土大黃根提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性銀屑病小鼠支配器官形態(tài)學(xué)的影響

艾西木江·熱甫卡提，麥合素提·卡迪爾，阿不都吉力力·阿布都艾尼，再妮皮古麗·巴拉提，熱比姑麗·伊斯拉木

（1.新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所，新疆烏魯木齊830049；2.新疆維吾爾醫(yī)方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)室，新疆烏魯木齊830049；3.新疆喀什疏勒縣巴仁鄉(xiāng)第二中學(xué)，新疆喀什844000）

·實(shí)驗(yàn)研究·

土大黃根提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性銀屑病小鼠支配器官形態(tài)學(xué)的影響

艾西木江·熱甫卡提1，2，麥合素提·卡迪爾1，2，阿不都吉力力·阿布都艾尼1，2，再妮皮古麗·巴拉提3，熱比姑麗·伊斯拉木1，2

（1.新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所，新疆烏魯木齊830049；2.新疆維吾爾醫(yī)方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)室，新疆烏魯木齊830049；3.新疆喀什疏勒縣巴仁鄉(xiāng)第二中學(xué)，新疆喀什844000）

目的探討土大黃根提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性銀屑病樣模型支配器官形態(tài)學(xué)變化。方法將咪喹莫特（IMQ）乳膏涂抹BALB／c小背部皮膚形成銀屑病樣動(dòng)物模型，觀察土大黃根提取物（1，2，4 g／kg）對(duì)小鼠支配器官如腦、心、肝臟器指數(shù)及其形態(tài)學(xué)的影響。結(jié)果與模型組比較，1，2，4 g／kg組均對(duì)小鼠腦、心、肝，臟器指數(shù)的影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），同時(shí)對(duì)腦、心形態(tài)學(xué)未見明顯異常，但可引起肝細(xì)胞再生、嗜酸性變性。結(jié)論土大黃根提取物對(duì)咪喹莫特誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性銀屑病小鼠支配器官肝臟組織病理學(xué)改變有一定保護(hù)和修復(fù)作用。

土大黃根；實(shí)驗(yàn)性銀屑病；支配器官；形態(tài)學(xué)

土大黃Rumex L.是蓼科（Polyonaceae）酸模屬(Rumex）植物，多年生草本。維吾爾藥物名分別為阿提庫(kù)拉克（At kulak）、歐麻孜（Hummaz）、土日謝（Turux）、塔給庫(kù)斯（Tag kusi），其藥用部位為全草、葉子、根莖及根，用于腎、肝及胃腸疾患，皮疹、皮膚瘙癢等[1－2]。本研究中探討了土大黃根提取物對(duì)咪喹莫特（IMQ）誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性銀屑病模型小鼠支配器官（如腦、心、肝）的臟器指數(shù)及其形態(tài)學(xué)的影響，可為土大黃根提取物治療銀屑病的機(jī)制探討提供參考依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 試藥、儀器與動(dòng)物

1.1.1 藥材、藥品

土大黃根（新疆華安中藥飲片有限責(zé)任公司，批號(hào)為12110），由新疆大學(xué)資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院努爾巴依·阿不都沙力克教授鑒定為土大黃根。咪喹莫特乳膏（IMQ，四川明欣藥業(yè)有限責(zé)任公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20030128，批號(hào)為141201）；Silkee脫毛霜（美國(guó)Stella Jone′s Inc.）；醋酸地塞米松片（DXM，浙江仙琚制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H33020822，批號(hào)為140670，規(guī)格為每片0.75mg）；消銀顆粒(XYKL，陜西康惠制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20000019，批號(hào)為130809）；異常黏液質(zhì)成熟劑（MB，批準(zhǔn)文號(hào)M20052633，新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)醫(yī)院制劑室)。

