對豬人工授精在實現豬場凈化、提高母豬產仔數方面給予了肯定。該試驗研究了種公豬不同年齡階段、精液保存時間長短對種公豬精液品質的影響。

1 材料與方法

1.1 供試動物

供試種豬來源于紅河州某種豬場成年種公豬9頭。

1.2 公豬飼養管理

公豬全部單欄飼養，自由飲水，每天人工喂料兩次。按照豬場常規程序進行保健，同時定期消毒。每頭公豬每周采精2次。

1.3 試驗儀器與試劑

精液顯微鏡、可調溫加熱板、蓋玻片、載玻片、電子秤（百分之一精度）、兩根30 cm的溫度計、3個2 L塑料燒杯、500 ml量筒、水浴鍋、輸精瓶、瓶蓋、冰箱、雙蒸水儀、一次性輸精管、精液稀釋粉、采精杯、PE手套、濾紙、衛生紙、橡皮筋。

1.4 試驗方法

1.4.1 采精

10月齡以下，每周1次；10至12月齡，2 W3次；12月齡以上，每周2次；沒有配種需求的公豬每周至少采精1次。

1.4.1.1 精液稀釋液的配制將精液稀釋粉溶解于800 ml雙蒸水中，攪拌均勻后，加雙蒸水定容至1 L，置于37℃水浴鍋內預熱1 h備用。

1.4.1.2 采精杯的制備先在保溫杯內襯1只一次性采精袋，再在杯口覆蓋兩層采精專用濾紙，用橡皮筋固定濾紙，用干凈溫度計下壓濾紙中心，使其中心凹陷2 cm左右，采精杯蓋與杯分開放于37℃恒溫箱中30 min以上備用。

1.4.1.3 采精過程將待采精公豬趕至采精欄，擠出包皮積尿，用清水清洗腹部和包皮部，吸干；采精員采取兩腳一前一后，單腿蹲跪，以便在出現危險時迅速跑開；采精員按摩公豬的包皮部，待公豬爬上假畜臺后，手心朝下握緊伸出的龜頭（握緊“S”狀彎曲第一和第二摺處，避免讓公豬不舒服），順勢將公豬陰莖拉出（不可強拉）。陰莖充分伸出后，達到強直“鎖定”狀態，開始射精。射精過程中不要松手，否則壓力減輕將導致射精中斷。

1.4.1.4 精液收集清亮部分和膠體部分，不要收集；濃厚精液部分，需要完全收集；要注意避免包皮液、尿液等其他異物混入到精液中。

1.4.2 精液品質檢查

精液質量檢查項目主要包括：精液量、顏色、氣味、精子活力、精子活率、畸形率等（整個檢查過程要迅速、準確，15 min內完成）。

1.4.2.1 精液量后備公豬的射精量一般為150～200 ml，成年公豬為200～600 ml，采精后稱重并測量體積。

1.4.2.2 顏色正常精液的顏色為乳白色或灰白色，凡發現精液顏色異常，均應放棄使用，同時對公豬進行檢查，并對癥治療，待精液檢查合格后才可使用。

1.4.2.3 氣味正常的公豬精液具有特有的微腥味，無腐敗惡臭氣味。有特殊臭味的精液不應使用，同時對公豬進行檢查，并對癥治療，待精液檢查合格后才可使用。

1.4.2.4 精子活力精子活力一般采用10級制，即在10× 20/40倍顯微鏡下觀察一個視野內做直線運動的精子數，若有90%的精子呈直線運動則其活力為0.9；有80%呈直線運動，則活力為0.8，依次類推。先將載玻片放在37℃預熱的保溫板上3 min，滴上1小滴精液后，蓋上蓋玻片，鏡檢，新鮮精液的精子活力低于0.7不可使用。

