右美托咪定對冠心病大鼠血小板功能的影響及心肌保護作用

潘晨 章玲賓 張寧 麻妙群 徐巧敏 樊理華 張曄 丁友法

右美托咪定對冠心病大鼠血小板功能的影響及心肌保護作用

潘晨 章玲賓 張寧 麻妙群 徐巧敏 樊理華 張曄 丁友法

目的探討右美托咪定對冠心病大鼠血小板功能的影響，評價其可能的心肌保護作用。方法SD大鼠30只，隨機分為正常對照組、模型對照組和右美托咪定組，各10只。高脂飲食和腹腔注射垂葉后體素建立冠心病模型。右美托咪定組大鼠尾靜脈注射右美托咪定10μg/kg，連續5天，正常對照組和模型對照組給予等劑量的生理鹽水。檢測各組大鼠血漿血栓烷素B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-k-PGFlα）水平，評價右美托咪定對大鼠血小板功能的影響，分析肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌鈣蛋白-Ⅰ（TroponinⅠ）水平，評價右美托咪定對大鼠心肌保護作用。結果與模型對照組比較，右美托咪定組血漿TXB2[（28.67±5.38）pg/mL比（38.25±7.79）pg/mL]、CK-MB [（10.31±1.81）IU/L比（15.40±2.94）IU/L]、TroponinⅠ[（10.07±0.97）ng/mL比（13.66±1.36）ng/mL]水平明顯降低（P＜0.01，P＜0.05），6-k-PGFlα[（27.64±4.61）pg/mL比（21.19±7.72）pg/mL]明顯升高（P＜0.05）。結論右美托咪定可能通過改善TXA2和PGI2的不平衡狀態，抑制血小板聚集，對冠心病導致的心肌細胞損傷起到保護作用。

大鼠；冠心??；右美托咪定；血小板功能；心肌保護

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（coronary heart disease，CHD）是危害人類健康的嚴重疾病之一，動脈粥樣硬化和血栓的形成是冠心病病理生理學原因之一，其與血小板活化有著密切的關系[1]。冠心病容易導致心肌缺血，從而導致心肌細胞受損。右美托咪定是α2腎上腺素受體的選擇性激動藥物，可以產生減低交感神經活動的作用，激活I1-咪唑啉受體，穩定血流動力學，有潛在的抗氧化作用[2-3]。α2腎上腺素受體分布于人體的諸多組織中，激活α2腎上腺受體可以激活其下游的多個信號傳導通路，有著多種藥理活性。本文通過建立冠心病模型大鼠，使用右美托咪定進行干預，研究其對大鼠血小板的影響和心肌保護作用。

表1 各組大鼠血脂水平和體質量比較（mmol/L，）

表1 各組大鼠血脂水平和體質量比較（mmol/L，）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；TC：總膽固醇；HDL：高密度脂蛋白；LDL：低密度脂蛋白膽固醇；TG：甘油三酯

組別正常對照組模型組鼠數10 20 TC 0.39±0.06 0.81±0.03** HDL 0.10±0.12 0.39±0.19** LDL 0.53±0.06 0.86±0.39* TG 1.77±0.21 3.88±0.16**體質量（g）311±11.1 458±15.13**

1 材料與方法

1.1 實驗動物30只SPF級雄性健康SD大鼠，體質量（250±50）g，動物飼養在標準的動物籠中，實驗期間自由飲食和飲水，室內溫度保持18～25℃，由安徽醫科大學動物實驗中心提供，許可證編號：SCXK（皖）2011-002。

1.2 主要試劑和儀器右美托咪定注射液（江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，批號13111232）；大鼠血栓素B2（TXB2）ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）；大鼠6-酮前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）；大鼠肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）；大鼠TroponinⅠELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）；大鼠環磷酸鳥苷（cGMP）ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司）。Model680型酶標儀（日本日立公司），Model1575型全自動洗板機（日本日立公司），7600-010型全自動生化分析儀（美國BIORAD公司），高速離心機（上海安亭科學儀器廠，TGL-16B）。