1.1.2 試劑

甲醛溶液（成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)為20130322）；三氯醋酸（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)為20131104）；蘇木色精（CAS＃517－28－2，進(jìn)口分裝，批號(hào)為110405），曙紅水溶（伊紅，天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號(hào)為20120612）；二甲苯（天津市永晟精細(xì)化工有限公司，批號(hào)為20140325）；無(wú)水乙醇（天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司，批號(hào)為20141020）；鹽酸（天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司，批號(hào)為20130218）；中性樹膠（中國(guó)上海懿洋儀器有限公司，批號(hào)為20120326）；高效切片石蠟（上海華永石有限公司，批號(hào)為20130710）。

1.1.3 儀器

CPA124S型電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器＜北京＞有限公司）；JM3100型電子天平（余姚紀(jì)銘稱重檢驗(yàn)設(shè)備有限公司）；LEICA TP1020生物組織脫水機(jī)（德國(guó)萊卡公司）；KD－BMⅢ型生物組織包埋機(jī)（浙江金華科迪儀器設(shè)備有限公司）；KZPG－1A型攤片烤片機(jī)（天津天利航空機(jī)電有限公司）；LEICA RM2235型切片機(jī)，LEICA DM4000型生物顯微鏡，LEICA LASV4.5型顯微成像系統(tǒng)均由德國(guó)萊卡公司提供。

1.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

BALB／c小鼠，120只，雌性，SPF級(jí)，日齡42～70 d，由新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK（新）2011－0004，使用許可證號(hào)為SYXK（新）2011－0005。

動(dòng)物飼養(yǎng)條件：于新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所藥物安全性評(píng)價(jià)中心SPF級(jí)動(dòng)物房，自由飲水、攝食，室溫20～26℃，相對(duì)濕度40%～70%，光照12 h，黑暗12 h。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所藥物安全性評(píng)價(jià)中心審核，符合動(dòng)物倫理委員會(huì)的管理準(zhǔn)則。實(shí)驗(yàn)開始前檢疫，經(jīng)一般行為觀察，選用符合要求的112只小鼠進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 方法

1.2.1 土大黃提取物的制備

土大黃根用乙醇室溫密閉浸泡1 h后回流提取3次，過(guò)濾，合并濾液減壓濃縮，真空干燥，得干膏粉，實(shí)驗(yàn)時(shí)配成所需濃度。

1.2.2 建模[3－4]

取120只BALB／c小鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)，選用符合要求的112只動(dòng)物，分為2組，對(duì)照組（12只）、IMQ誘導(dǎo)模型組（100只）。背部用Silkee脫毛霜脫毛，背部涂抹面積約為2 cm×1.5 cm。對(duì)照組小鼠背部無(wú)毛區(qū)每日涂抹凡士林，模型組小鼠背部無(wú)毛區(qū)涂以5%IMQ，60 mg／d（有效藥物為3mg／d），連續(xù)6 d。

1.2.3 對(duì)銀屑病樣模型小鼠組織病理學(xué)的影響

造模成功后，選用符合要求的84只小鼠隨機(jī)分為模型組、地塞米松組（DXM，1.02 mg／kg）、消銀顆粒組（XYKL，1.577 g／kg）、異常黏液質(zhì)成熟劑組（MB，2 g／kg）、土大黃根醇提物低劑量組（RE－L，1 g／kg）、土大黃根醇提物中劑量組（RE－M，2 g／kg）、土大黃根醇提物高劑量組（RE－H，4 g／kg），每組12只。各組灌胃給予相應(yīng)藥物，對(duì)照組灌胃等體積的0.5%羧甲基纖維素鈉（0.5%CMC－Na）。各組灌胃容積均為每10 g體重0.2 m L，1次／天，連續(xù)14 d。小鼠每周測(cè)1次體質(zhì)量，根據(jù)體質(zhì)量變化隨時(shí)調(diào)整給藥劑量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，取BALB／c小鼠腦、心臟、肝臟，稱重，計(jì)算心臟、腦、肝臟臟器指數(shù)（臟體比例），公式為臟器指數(shù)＝臟器質(zhì)量／體重；同時(shí)，對(duì)腦、心臟、肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