1.4.2.5 畸形精子畸形精子包括：頭部畸形、頸部畸形、中段畸形、尾部畸形、未成熟、頂體畸形；公豬總的畸形精子率超過25%不可使用。

1.4.2.6 精子活率的測定將精液解凍后滴入血細胞計數板的計數室內，用0.9%生理鹽水稀釋，置顯微鏡下觀察。統計出4個角及中央共5個中方格的非直線運動的精子數，將計數板放入120℃的干燥箱中5 min，利用高溫殺死全部精子后，計數出4個角及中央共5個中方格的精子數。用公式：精子活率=（總精子數-非直線運動精子數）/總精子數，求出精子活率。

1.4.2.7 精子畸形率的測定用細玻璃棒取精液一滴，滴于載玻片一端，滴0.9%NaCl溶液，以另一載玻片的頂角呈35度，抵于精液滴上，向另一端拉去，將精液均勻涂抹于載玻片上。抹片于空氣中自然干燥，之后置于酒精固定液中固定5～6 min，取出水洗后，烘干，用藍墨水染色3～5 min，再用水沖洗，使之干燥后在顯微鏡下檢查。查數不同視野的500精子，計算出其中所含的畸形精子數，求出畸形精子百分率。

每份經過檢查的公豬精液都要填寫《公豬精液品質檢查記錄表》。

1.4.3 精液稀釋處理

精液處理盡量在恒溫環境中（采精實驗室的恒溫管理）進行，經過品質檢查后的精液和稀釋液都要在37℃預熱；精液采集后要盡快稀釋，未經精液品質檢測或檢測不合格的精液不可使用。處理步驟如下：①測量精液和稀釋液的溫度確保稀釋精液時，稀釋液與精液溫度一致（以精液的溫度為標準來調節稀釋液的溫度，兩者溫差在1℃以內）。②精液稀釋按頭份計算。人工授精的正常劑量一般為40億/頭份，體積為80 ml。例如，一份公豬的原精液密度為2億/ml，采精量為150 ml，稀釋后密度要求為40億／頭份。則此公豬精液可稀釋150×2/40＝7.5頭份，需加稀釋液80×7.5－150＝450 ml。③將采精袋轉移至2 L塑料大燒杯中，將稀釋液分3次沿杯壁緩緩加入精液中，每次加入后輕輕搖勻，才可再次加入。④稀釋后的精液靜置5 min后，再次檢查精液活力。⑤按每頭份80 ml分裝，在分裝時，需排掉瓶內空氣，并在包裝上貼好標簽，注明公豬的品種、耳號、采精日期和采精時間段。⑥用具清洗、消毒：所有使用過的燒杯、玻璃棒、溫度計及時清洗，先用清水沖洗干凈后，再用蒸餾水浸潤洗滌1次。⑦采精完畢后填寫《公豬采精登記表》，所有采精工作結束后及時沖洗采精區。

1.4.4 精液的保存

分裝好的精液應平放（可疊放），不同品種精液應分開放置并粘貼標簽。需保存的精液應先在室溫下放置1 h后再轉入17℃冰箱中（或用幾層干毛巾包好后直接放入17℃冰箱中）。從放入冰箱開始，每隔8 h輕輕顛倒混勻一次并做記錄。減少冰箱門的開關次數，出現異常情況，必須重查精液品質并做記錄。

2 結果與分析

2.1 月齡對公豬精液品質的影響

在該次精液品質分析中由于涉及因素廣且時間長，所以只用采精量來體現公豬不同月齡對精液品質的影響。

結果顯示公豬從5月齡至8月齡開始，采精量逐步上升，到18月齡左右達到頂峰。但有關專家認為公豬精液量在18月齡后可一直維持到5歲才下降，該試驗因時間關系暫不能證明。

2.2 保存時間對精子活力變化的影響

該研究測定了9份精液在0 h、24 h、48 h、72 h的精子活力等級，并統計了各等級階段的份數。

結果表明，隨著保存時間的推移精子活力呈下降趨勢，整體來看精子活力主要分布在0.8～0.9之間，但隨著時間推移，到24 h已經有1瓶精子的活力低于0.9，到48 h已經有1瓶精子的活力低于0.7。

