西黃清醒丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

陳 琤

西黃清醒丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

陳 琤

（重慶市黔江食品藥品檢驗(yàn)所，重慶 400000）

目的 完善西黃清醒丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法 采用TLC法鑒別方中木香，用HPLC法測定方中黃芩苷的含量。結(jié)果TLC鑒別色譜特征斑點(diǎn)明顯。黃芩苷進(jìn)樣量在0.08936～0.8936 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，R=0.9996。平均加樣回收率為98.98%，RSD為0.28%（n=6）。結(jié)論 所建立的方法專屬性強(qiáng)，重復(fù)性好，可用于西黃清醒丸的質(zhì)量控制。

西黃清醒丸；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；木香；黃芩苷

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器和試藥

島津LC-20AT高效液相色譜儀（日本島津公司）；SB-5200 DTDN超聲波清洗機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）；GZX-9076 MBE電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯和黃芩苷對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院）；西黃清醒丸（北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠，批號(hào)：3010336、15010044、16010046）。甲醇、磷酸為色譜純，其余試劑均為分析純。

1.2 木香的TLC鑒別

1.2.1 溶液的制備 取本品6 g，剪碎，加適量乙醇浸提，過濾，殘?jiān)栏伞＜尤燃淄?0 mL，加熱回流30 min[2]，濾過，濾液低溫?fù)]散至約1 mL，作為供試品溶液。取木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品，加三氯甲烷制成每1 mL含1 mg的溶液。取缺木香的陰性樣品適量，同發(fā)制備陰性對(duì)照溶液。

1.2.2 薄層色譜 照薄層色譜法（中國藥典2015年版四部通則0502）[3]檢驗(yàn)，吸取上訴四種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲烷（1：7）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。

1.3 黃芩苷的含量測定

1.3.1 色譜條件 采用Agilent Eclipse XDB-C18（4.6×250 mm，5 μm，美國安捷倫公司）；流動(dòng)性為甲醇-水-磷酸（48：52：0.2）[4]；流速1.0 mL/min，檢測波長280 nm。在此色譜條件下，供試品中黃芩苷色譜峰和相鄰色譜峰分離度好，陰性對(duì)照無干擾（圖1）

1.3.2 溶液的制備 取剪碎的本品約0.4 g，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，稱定重量，超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）30 min，再加熱回流一小時(shí)，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取取續(xù)濾液2 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解，即得供試品溶液。取黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成0.02 mg/mL的照品溶液。取缺黃芩的陰性樣品適量，制備陰性對(duì)照溶液。

圖1 黃芩苷對(duì)照品（A）、西黃清醒丸（B）和陰性對(duì)照（C）的HPLC圖

表1 黃芩苷回收率試驗(yàn)結(jié)果

1.3.3 線性關(guān)系 精密稱取黃芩苷對(duì)照品0.01117 g，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取0.4 mL、0.6 mL、1 mL、2 mL、4 mL分別置50 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別進(jìn)樣10 μl，測定峰面積，以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行回歸，得方程：A=3e+07x+25955（R=0.9996），表明黃芩苷進(jìn)樣量在0.08936～0.8936 μg的范圍內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系。

1.3.4 精密度試驗(yàn) 取1.3.2項(xiàng)下對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，每次10 μL，測得黃芩苷峰面積的RSD為1.0%，表明儀器精密度良好。

1.3.5 重復(fù)性試驗(yàn) 按1.3.2項(xiàng)下方法，取同一批樣品分別制備6份供試品溶液，測定黃芩苷的含量，結(jié)果RSD小于2.0%，表明方法重復(fù)性良好。

1.3.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液分別于0、2、4、6、8 h進(jìn)樣，每次10 μL，測定峰面積，結(jié)果RSD為0.2%，表明供試品溶液至少在8h內(nèi)穩(wěn)定。

1.3.7 回收率試驗(yàn) 取已知含量的樣品（批號(hào)16010046）6份各約0.4 g，精密稱定，分別置6個(gè)具塞錐形瓶中，各精密加入黃芩苷對(duì)照品溶液（2.351 2 mg/mL）1、1、2、2、3、3 mL按1.3.2項(xiàng)下方法制備，測定黃芩苷的含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表2 含量測定結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，樣品中黃芩苷的回收率符合有關(guān)技術(shù)要求。

1.3.8 樣品含量測定 精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μL，測定（按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算），計(jì)算，結(jié)果見表2。

2 討論

在木香的薄層鑒別中，最開始是直接加三氯甲烷提取，加熱回流3 min，濾過，濾液低溫?fù)]散至1 mL后作為供試品溶液。試驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)直接用三氯甲烷提取，除木香以外，也提取出其他物質(zhì)，存在干擾。為了排除干擾，選擇先用乙醇浸提，除去其他雜質(zhì)，再用三氯甲烷回流提取。經(jīng)驗(yàn)證，此方法效果更好。

采用高效液相色譜法測定黃芩含量時(shí)，采用了兩種方法。一種是直接加甲醇提取，超聲45 min[5]作為供試品溶液的提取方法。一種是加甲醇提取，超聲30 min，加熱回流提取一小時(shí)，過濾，作為供試品溶液。試驗(yàn)后，第二種方法較理想，此方法專屬性高、分離度好，陰性對(duì)照無干擾。

[1] 衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑.第六冊.[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1992.

[2] 國家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[3] 國家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國藥典（四部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[4] 李靜. HPLC法測定西黃清醒丸中黃芩苷的含量[J].牡丹江師范學(xué)院，2002（4）：23-24.

[5] 謝紀(jì)珍.平喘寧顆粒中黃芩苷的含量測定[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥.2007，18（10）：2400-2401.

Research on the QualityStandard of Xihuang Qingxing pill

Chen Zheng
（Chongqing Qianjiang Food and Drug Administration，Chongqing 400000，China）

Objective to improve the quality standard of Xihuang Qingxing pill. Methods the TLC method was used to identify Radix aucklandiae and the content of baicalin was determined by HPLC. Results the developed TLC spots was quite clear. The calibration curve of baicalin was linear within 0.08936～0.8936 μg，R=0.9996. The average recovery rate of 98.98%，and RSD of 0.28%（n=6）. Conclusion this method specificity strong and reproducibility，and suitable for the quality control of Xihuang Qingxing pill.

xihuang qingxing pill；quality standard；radix aucklandiae；baicalin西黃清醒丸收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第六冊，由黃芩、木香、梔子等十味中藥組成。具有清利咽喉，解熱除煩的功效，用于肺胃蘊(yùn)熱引起的口苦舌燥，咽喉腫痛，煩躁不安，氣滯胸滿，頭暈耳鳴等癥[1]。其中，黃芩，木香作為處方中重要組成部分。黃芩具有清熱燥濕，瀉火解毒的功效，主要含黃酮類化合物。木香具有行氣止痛、健脾消食的功效，主要含揮發(fā)油，油中有木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯等主要成分。為了更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證其療效，所以本次研究建立了處方中木香的TLC鑒別和黃芩的HPLC含量測定方法。

陳琤，本科，主管藥師、藥品檢驗(yàn)室主任，研究方向：藥品、化妝品的質(zhì)量檢驗(yàn)。