1.2.4 組織病理學(xué)檢查

固定：在研究1中BALB／c小鼠，取心、肝、腦組織固定于15%中性福爾馬林。

取材：腦，取腦底部，厚度0.15～0.25 cm；心臟，取心尖1塊，厚度0.15～0.25 cm；肝臟，取肝大葉2塊，厚度0.15～0.25 cm。

脫水、浸蠟：分別用80%乙醇（1 h），95%乙醇（1 h）、95%乙醇（1 h），無(wú)水乙醇（1 h）、無(wú)水乙醇（1 h），二甲苯1（1 h）、二甲苯2（1 h），浸蠟1（1 h）、浸蠟2（1 h）、浸蠟3（1 h）。

包埋：用液體石蠟。

切片：3μm厚度切片。

染色：在65℃恒溫烤箱考片20 min，分別用二甲苯1（5min）、二甲苯2（5min），無(wú)水乙醇（5min）、無(wú)水乙醇（5 min），95%乙醇（5 min），80%乙醇（2 min），1%鹽酸（20 s），過(guò)水（10min），伊紅（5min），80%乙醇（20 s），95%乙醇（15 s），無(wú)水乙醇（10 s），二甲苯1（2 min）、二甲苯2（2～10min）。

封片：用中性樹膠封片。

在光學(xué)顯微鏡下，觀察各組小鼠腦、心、肝組織病理學(xué)檢查。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，One－Way ANOWA方法進(jìn)行多組樣品均數(shù)的比較，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 小鼠臟器指數(shù)變化

與對(duì)照組比較，模型組腦、心、肝，臟器指數(shù)變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。與模型組比較，各給藥組對(duì)小鼠腦指數(shù)、心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)的影響均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。結(jié)果見表1。

表1 小鼠臟器指數(shù)變化（s，mg／g，n＝12）

表1 小鼠臟器指數(shù)變化（s，mg／g，n＝12）

組別CON Model DXM XYKL MB RE－L RE－M RE－H劑量（g／kg）－0.001 1.577 2124腦指數(shù)20.490 0±2.021 0 21.680 0±1.233 9 21.072 2±1.699 1 21.287 2±2.227 6 21.118 5±1.139 0 21.840 6±1.129 9 20.953 3±1.843 5 20.590 9±1.233 1心指數(shù)6.330 0±1.042 0 6.334 0±0.870 7 6.863 6±0.944 6 6.564 5±0.609 0 5.685 3±0.646 7 6.270 5±1.157 7 6.164 2±0.774 3 6.100 2±0.874 5肝指數(shù)52.710 8±8.539 3 53.402 0±4.651 3 53.586 7±4.254 1 51.734 3±5.081 9 50.127 4±5.637 9 50.386 4±4.040 7 51.892 4±4.624 8 50.868 0±4.163 7

2.2 腦組織病理學(xué)變化

對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、土大黃根提取物組小鼠腦蛛網(wǎng)膜下腔及腦軟膜血管結(jié)構(gòu)正常、腦皮質(zhì)區(qū)及髓質(zhì)區(qū)結(jié)構(gòu)清晰，層次分明，均未見明顯異常。結(jié)果見圖1。

2.3 心臟組織病理學(xué)變化

對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、土大黃根提取物組小鼠心內(nèi)膜、心肌、心外膜3層結(jié)構(gòu)清楚、完整，心肌纖維結(jié)構(gòu)清楚、橫紋清晰，均未見明顯異常。結(jié)果見圖2。

圖1 各組小鼠腦組織HE染色結(jié)果（×200）

圖2 各組小鼠心臟HE染色結(jié)果（×200）

圖3 各組小鼠肝臟HE染色結(jié)果

2.4 肝臟組織病理學(xué)變化

對(duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)完整。肝細(xì)胞排列呈索狀，以小葉中央靜脈為中心呈放射狀排列。肝細(xì)胞胞漿紅染，細(xì)胞核多位于中央。與對(duì)照組比較，模型組小鼠肝細(xì)胞中度水腫，嗜酸性變性。DXM組小鼠肝細(xì)胞重度水腫，XYKL組和MB組肝細(xì)胞輕度水腫，土大黃提取物組肝細(xì)胞再生、嗜酸性變性。結(jié)果見圖3。

