亳白芷鮮切片加工技術的研究

朱 勇，卜令雷，馬靈珍，楊文峰

（亳州職業技術學院 藥學院，安徽 亳州 236800）

亳白芷鮮切片加工技術的研究

朱 勇，卜令雷，馬靈珍，楊文峰

（亳州職業技術學院 藥學院，安徽 亳州 236800）

目的：優選亳州地產藥材白芷最佳鮮切片工藝，為進一步研究白芷的新型加工工藝積累資料。方法：以白芷傳統加工工藝為參考，以水分、浸出物、色澤、歐前胡素和異歐前胡素的總含量為指標，對新采白芷進行鮮切片研究，針對切片時機與干燥方法、切片厚度與干燥時間進行優選，并與傳統工藝指標比對。結果：亳白芷鮮切片最佳工藝是取新產干凈鮮白芷，在60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風烘8 h，冷卻至室溫。

亳白芷；歐前胡素；異歐前胡素；鮮切片

白芷，系古本草傳統藥用白芷，為傘形科當歸屬植物白芷Angelica dahurica（Fisch.ex Hoffm.）Benth.et Hook．f的干燥根。因其根呈圓錐形，斷面白色，故名曰白芷。白芷性溫，氣芳香，味辛，微苦，具有散風除濕、通竅止痛、消腫排膿的作用，臨床廣泛應用[1]。亳州地區所產白芷被稱為亳白芷，是該地區的道地藥材之一，近年來種植白芷面積達30～40 km2，是白芷的主產區。[1]由于白芷個大且淀粉含量高，所以干燥時間長且易霉變，當地藥農常常采用硫磺熏蒸避免霉變，不過這嚴重影響了白芷的質量。本研究通過鮮切片法直接在產新后切片干燥，試從根源上改變這一現狀，提高白芷飲片的質量。

1 儀器、試劑和材料

1.1 儀器

電熱恒溫干燥箱（202-0型，天津泰斯特儀器有限公司）；高速中藥粉碎機（111型，浙江瑞安市永歷制藥機械有限公司）；電熱恒溫水浴鍋（HH-2型，浙江金壇晶玻試驗儀器廠）；蒸發皿；干燥器；安捷倫1260超高壓液相色譜儀（二元泵，在線脫氣機、自動進樣器、柱溫箱）；電子天平（AUW220D，日本島津）；超聲波清洗儀（SK250HP，上海科導超聲儀器有限公司）。

1.2 試劑

歐前胡素（中國食品藥品檢定研究院，批號：CFLG-LCC5）；異歐前胡素（中國食品藥品檢定研究院，批號：ERSN-W9SH）；色譜乙腈（美國天地）；色譜甲醇（美國天地）；超純水（實驗室純水機，Direct-Q5，法國默克密理博公司制備）；其他試劑為分析純。

1.3 材料

相關實驗選取實驗原料為傘形科當歸屬植物白芷的干燥根，于2016年10月在亳州市不同白芷藥材產區采收樣品，經毫州職業技術學院藥學院中藥教研室主任馬靈珍教授鑒定，所采收的樣品都是傘形科當歸屬植物白芷的干燥根。

2 方法與結果

2015年版《中華人民共和國藥典》一部規定,對白芷藥材的質量檢測指標是對白芷中歐前胡素的含量進行測定，因白芷中成分較多，僅以歐前胡素的含量為指標略顯不足，所以在此選取了白芷中含量較高的歐前胡素及異歐前胡素兩種香豆素類成分為檢測指標，并根據相關文獻對歐前胡素的測定方法進行了部分改進，并建立了歐前胡素及異歐前胡素兩種香豆素類成分的分離測定方法。[2-3]

2.1 實驗條件

2.1.1 色譜柱與進樣量

使用反相 C18色譜柱：色譜柱的型號為Aglient Zorbax SB-C18，色譜柱的規格為（4.60×250 mm，5 μm），柱溫控制為25 ℃，樣品及對照品的進樣量為20 μL。[4]

