油松胚性愈傷組織培養中褐化因素研究及增殖培養基的優化

付雙彬，李 慧，趙 健，符學軍，朱松林，張金鳳

(1 林木育種國家工程實驗室/林木花卉遺傳育種教育部重點實驗室/國家林業局樹木花卉育種生物工程重點開放實驗室/北京林業大學 生物科學與技術學院，北京100083；2 山西呂梁山國有林管理局 國家油松良種基地，山西 臨汾 041300)

油松胚性愈傷組織培養中褐化因素研究及增殖培養基的優化

付雙彬1，李 慧1，趙 健1，符學軍2，朱松林2，張金鳳1

(1 林木育種國家工程實驗室/林木花卉遺傳育種教育部重點實驗室/國家林業局樹木花卉育種生物工程重點開放實驗室/北京林業大學 生物科學與技術學院，北京100083；2 山西呂梁山國有林管理局 國家油松良種基地，山西 臨汾 041300)

【目的】調查油松Pinus tabulaeformis胚性愈傷組織增殖培養階段不同因素對于褐化產生的影響，并結合增殖率對培養基進行調整優化以降低褐化率，提高利用率。【方法】以3個年份的9個細胞系的油松胚性愈傷組織為材料，利用單因素試驗設計對放置不同數量愈傷塊、pH、植物凝膠含量、糖種類和含量以及培養時間的褐化率和增殖率進行測定計算。采用正交試驗選出最佳培養條件。【結果】單因素試驗結果表明，褐化率在不同基因型間差異顯著，且與增殖繼代年齡顯著正相關；在培養皿中放置6～7塊愈傷組織、pH 5.8～6.0、培養基中添加2.0～3.0 g·L–1植物凝膠、添加10 g·L–1蔗糖能保證較低的褐化率和較高的增殖率，且蔗糖優于葡萄糖和麥芽糖。【結論】結合正交設計，90 mm培養皿中放置7塊愈傷組織，培養基中添加2.5 g·L–1植物凝膠、10 g·L–1蔗糖，調節pH為5.9時，褐化率、增殖率和利用率最理想。……