非酒精性脂肪肝患者血清脂肪細胞因子Chemerin與IL-1β、IL-8的相關性研究

賴 敏，張仕華，晉瓊玉，黃 雋，徐 靜，曾洪燕，秦亞錄，吳多江，葛 斌，徐 革，吳 攀

(成都市郫都區人民醫院 a．消化內科;b．心內科;c．腎內科;d．檢驗科，四川 成都 611730)

非酒精性脂肪肝患者血清脂肪細胞因子Chemerin與IL-1β、IL-8的相關性研究

賴 敏a，張仕華a，晉瓊玉a，黃 雋a，徐 靜a，曾洪燕b，秦亞錄b，吳多江c，葛 斌d，徐 革d，吳 攀a

(成都市郫都區人民醫院 a．消化內科;b．心內科;c．腎內科;d．檢驗科，四川 成都 611730)

目的 探討非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者血清中脂肪細胞因子Chemerin與白介素(IL)-1β、IL-8的相關性。方法2014年1月至2015年6月我院60例NAFLD患者，同期健康體檢者29例(對照組)。檢測兩組血清脂肪細胞因子Chemerin、IL-1β和IL-8水平，并分析其相關性。結果NAFLD組血清Chemerin、IL-1β、IL-8明顯高于對照組(P＜0.05)，Chemerin與IL-1β和IL-8呈正相關(P＜0.01)。結論NAFLD患者血清脂肪因子Chemerin顯著升高，且與IL-1β和IL-8密切相關。chemerin、IL-1β和IL-8可能參與了NAFLD的發生、發展。

脂肪細胞因子;chemerin;非酒精性脂肪肝;白介素-1β;白介素-8

隨著人們生活方式與飲食習慣的改變，非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)的發病率逐年增加，成為慢性肝病的常見原因［1］，我國 NAFLD的患病率約為 15%［2］。研究發現，NAFLD與肥胖、胰島素抵抗等代謝綜合征密切相關［3］，存在脂肪組織和肝臟等的天然免疫功能紊亂［4］，并且可能是胰島素抵抗并發氧化應激反應，是在首次打擊的基礎上，由活性氧誘導的發生在肝臟實質細胞內的炎癥反應［5］。近年研究認為，脂肪組織是內分泌器官之一，能分泌多種脂肪細胞因子，包括瘦素、脂聯素和抵抗素等，在能量代謝中起重要作用［6］。Chemerin是2007年被確認的一種新的脂肪細胞因子，不僅可通過自分泌或旁分泌途徑調節脂肪細胞代謝，還具有促炎作用，與肥胖和代謝綜合征等密切相關。本研究探討 NAFLD患者血清Chemerin水平的變化及其與IL-1β和IL-8的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇我院消化內科2014年1月至2015年6月住院治療的NAFLD患者60例(NAFLD組)，其中非酒精性脂肪性肝炎21例，非酒精性單純性脂肪肝39例，均符合2010年中華醫學會肝病分會非酒精性脂肪性肝病診斷標準［7］。其中男34例，女26例，年齡(47.21±11.79)歲。排除病毒性肝炎、藥物性肝炎、自身免疫性肝病、肝豆狀核變性、全胃腸外營養、甲狀腺功能亢進或減退、惡性腫瘤、血液系統疾病、阻塞性睡眠呼吸暫停、嚴重感染及心肺功能不全、多囊卵巢綜合癥、處于妊娠期、哺乳期及口服避孕藥女性及可導致脂肪肝的其他疾病。選取同期我院健康體檢者29例(對照組)，男14例，女15例，年齡(43.17±14.14)歲。兩組性別、年齡等一般資料比較，差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。所有入選患者均簽署書面知情同意書。

1.2 方法兩組均在清晨空腹狀態下抽靜脈血1管離心后，將血清放置在－80℃保存待測。采用雙位點夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)測定人血清IL-1β、IL-8和Chemerin水平。Chemerin ELISA試劑盒購自英國Abcom公司，IL-1β和IL-8試劑盒購自美國Biotech公司，操作步驟嚴格按照說明書進行、采用酶標儀(上海賽默非世爾公司Mutiskan Mk3型)測定吸光度值，選定波長450 nm。