2.1.2 流動相

經過參考相關文獻，對實際的試驗進行選擇，最終以乙腈∶水（70%∶30%）為流動相，流速1 mL/min，檢測波長254 nm。[5]

2.2 對照品和供試品溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備

精密稱取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥12 h的歐前胡素對照品5.05 mg、異歐前胡素對照品2.02 mg，置于50 mL容量瓶中，用甲醇作溶劑溶解，定容至刻度，即得混合對照品溶液。進樣后得出對照品溶液的HPLC圖譜（見圖1）。2.2.2 供試液溶液的制備

圖 1 對照品歐前胡素和異歐前胡素的HPLC圖譜

精密稱取白芷粉末（過三號篩）0.4050 g，置50 mL容量瓶中，加甲醇45 mL，超聲處理（功率300 W，頻率50 kHz）1 h，取出，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，過濾，取續濾液，然后用0.45 μm的微孔濾膜過濾，即得。其HPLC圖譜（見圖2）。

圖 2 白芷樣品溶液的HPLC圖譜

2.3 系統適用性實驗

2.3.1 方法學考察

分別精密吸取2.2.1所配制的混合對照品溶液0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL置于10 mL容量瓶中，分別加甲醇定容至刻度。設置進樣量20 μL，液相色譜儀依次進樣，依法測定。[5]以混合對照品的濃度（以10 mL試液所含2.2.1所配制的混合對照品溶液體積表示）為橫坐標（X），色譜峰的面積值為縱坐標（Y），同時得出兩種對照品的回歸方程：歐前胡素 Y=1250.7X+106.53，r＝0.9997；異歐前胡素 Y=420.06X+34.575，r=0.9997。結果表明：歐前胡素在5.1～50.5 μg/mL的濃度范圍內呈現出良好的線性關系，異歐前胡素在2.0～20.2 μg/mL的濃度范圍內呈現出良好的線性關系。

表1 歐前胡素、異歐前胡素線性范圍

2.3.2 精密度試驗

取2.2.1所配制的混合對照品溶液，連續進樣6次，進樣量為10 μL，同時測定歐前胡素和異歐前胡素2種成分的色譜峰面積。得出RSD值分別為1.2 %，1.83%，結果表明所選擇的實驗條件的精密度符合要求。

2.3.3 穩定性考察

取2.2.2所制備的供試樣品溶液，放置0 h，2 h，4 h，8 h，12 h，24 h，48 h后分別進樣，并按2.1色譜條件測定其歐前胡素和異歐前胡素的峰面積。其RSD值分別為1.02%，1.16%,說明所制備的樣品溶液在48 h內穩定。

2.3.4 重復性試驗

取同一采收區所采收的白芷樣品，根據2.2.2方法制備樣品溶液，并按2.1色譜條件對樣品中歐前胡素、異歐前胡素的含量進行測定，其RSD值分別為1.25%，0.483%，結果表明白芷樣品的重復性很好。

2.3.5 回收率試驗

取已知歐前胡素、異歐前胡素兩種成分含量的白芷樣品各5份，精密稱定，精密加入兩種對照品，按2.2.2樣品處理制備樣品溶液，并按2.1色譜條件測定方法測定其兩種成分含量，測定結果：歐前胡素平均回收率為98.56%、RSD為1.121%，異歐前胡素為97.98%、RSD為1.3723%，結果表明白芷樣品的回收率很好。

2.3.6 系統適應性實驗

按照該色譜條件分別注入甲醇的對照品溶液及供試品溶液進行測定，結果表明，在該色譜條件下，按照甲醇的色譜峰計算，理論塔板數較高、拖尾因子及分離度均符合規定。考慮到不同色譜柱的性能以及流動相比例等條件的差異，理論板數按甲醛色譜峰計算應不低于2 000。