2 實驗方法

2.1 動物模型制備[4-5]通過高脂飲食和腹腔注射垂葉后體素建立冠心病模型。高脂飲食配方：蛋黃粉（10%）、膽固醇（2%）、豬油（10%）、丙硫氧嘧啶（0.2%）、膽酸鈉（0.5%）、正常飼料（77.3%）。每只大鼠每天使用30g高脂食物喂養，連續喂養8周，最后一次喂養前72h，模型組大鼠注射垂葉后體素（30U/ kg），每天1次，連續注射3天。

2.2 動物分組與給藥將大鼠隨機分為正常對照組10只和模型組20只，模型組通過高脂飲食和腹腔注射垂葉后體素建立冠心病模型，造模成功后，再隨機分為模型對照組和右美托咪定組，各10只。右美托

咪定組大鼠尾靜脈注射右美托咪定10μg/kg進行干預，連續給藥5天，每天1次，正常對照組和模型對照組給予等劑量的生理鹽水。

2.3 指標檢測干預后稱大鼠體質量，抽取大鼠股動脈血全自動生化儀進行血脂檢測，包括總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL）、甘油三酯（TG）。大鼠處死前，采集頸動脈血，以2500r/min離心15min，然后取上清液，ELISA法按照試劑盒說明書測定血漿TXB2、6-k-PGFlα、CK-MB、TroponinⅠ水平。

2.4 統計學方法應用SPSS17.0統計軟件。數據以（） 表示，組間比較用t檢驗。

3 結果

3.1 各組大鼠血脂水平和體質量分析與正常對照組比較，模型組大鼠體質量明顯增加（P＜0.01），TC、HDL、LDL、TG水平明顯升高（P＜0.01，P＜0.05）。結果提示模型組大鼠血脂水平明顯高于正常對照組，說明冠心病大鼠模型建立成功。見表1。

3.2 各組大鼠血漿TXB2和6-k-PGFlα比較與正常對照組比較，模型對照組TXB2水平明顯升高（P＜0.01），6-k-PGFlα水平明顯降低（P＜0.05）。與模型對照組比較，右美托咪定組TXB2水平明顯降低（P＜0.01），6-k-PGFlα水平明顯升高（P＜0.05）。見表2。

表2 各組大鼠血漿TXB2和6-k-PGFlα比較（pg/mL，）

表2 各組大鼠血漿TXB2和6-k-PGFlα比較（pg/mL，）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型對照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；TXB2：血漿血栓烷素B2；6-k-PGFlα：6-酮-前列腺素F1α

組別正常對照組模型對照組右美托咪定組鼠數10 10 10 TXB2 22.81±3.96 38.25±7.79** 28.67±5.38△△6-k-PGFlα 31.27±8.53 21.19±7.72* 27.64±4.61△

3.3 各組大鼠血漿CK-MB和TroponinⅠ水平比較

與正常對照組比較，模型對照組CK-MB和TroponinⅠ水平明顯升高（P＜0.01，P＜0.05）；與模型對照組比較，右美托咪定組CK-MB和TroponinⅠ水平明降低（P＜0.01，P＜0.05）。見表3。

4 討論

冠心病是人類發病率和死亡率很高的疾病之一，冠心病主要的病理是冠狀動脈粥樣硬化，從而導致心肌缺血，產生心肌細胞的損傷[6]。CK-MB和TroponinⅠ是常見的心肌損傷的標志物[7]。6-k-PGFlα是前列腺素I2（PGI2）的代謝產物，而前列腺素I2具有抑制血小板聚集的作用，因而通過檢測6-k-PGFlα的表達能夠反映出冠心病的嚴重程度。TXB2是TXA2的降解產物，TXA2能夠促進血小板的聚集，可以導致心肌的缺血。6-k-PGFlα和TXB2的表達水平與血小板的活化有著密切的關系，TXA2和PGI2在正常情況下保持平衡狀態，而冠心病會打破這種平衡，從而使血小板產生黏附、聚集、釋放等作用，導致血栓的形成[8]。

