實(shí)時熒光定量PCR法檢測乙型肝炎病毒YMDD變異的臨床意義

陳繼梅，胡婭嫻，戴陽

·論著·

實(shí)時熒光定量PCR法檢測乙型肝炎病毒YMDD變異的臨床意義

陳繼梅1，胡婭嫻1，戴陽2

目的：探討拉米夫定治療慢性乙型肝炎期間發(fā)生乙型肝炎病毒HBV YMDD變異情況及其與病毒載量、肝功能的關(guān)系。方法:對慢乙肝患者分別檢測血清HBV YMDD變異、HBV DNA 載量及肝功能，并對檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果:3年間共發(fā)生HBV YMDD變異共59例，其中HBV YIDD變異29例(49.15%)，HBV YVDD變異41(69.49%)例，2者共同變異11(18.64%)例，YIDD與YVDD變異比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.057，P<0.05)。發(fā)生變異的慢乙肝患者HBV DNA陽性率為59/59(100%)，同期對照未發(fā)生變異HBV DNA陽性率為40/150(26.67%)，2組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=91.34，P<0.05)。發(fā)生不同變異各組與未發(fā)生變異組病毒載量比較，差異有顯著性(組間F=11.175，P<0.05)，而變異組之間HBV DNA之間不存在顯著性差異，肝功能僅TBIL結(jié)果單獨(dú)YIDD變異組與未變異組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論：本地區(qū)HBV YMDD變異以HBV YVDD為主；變異各組HBV DNA陽性率及HBV載量都顯著高于未變異組，表明YMDD變異株HBV DNA復(fù)制活躍。肝功能除了TBIL，變異與否與肝功能水平高低無關(guān)，提示不同的HBV YMDD突變模式可能與患者病情無關(guān)。

乙型肝炎，慢性； 拉米夫定； HBV YMDD 變異； 實(shí)時熒光定量PCR

乙型肝炎病毒(hepatitis b virus,HBV)的基因復(fù)制是利用自身的RNA依賴DNA多聚酶完成的逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制，拉米夫定正是利用此特點(diǎn)做為治療手段，以乙肝病毒DNA多聚酶作為治療靶點(diǎn),來達(dá)到抑制病毒復(fù)制的目的，是HBV復(fù)制強(qiáng)有力的抑制劑。拉米夫定治療慢乙肝有明確的療效,但有文獻(xiàn)報道長期服用會導(dǎo)致HBV DNA多聚酶活性區(qū)核苷酸序列的變異，即酪氨酸、蛋氨酸、天門冬氨酸、天門冬氨酸區(qū)域變異(YMDD變異)[1]。YMDD變異的發(fā)生主要有2種形式,一種為YIDD變異,另一種為YVDD變異。發(fā)生變異后,拉米夫定失去結(jié)合靶點(diǎn),嚴(yán)重影響治療效果,檢測YMDD基序變異對及時調(diào)整治療方案、提高療效有重要的指導(dǎo)意義。本資料采用實(shí)時定量PCR技術(shù)檢測慢乙肝患者拉米夫定用藥期間HBV YMDD變異發(fā)生情況,使用兩條特異性探針同時對YIDD和YVDD變異進(jìn)行檢測。筆者研究了我院近3年期發(fā)生YMDD變異慢乙肝患者的59例并對其HBV DNA載量、及肝功能進(jìn)行對比研究，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 資料 全部病例均為我院2013年4月-2016年4月門診及住院使用拉米夫定治療的慢性乙型肝炎患者, 診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《2010年慢性乙型肝炎防治指南》(2010年版)[2]。……