3 討論

銀屑病是一種常見的慢性復(fù)發(fā)性炎癥性疾病。據(jù)全球流行病學(xué)調(diào)研，自然人群的銀屑病患病率可達(dá)到8.5%（如挪威），距離赤道越近國(guó)家或地區(qū)（如埃及、坦桑尼亞、斯里蘭卡、臺(tái)灣）人群銀屑病患病率比距離赤道越遠(yuǎn)國(guó)家或地區(qū)（如歐洲、澳大利亞）人群患病率低，無(wú)明顯性別差異[5]。由于本病發(fā)病率較高，易復(fù)發(fā)，病程較長(zhǎng)，尤以青壯年發(fā)病為主，故對(duì)患者的身體健康和精神影響甚大，因此銀屑病是當(dāng)前皮膚科領(lǐng)域內(nèi)重點(diǎn)研究的疾病之一。國(guó)內(nèi)外對(duì)本病的病因和發(fā)病機(jī)理都進(jìn)行了不少研究，雖然取得了一些成績(jī)，但至今尚未得出肯定的結(jié)論。對(duì)本病發(fā)生和發(fā)展的主要原因或誘因有以下學(xué)說(shuō)[6]：1）遺傳因素，臨床研究已證明，本病常有家族性發(fā)病，并有遺傳傾向，一般約為30%；2）免疫因素，近年來(lái)多已被認(rèn)為銀屑病是免疫或炎癥介導(dǎo)的疾病；3）感染因素，細(xì)菌感染、真菌感染、病毒感染；4）內(nèi)分泌因素；5）精神因素，皮膚是人體內(nèi)部心理活動(dòng)的表達(dá)器官之一，從某種意義講，銀屑病屬于皮膚心身疾病的一種；6）生活習(xí)慣、藥物因素、環(huán)境因素，飲酒、吸煙、精神緊張等，β1受體阻斷藥、非甾體類抗炎藥、鈣通道阻滯劑等。

維吾爾醫(yī)學(xué)認(rèn)為[7－9]，體內(nèi)外環(huán)境因素的影響使機(jī)體的自然力下降而產(chǎn)生的異常體液沉積在皮膚組織，沉淀物刺激皮膚組織，破壞皮膚的氣質(zhì)，同時(shí)影響皮膚的排泄力、改造力、形成力等，導(dǎo)致銀屑病，即異常體液、機(jī)體的自然力和免疫力下降是銀屑病的發(fā)生和發(fā)展的主要原因。維吾爾醫(yī)將銀屑病分為異常黏液質(zhì)型、異常膽液質(zhì)型、異常黑膽液質(zhì)型和異常血液質(zhì)型等4種辨證分型。自治區(qū)維吾爾醫(yī)院等對(duì)全疆5家醫(yī)院764例銀屑病患者異常體液分析，其中異常黏液質(zhì)477例（62.43%）、異常膽液質(zhì)106例（13.87%）、異常黑膽質(zhì)103例（13.49%）、異常血液質(zhì)78例（10.21%），以異常黏液質(zhì)為主要。長(zhǎng)期臨床實(shí)踐表明[10－14]，維吾爾醫(yī)治療銀屑病等皮膚病有獨(dú)到之處和特色，積累了豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)和成果，形成了較成熟的綜合治療方法及技術(shù)。