2.4 亳白芷產地鮮切片技術的研究

2.4.1 亳白芷鮮切片的干燥方法及切片時機的優化

2.4.1.1 樣品處理

取譙城區譙東鎮大黃莊的新產鮮白芷去除泥土，去除細根和雜質，用清水沖洗干凈，取8份樣品分別作如下處理：1）稱取1 000 g，切0.45 cm厚片，直接在太陽下曬干，打成粉末，分別過三號篩；2）稱取1 000 g，曬去30%重量的水分，切0.45 cm厚片，直接在太陽下曬干，打成粉末，分別過三號篩；3）稱取1 000 g，曬去60%重量的水分，切0.45 cm厚片，直接在太陽下曬干，打成粉末，分別過三號篩；4）稱取1 000 g，曬去70%重量的水分，切0.45 cm厚片，直接在太陽下曬干，打成粉末，分別過三號篩；5）稱取1 000 g，切0.45 cm厚片，60 ℃烘干，打成粉末，分別過三號篩；6）稱取1 000 g，在60℃烘去30%重量的水分，切0.45 cm厚片，60 ℃烘干，打成粉末，分別過三號篩；7）稱取1 000 g，在60 ℃烘去60%重量的水分，切0.45 cm厚片，60 ℃烘干，打成粉末，分別過三號篩；8）稱取1 000 g，在60 ℃烘去70%重量的水分，切0.45 cm厚片，60 ℃烘干，打成粉末，分別過三號篩。

2.4.1.2 試驗方法

將上述不同產區的白芷樣品粉末，按2.2.2實驗條件配制樣品溶液，進行實驗測定水分、浸出物、歐前胡素和異歐前胡素含量。結果見表2和圖3。

表2 亳白芷鮮切片不同干燥方法及切片時機下質量檢測結果/%

圖 3 鮮切片厚度及干燥溫度下白芷樣品溶液的HPLC圖譜

通過對亳白芷鮮藥材兩個不同干燥方法各自又有4種不同切片時機的9批樣品的質量考察，分別通過水分、灰分、浸出物及含量測定等方面進行分析，結果發現8個樣品均能達到2015版《中華人民共和國藥典》規定的標準要求，其中在8個樣品中灰分數據比較接近，差別不大；水分略有差別，水分檢測數據表明：60 ℃熱風烘烤法略低于晾曬干燥法，但兩種干燥法獲得飲片含水量均在9%左右，差別不大，符合12%的標準；在浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量測定數據表現出相同的規律：7號樣品＞3號樣品＞6號樣品＞8號樣＞4號樣品＞5號樣品＞2號樣品＞1號樣品，由此可知：7號樣品工藝最優，即取凈選后鮮白芷1 000 g在60 ℃下，烘去60%重量的水分切片干燥。2.5 亳白芷鮮切片厚度及干燥時間的優化

白芷鮮切片的厚度及其干燥所用時間是影響白芷質量的重要因素。實驗將白芷鮮切片的厚度和干燥時間分別設成3個等級9種情況進行試驗。

2.5.1 樣品處理

取譙城區譙東鎮大黃莊的新產鮮白芷去除泥土，去除細根和雜質，用清水沖洗干凈，取9份樣品分別作如下處理：1）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.25 cm厚片，60 ℃熱風烘6 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過三號篩；2）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.25 cm厚片，60 ℃熱風烘8 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過三號篩；3）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.25 cm厚片，60 ℃熱風烘10 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過三號篩；4）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風烘6 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過三號篩；5）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風烘8 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過三號篩；6）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風烘10 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過三號篩；7）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.45 cm厚片，60 ℃熱風烘6 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過三號篩；8）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.45 cm厚片，60 ℃熱風烘8 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過三號篩；9）稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.45 cm厚片，60 ℃熱風烘10 h，冷卻至室溫，打成粉末，分別過三號篩。

2.5.2 試驗方法

將上述不同產區的白芷樣品粉末，按2.2.2 配制樣品溶液，測定水分、浸出物、歐前胡素和異歐前胡素含量。結果見表3和圖4。

表3 亳白芷不同鮮切片厚度及干燥時間的質量檢測結果/%

圖 4 不同鮮切片厚度及干燥時間下白芷樣品溶液的HPLC圖譜

上述檢測數據表明：除7號樣品外均能達到2015版《中華人民共和國藥典》規定的標準要求，但只有1、2、3、5、6樣品水分含量較低干燥效果較理想；浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量測定數據表現出相同的規律：7號樣品＞4號樣品＞5號樣品＞1號樣＞8號樣品＞6號樣品＞9號樣品＞2號樣＞3號樣品，浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量隨著鮮切片厚度增加而增大；在同等切片厚度條件下熱風烘培時間越長浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量越低；考慮水分含量因素，發現5號樣品水分含量符合標準的樣品中浸出物和歐前胡素、異歐前胡素兩含量最高。