1.3 統計學方法采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析。計量資料以均數±標準差表示，組間比較采用t檢驗;相關性分析采用Pearson相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清 IL-1β、IL-8和 Chemerin水平比較NAFLD患者外周血IL-1β、IL-8和Chemerin水平均高于對照組(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組血清IL-1β、IL-8和Chemerin水平比較

2.2 血清Chemerin與IL-1β和IL-8水平的相關性 NAFLD患者血清Chemerin與IL-1β和IL-8水平均呈正相關(r分別為0.836、0.766，P＜0.01)。

3 討論

NAFLD是一種與胰島素抵抗和遺傳易感性密切相關的代謝應激性肝臟損傷，疾病譜包括非酒精性單純性脂肪肝(Nonalcoholic simple fatty liver，NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(Nonalcoholic fatty hepatitis，NASH)及其相關肝硬化和肝細胞癌，其中定居于肝內的巨噬細胞即Kupffer細胞在其發病機制中起重要作用。游離脂肪酸高度氧化增加氧自由基的形成，進一步導致脂質過氧化和線粒體的功能紊亂，進而導致細胞因子(主要包括腫瘤壞死因子、IL-6、IL-8、IL-10和C反應蛋白等)的釋放和肝細胞損傷。炎癥的持續存在則激活肝臟星狀細胞，還包括其它細胞的活動，如I型膠原和IV型膠原細胞的沉積，從而啟動肝臟纖維增生，形成肝纖維化。進展性肝纖維化及持續炎癥壞死可導致肝小葉結構改建，最終形成肝硬化。因此炎癥在整個NAFLD的發生和發展中起到重要作用。

Chemerin是新發現的脂肪細胞因子之一，以前體蛋白Proehemerin形式分泌，經絲氨酸蛋白酶水解激活后具有活性，中性粒細胞、凝血纖溶系統和炎癥級聯反應中的凝血因子Ⅻa、Ⅶa、纖溶酶、尿激酶、纖維蛋白溶酶原激活物(t-PA)、彈性蛋白酶、組織蛋白酶等均可激活 Chemerin［8］。Chemerin在人體的多種組織廣泛表達，在脂肪組織、腎上腺、肝臟、肺、胰腺、胎盤、卵巢、皮膚等都有表達，其中主要表達于白色脂肪組織、肝臟和肺。

有研究發現Chemerin血清濃度與炎癥介質高敏C 反應蛋白、IL-6，TNF-a呈正相關［9］;另一研究也證實在小鼠脂肪細胞成熟過程中，chemerin和chemR23的表達顯著升高，并且在高脂飲食喂養的小鼠中二者表達水平上調［10］。還有研究者［11］通過對膽堿-蛋氨酸缺乏飼料(MCD)誘導NAFLD不同時期大鼠肝臟Chemerin及其受體表達的動態變化研究發現，Chemerin及其受體的表達變化可能參與了MCD飼料誘導的NAFLD的發病過程。以上研究表明，Chemerin不僅作為脂肪細胞因子發揮作用，而且可作為趨化因子發揮趨化作用，通過旁分泌途徑，使巨噬細胞向肝臟細胞募集進而釋放炎性因子，導致肝臟炎性反應增強及加重胰島素抵抗，參與NAFLD的發生。體內外的研究結果表明Chemerin可能在炎癥反應的不同階段起不同的作用，在炎癥初始階段可能發揮招募各類免疫細胞，促進炎癥發生，增強免疫應答的作用;而在炎癥緩解期可能加速中性粒細胞的清除，抑制巨噬細胞活化，發揮抗炎作用［12］。NAFLD最主要的病理改變為肝細胞脂肪變及炎癥細胞的浸潤。這些結果也提示，Chemerin可能在非酒精性脂肪性肝病的炎癥過程中發揮作用［13］。