維吾爾醫(yī)[15－16]解剖學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)解剖學(xué)基本相同，但是對(duì)其生理學(xué)的描述有所不同，主要區(qū)別是，維吾爾醫(yī)學(xué)認(rèn)為各器官均有與自己功能相應(yīng)的特有氣質(zhì)等。維吾爾醫(yī)學(xué)根據(jù)器官各自的功能和作用，將他分為支配器官（艾雜衣熱依色）和被支配器官（艾雜衣買日歐色）兩大類。支配器官（艾雜衣熱依色）系指腦、心、肝3個(gè)主要器官，不但是保存著人體的三大力，即精神力、生命力和自然力，也是這三大力的始發(fā)原點(diǎn)。在保持人的生存、繁殖和管理其智力、體力活動(dòng)中，不但起著重要的作用，而且通過(guò)被支配器官的間接作用，全方位地調(diào)整、充實(shí)和控制機(jī)體的一切生命活動(dòng)，從而維持全身的整體性。本研究中探討土大黃根提取物對(duì)咪喹莫特誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性銀屑病模型小鼠支配器官如腦、心、肝，臟器指數(shù)及其形態(tài)學(xué)的影響，為維吾爾醫(yī)學(xué)角度闡明土大黃根提取物治療銀屑病機(jī)制提供一定的科學(xué)依據(jù)。

本研究結(jié)果表明，與對(duì)照組比較，模型組小鼠肝細(xì)胞中度水腫，嗜酸性變性。提示實(shí)驗(yàn)性銀屑病模型小鼠支配器官肝臟受損。與模型組比較，1，2，4 g／kg組均對(duì)小鼠腦、心、肝臟器指數(shù)的影響均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），同時(shí)對(duì)腦、心形態(tài)學(xué)未見明顯異常，但引起肝細(xì)胞再生、嗜酸性變性土大黃根提取物對(duì)咪喹莫特誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性銀屑病小鼠支配器官肝臟組織病理學(xué)改變有一定保護(hù)和修復(fù)作用，這與維吾爾醫(yī)治療銀屑病經(jīng)驗(yàn)，銀屑病除系統(tǒng)治療外，還有營(yíng)養(yǎng)支配器官功能相似[17]，但仍有待于深入研究。

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Effect of Rumex L.Root Extract on M orphology of Dom inant O rgans in M ice w ith Experim ental Psoriasis

Haxim jan Rapkat1,2,Mahsutjan Kadir1,2,Abdujilil Abdugheny1,2,Zaynapgul Barat3,Rabigul Islam1,2

(1.Inistitute of Xinjiang Traditional Uyghur Medicine,Wulumuqi,Xinjiang,China 830049;2.Xinjiang Laboratory of Traditional Uyghur Medicine Prescription,Wulumuqi,Xinjiang,China 830049;3.The Second Middle School of Barin Township of Kashgar Shule Country,Kashi,Xinjiang,China 844000)

Ob jective To investigate the effects of Rumex L.root extract on the morphology of dominant organs in mice with experimental psoriasis.M ethods The experimental psoriasis model was established in BALB／c mice by applying Imiquimod(IMQ)cream,then to observe the effects of Rumex L.root extract(1,2,4 g／kg)on mice′s dominating organs such as brain,heart,liver,organ index and morphology.Results Compared with the model group,the effects of 1,2,4 g／kg groups on the brain,heart,liver and organ index of mice had no statistically different(P＞0.05),at the same time,there was no obvious abnormality in brain and heart morphology,but it could cause liver cell regeneration,acidophilic degeneration.Conclusion Rumex L.root extract can protect and repair the morphological damage of dominating organ of liver on experimental psoriasis mice by induced IMQ.

Rumex L.root;experimental psoriasis;dominating organ;morphology

R285.5

A

1006－4931(2017)11－0004－05

2017－03－10；

2017－03－21)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.11.002

新疆維吾爾自治區(qū)衛(wèi)生計(jì)生委青年科技人才專項(xiàng)科研項(xiàng)目[2015Y40]。

艾西木江·熱甫卡提，男，哈薩克族，大學(xué)本科，實(shí)驗(yàn)師，主要從事維藥藥理毒理學(xué)研究，（電話）0991－2565663（電子信箱）736383511＠qq.com。

熱比姑麗·伊斯拉木，女，維吾爾族，博士研究生，副研究員，主要從事維藥藥理毒理學(xué)研究，（電話）0991－2565663（電子信箱）rabiya272＠126.com。