表3 各組大鼠血漿CK-MB和TroponinⅠ水平比較（）

表3 各組大鼠血漿CK-MB和TroponinⅠ水平比較（）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型對照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；CK-MB：酸激酶同工酶；TroponinⅠ：肌鈣蛋白-Ⅰ

組別正常對照組模型對照組右美托咪定組鼠數10 10 10 CK-MB（IU/L）8.96±2.06 15.40±2.94* 10.31±1.81△TroponinⅠ（ng/mL）8.06±1.94 13.66±1.36** 10.07±0.97△△

右美托咪定具有鎮靜、神經保護、抑制交感神經等多種藥理作用[9-10]，但是其對冠心病的血小板活化和心肌細胞的影響目前還不清楚。本研究發現模型對照組TXB2表達水平較正常對照組升高，而6-k-PGFlα水平降低，差異有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01），在使用右美托咪定進行干預后，冠心病模型大鼠TXB2水平降低，6-k-PGFlα水平升高，差異有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01），說明右美托咪定能夠改善冠心病導致的TXA2和PGI2不平衡狀態，從而影響血小板的活化。有研究顯示，右美托咪定可以通過咪唑啉I1受體激活鳥苷酸環化酶增加環磷酸鳥苷，導致血小板聚集抑制[11]。本研究結果提示右美托咪定通過影響TXA2和PGI2而產生一定的血小板抑制作用，研究顯示右美托咪定能有效改善高血糖冠心病患者TXA2和PGI2的平衡[12]，與本研究結果一致，但是具體作用機制還不明確。

CK-MB和TroponinⅠ是心肌損害的標志物，其中TroponinⅠ是心肌細胞損害的特異性標志物[13]。本研究發現模型對照組CK-MB和TroponinⅠ表達水平較正常對照組水平升高，在使用右美托咪定進行干預后，冠心病模型大鼠CK-MB和TroponinⅠ降低，差異有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01）。提示右美托咪定對冠心病模型大鼠有一定的心肌保護作用，其機制可能與其潛在的抗氧化作用有關，還可以穩定血流動力學從而減輕心肌損傷[14-15]。

綜上所述，右美托咪定可以改善冠心病模型大鼠的TXA2和PGI2的不平衡狀態，產生一定的抑制血小板聚集作用，對于冠心病模型大鼠心肌損害也有一定的保護作用，其具體作用機制還需要進一步的研究。

［1］Lala A，Desai AS.The role of coronary artery disease in heartfailure［J］.Heart Fail Clin，2014，10（2）：353-365.

［2］Aslan A，Cemek M，Eser O，et al.Does dexmedetomidine reducesecondary damage after spinal cord injury An experimentalstudy［J］.Eur Spine J，2009，18（3）：336-344.

［3］Arslan M，Metin Comu F，Kücük A，et al.Dexmedetomidine protects against lipid peroxidation and erythrocyte deformability alterations in experimental hepatic ischemia reperfusion injury［J］.Libyan J Med，2012，7（1）：4-11.

［4］郭慧芳.心痛泰調節冠心病大鼠腎素血管緊張素醛固酮系統實驗研究［D］.長沙：湖南中醫藥大學，2015.

［5］徐明.銀杏葉提取物EGB761對冠心病合并高血脂模型大鼠的血脂及同型半胱氨酸的影響［J］.臨床醫藥文獻雜志，2014，1（8）：1300-1301.

［6］Khoroshinina LP，Tur'eva LV，lotov OS，et al.Frequency of some diseases and conditions in geriatric patients with coronary heart disease and various genotypes of transcription factor 7-like 2 protein［J］.Adv Gerontol，2014，27（4）：704-709.

［7］Kruse JM，Enghard P，Schroder T，et al.Weak diagnostic performance of troponin，creatine kinase and creatine kinase-MB to diagnose or exclude myocardial infarction after successful resuscitation［J］.Int J Cardiol 2014，173（2）：216-221.