IL-1大部分來源于激活的單核/巨噬細胞，另外少部分來源于心肌細胞和淋巴細胞［14］。IL-1據其等電點不同可分為IL-1α型和IL-1β型。有研究人員發現IL-1β增加脂質的在肝細胞的沉積，調節炎癥反應，肝胰島素抵抗和纖維化，進一步表明IL-1β在肝臟炎癥中起重要作用［15］。研究發現IL-1β在NAFLD外周血清中含量較正常對照組明顯升高［16］。IL-8 是在 IL-1、IL-3、TNF-α、粒-巨噬細胞集落刺激因子、內毒素的刺激下由單核細胞/巨噬細胞、腫瘤細胞及血管內皮細胞等多種細胞分泌的細胞因子，有研究證實而IL-1是最重要的刺激物［17］，NAFAD患者外周血 IL-8明顯升高，考慮 IL-8和NAFAD 的發病有關［18］。

Chemerin具有趨化作用，可通過與巨噬細胞表面表達的ChemerinR結合，趨化巨噬細胞和樹突狀淋巴細胞向炎癥部位聚集，而巨噬細胞定居在肝內即為Kupffer細胞，Kupffer細胞是NAFLD氧自由基的重要來源細胞，可釋放過氧化氫、一氧化氮(NO)，募集中性粒細胞和淋巴細胞等炎性反應細胞，使之在肝內聚集，誘發或加劇肝內的炎性反應［19］。同時，激活的Kuffer細胞釋放炎性反應因子TNF-α、IL-1、IL-6，抑制胰島素受體底物-1絲氨酸磷酸化，進而抑制胰島素受體酪氨酸磷酸化，一方面使激素敏感性脂肪酶活性增強，促進周圍脂肪組織分解，產生大量的游離脂肪酸，通過門靜脈入肝使脂質在肝內聚積，促進肝細胞脂肪變;另一方面降低脂蛋白脂肪酶活性，減少乳糜微粒中甘油三醋的分解，導致高脂血癥［20］。國外研究者［21］發現 NAFLD 患者血漿Chemerin水平明顯較正常人高且NASH患者血漿中chemerin水平較NAFL患者高，表明Chemerin與炎性反應、NAFLD密切相關。此外，還有學者［22］通過研究發現病態性肥胖伴脂肪肝患者血液Chemerin水平與脂肪肝纖維化程度呈正相關，經過校正體重指數后，重度肝纖維化伴炎性反應者Chemerin水平較輕度肝纖維化伴炎性反應者明顯升高，表明Chemerin還與NAFLD的纖維化密切相關。

本研究發現，NAFLD患者血清Chemerin水平顯著升高，提示血清Chemerin可能是NAFLD發病的炎癥因子之一。NAFLD患者血清Chemerin水平與IL-1β、IL-8密切相關，提示其升高可能與機體存在的炎癥反應有一定關系，可以推測Chemerin在NAFLD炎癥發病機制中的起重要作用。

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The correlation between serum levels of IL-1β，IL-8 and chemerin in patients with non-alcoholic fatty liver disease

LAI Mina，ZHANG Shi-huaa，JIN Qiong-yua，HUANG Juna，XU Jinga，ZENG Hongyanb，QIN Ya-lub，WU Duo-jiangc，GE Bind，XU Ged，WU Pana(a．Department of Gastroenterology，b．Department of Cardiology，c．Department of Nephropathy，d．Department of Clinical Laboratory，Pidu District People's Hospital，Chengdu 611730，China)

WU Pan

Objective To investigate the association of serum chemerin with interleukin-1β (IL-1β)and interleukin-8(IL-8)in patients with non-alcoholic fatty liver disease(NAFLD)．MethodsSixty NAFLD patients and 29 healthy controls from January 2014 to June 2015 in our hospital were involved in the study．Serum IL-1β，IL-8 and chemerin were measured and their relationship was analyzed．ResultsSerum levels of IL-1β，IL-8 and chemerin in the NAFLD patients were significantly higher than those in the healthy controls(P ＜ 0.05)．Linear correlation analysis showed that chemerin was positively correlated with IL-1β and IL-8(P ＜ 0.01)．Conclusion The serum fatty factor chemerin is significantly increased in patients with NAFLD，and closely related to IL-1β and IL-8．Thus，chemerin，IL-1β and IL-8 may be involved in occurrence and development of NAFLD．

Chemerin;Nonalcoholic fatty liver disease;Interleukin-1β ;Interleukin-8

R575

A

1672-6170(2017)04-0064-03

2016-10-21;

2017-01-24)

成都市衛計局科研基金資助項目(編號:2013072)

吳 攀