2.3 保存時間對精子活率和畸形率變化的情況

測定了9份精液在不同保存時間下的精子活率和畸形率，試驗過程中最大程度地保證了單一變量為時間，盡可能的排除由其他因素對精液品質造成的影響，每一次測定過程都嚴格按照檢測程序進行。影響情況如下圖所示：

圖 保存時間對公豬精子活率和畸形率的影響

結果表明，隨著保存時間的延長精子活率在下降，畸形率在上升。由于精子活率低于70%和畸形率高于17%都不能再利用，而在該試驗中保存72 h時的測量值中已有超過這兩個值的。

3 討論

遺傳是決定公豬精液品質的最主要因素。有研究表明，公豬的睪丸大小、精子數量、性欲的遺傳力估值分別為0.4、0.3和0.2。而這些性狀對精液品質影響較大，所以，子代的精液品質受父母代影響較大。據郭應琳和伏彭輝報道，不同的豬種精液品質是不同的，一般是大白公豬最好，大約克次之，杜洛克最差［1］。

年齡對公豬精液品質影響較大。老齡公豬的精子密度不如壯年公豬，青年公豬總精子數最少。提高飼糧粗蛋白水平能顯著增加采精量。但也有研究結果表明，過量的蛋白質攝入會引起血液中氨和尿素濃度升高，進而引起公豬精子畸形率的增加。王玉良和吳德標的試驗表明了日糧中的硒、鐵和鈷對公豬精液品質具有不可忽視的影響［2］。其他的試驗則表明，飼料中的各種維生素含量影響著公豬的精液品質［3-5］。玉榮等對杜洛克、大白、長白3個不同品種種公豬（各30頭分）的不同月齡段（8～12、12～18、18～30月齡）的精液品質進行比較發現，3個品種種公豬精子活力都在8～12月齡段最強，隨著年齡增大種公豬精子活力下降。到12～18月齡段3個品種種公豬精液體積都處于高峰期，18月齡開始下降。長白種公豬在18～30月齡段精子密度極顯著高于另2個品種種公豬（P＜0.01），但精子活率比較低，平均活率小于75%［6］。

4 結論

筆者從不同年齡階段、精液不同的保存時間兩方面對精液品質的影響進行了分析。結果表明隨著公豬年齡的增長，采精量不斷增加，18月齡左右達到頂峰；隨著保存時間的延長精子活力和活率呈逐步下降趨勢，而畸形率則逐步上升。由于精子活率低于70%和畸形率高于17%都不能再利用，根據該試驗建議，規模豬場一般當天采精后可放入17℃專用冰箱，但僅留作第2天使用即可，最好超過48 h的精液不要使用。這些情況在今后種公豬人工授精工作中有一定的參考作用，能夠確保豬人工授精技術的順利推廣。

［1］郭應琳，伏彭輝.公豬精液品質的影響因素及其改進途徑［J］.畜禽業.2009，（245）：46-49.

［2］王玉良，吳德標.種公豬精液品質與微量元素的關系［J］.上海畜牧獸醫通訊，2007，（5）：29-30.

［3］王懷禹.日糧維生素E水平對種公豬精液品質的影響［J］.豬業科學，2010，（2）：50-52.

［4］李雪梅，曾饒瓊，易宗容，等.維生素A飼喂量對種公豬精液品質的影響［J］.安徽農業科學，2008，36（33）：14540-14544.

［5］樵星芳，艾必燕，宋代軍.煙酸鉻對公豬精液品質的影響［J］.糧食與飼料工業，2006，（3）：41-42.

［6］玉榮，包花爾，斯日古楞.不同月齡、不同品種種公豬精液品質的比較試驗［J］.2014，（7）：43-44.

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