［8］袁宇.冠狀動脈粥樣硬化相關因子血漿水平變化及奧扎格雷鈉對其干預作用［D］.鄭州：鄭州大學，2010.

［9］Erer D，Ozer A，Arslan M，et al.The protective effects of dexmedetomidine on liver injury-induced myocardial ischemia reperfusion［J］.Bratisl Lek Listy，2014，115（7）：422-426.

［10］Sulaiman S1，Karthekeyan RB，Vakamudi M，et al.The effects of dexmedetomidine on attenuation of stress response to endotracheal intubation in patients undergoing elective off-pump coronary artery bypass grafting［J］.Ann Card Anaesth，2012，15（1）：39-43.

［11］Kawamoto S，Hirakata H，Sugita N，et al.Bidirectional effects of dexmedetomidine on human platelet functions in vitro［J］.Eur J Pharmacol，2015，766（2015）：122-128.

［12］沈華，陳軼菁.右美托咪定對高血糖冠心病患者圍術期血糖變異性及血栓素A2和前列環素平衡的影響［J］.臨床麻醉學雜志，2012，28（4）：375-377.

［13］Koerbin G，Tate J，Potter JM，et al．Characterisation of a highly sensitive troponin I assay and its application to a cardio-healthy population［J］．Clin Chem Lab Med，2012，50（5）：871-878．

［14］Mimuro S，Katoh T，Suzuki A，et al.Deterioration of myocardial injury due to dexmedetomidine administration after myocardial ischaemia［J］.Resuscitation，2010，81（12）：1714-1717.

［15］Eser O，Fidan H，Sahin O，et al.The influence of dexmedetomidine on ischemic rat hippocampus［J］．Brain Res，2008，1218（28）：250-256.

（收稿：2016-11-05修回：2017-03-03）

Effect of Dexmedetomidine on Platelet function and Its Myocardial Protective Effect in Coronary Heart Disease Model Rats

PAN Chen,ZHANG Lingbin,ZHANG Ning,MA Miaoqun,XU Qiaomin,FAN Lihua, ZHANG Ye,DING Youfa.Lishui People's Hospital,Lishui(323000),China

Objective To investigate the effect of dexmedetomidine on platelet function in rats with coronary heart disease and evaluate its possible role in myocardial protection.Methods Thirty SD rats were randomly assigned to control group（C,n=10）,model group（M,n=10）,and dexmedetomidine group（Dex,n=10）.High-fat diet feeding and intraperitoneal injection of pituitrin was performed on rats in model group and dexmedetomidine group to built coronary heart disease model.Rats in dexmedetomidine group were given intravenous injection of dexmedetomidine of 10μg/kg for 5 days,once a day.Control group and model group were given equivalent volume of normal saline.Serum TXB2 and 6-k-PGFl alpha were detected to evaluate the effect of dexmedetomidine on platelet function,serum CK-MB and troponin I were measured to assess the effect of dexmedetomidine on myocardial injury.Results Compare to model group,the level of serum TXB2（28.67±5.38pg/mL vs 38.25±7.79pg/mL）, CK-MB（10.31±1.81IU/L vs 15.40±2.94IU/L）,Troponin I（10.07±0.97ng/mL vs 13.66±1.36ng/mL）significantly decreased（P＜0.01,P＜0.05）,6-k-PGFl alpha increased（27.64±4.61pg/mL vs 21.19±7.72pg/mL,P＜0.05）in dexmedetomidine group.Conclusion Dexmedetomidine can improve the unbalance of TXA2 and PGI2 and suppress platelet aggregation to attenuate myocardial injury in rats.

rats;coronary heart disease;dexmedetomidine;platelet function;myocardial protection

浙江省麗水市高層次人才資助項目（No.2014RC35）

浙江省麗水市人民醫院藥學部（潘晨）、麻醉科（章玲賓、張寧、麻妙群、徐巧敏、樊理華、張曄）、檢驗科（丁友法）（麗水323000）

章玲賓，E-mail：13372380895@126.com