2.6 工藝驗證

按照2.4和2.5確定的亳白芷藥材的亳白芷鮮切片最佳工藝為：取亳新產鮮白芷去除泥土，去除細根和雜質，用清水沖洗干凈，稱取1 000 g，60 ℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風烘8 h，冷卻至室溫。制備三批樣品，分別按照上述方法測定其指標性成分含量，結果見表4。

表4 亳白芷鮮切片工藝三批驗證試驗結果/%

結果表明，三批驗證試驗樣品的測定結果與2.4和2.5測定結果接近，優選出的白芷藥材的鮮切片最佳工藝可行、穩定。

3 結論與討論

亳白芷鮮切片最佳工藝為：取亳新產鮮白芷去除泥土，去除細根和雜質，用清水沖洗干凈，稱取1 000 g，60℃烘去60%水分，切0.35 cm厚片，60 ℃熱風烘8 h，冷卻至室溫。研究數據表明，鮮切片的白芷飲片質量明顯優于傳統加工所得白芷飲片的質量，且可以有效根除硫磺熏蒸。不過，白芷鮮切片技術的推廣需要飲片加工企業直接與中藥材種植戶對接，即：產新白芷直接送到飲片加工企業進行鮮切片加工。若當地政府在政策上進行宏觀協調，將會大大促進亳白芷鮮切片技術產業化進程。

[1]牛倩，王德群，劉耀武.亳州栽培藥材的歷史變遷 [J].安徽醫藥，2010（2）：232-233.

[2]黃新蘋，包淑云，楊隆河，等. 中藥川白芷的化學成分研究[J].河南師范大學學報（自然科學版），2011（4）：88-90.

[3]盧嘉.中藥杭白芷化學成分的研究[J].第二軍醫大學學報，2000（2）：22.

[4]李宏宇，戴躍進，謝成科.中藥白芷硫薰前后香豆素成分含量比較[J].中國中藥志，1991（1）：27-28.

[5]朱紅.白芷的質量控制與體內外代謝研究[D].石家莊：河北醫科大學，2011：15-16.

（責任編輯 張 鐵）

Processing Technology Research of Fresh Bozhou Angelica Dahurica Slices

ZHU Yong, PU Linglei, MA Lingzhen, YANG Wenfeng (School of Pharmacy, Bozhou Vocational and Technical College, Bozhou Anhui 236800, China)

Purpose: The paper accumulates new processing techniques for further study of Angelica Dahurica process using fresh cut slice from Bozhou. Method: The timing, drying method, slice thickness and drying time of fresh newly-collected Bozhou Angelica Dahurica slices are optimized by using moisture content, extract, color, total content of Imperatorin and Isoimperatorin as quality indicators. Results: The optimal processing conditions of clean newly-produced Bozhou Angelica Dahurica slices are as follows: removing 60% moisture content at 60 ℃, 0.35cm slice thickness, heated air drying for 8h at 60 ℃, and cooling to room temperature.

Angelica Dahurica from Bozhou; Imperatorin; Isoimperatorin; fresh slices

R282.4

A

1674 - 9200（2017）03 - 0015 - 05

2016 - 11 - 29

朱勇，男，安徽亳州人，亳州職業技術學院藥學院助教，碩士，主要從事中藥材的檢測與加工工藝研究；卜令雷，男，安徽毫州人，毫州職業技術學院助教，碩士，主要從事中藥材栽培與鑒定研究；馬靈珍，男，安徽毫州人，毫州職業技術學院副教授，碩士，主要從事中藥材炮制工藝研究。