映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用

全碧波

（南陽醫學高等專科學校，河南南陽473000）

映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用

全碧波

（南陽醫學高等專科學校，河南南陽473000）

目的探討映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用。方法選擇SD大鼠75只，分為假手術組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組，假手術組和模型組分別給予同體積生理鹽水灌胃，高、中、低劑量組分別給予映山紅總黃酮25.00mg/kg、12.50mg/kg、6.25mg/kg灌胃。建立心肌缺血再灌注損傷模型，缺血30分鐘，再灌注120分鐘。觀察各組心肌梗死范圍，測定血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、丙二醛、超氧化物歧化酶水平。結果模型組心肌梗死范圍大于假手術組，高、中、低劑量組心肌梗死范圍均小于模型組，差異有顯著性（P＜0.05）。高、中、低劑量組乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量分別與模型組差異顯著（P＜0.05）。結論映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷有保護作用，可能與其抗氧化作用有關。

映山紅總黃酮；大鼠；心肌缺血再灌注損傷；保護作用

冠脈血管狹窄或阻塞導致心肌缺血缺氧，臨床給予相關藥物或介入治療，使阻塞或狹窄的血管再通，血流恢復，當血流恢復后，心肌可發生再灌注損傷[1，2]。心肌缺血再灌注損傷中，氧化損傷是主要原因。映山紅總黃酮是映山紅的主要有效成分，具有抗氧化作用。本文通過觀察映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響，探討其對大鼠缺血再灌注損傷心肌的保護機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選擇健康雄性SD大鼠75只，平均體重（200±15）g，由華中科技大學動物實驗中心提供。

1.2 藥品和試劑

映山紅總黃酮由安徽省合肥市合源醫藥科技有限公司提供，現用現配，以生理鹽水注射液配制。血清乳酸脫氫酶試劑盒、磷酸肌酸激酶試劑盒、丙二醛試劑盒、超氧化物歧化酶試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。實驗所用其他試劑或化學藥品均來自國內廠家。

1.3 動物模型和分組

根據文獻報道的相關步驟，建立大鼠心肌缺血再灌注模型。采用20%烏拉坦成功麻醉大鼠后，行氣管插管及人工呼吸。在大鼠左側第四肋間實施開胸手術，剪開心包，大面積暴露心肌，將無創縫合針、6/0絲線置于左冠脈前降支的起始部位下方2mm處，備用。結扎冠脈，觀察心肌顏色改變及心電圖導聯ST段抬高情況，如ST段抬高0.1 mV或T波高聳，同時心肌由鮮紅色變為暗紅色，提示大鼠心肌缺血再灌注損傷模型造模成功。結扎冠脈引起缺血，缺血時間為30分鐘，之后再灌注120分鐘。75只大鼠隨機分為假手術組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組。假手術組和模型組給予同體積生理鹽水灌胃，高、中、低劑量組給予映山紅總黃酮灌胃（分別取映山紅總黃酮25.00mg/kg、12.50mg/kg、6.25mg/kg，以生理鹽水注射液稀釋到3m l），連續給藥7天，末次給藥24小時后造模。實驗結束后，取頸總動脈血，離心后去血清置－20℃保存待測；馬上取出大鼠心臟。

1.4 觀察指標

1.4.1 心肌梗死范圍參考鄭曙云等報道[3]的方法測定心肌梗死區濕重、心肌濕重計算心肌梗死范圍。心肌梗死區范圍=梗死區濕重/心肌濕重×100%。

1.4.2 血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、丙二醛、超氧化物歧化酶水平血清乳酸脫氫酶、丙二醛、超氧化物歧化酶水平測定步驟和方法依據試劑盒說明書操作。

1.5 統計學處理

采用SPSS 18.0進行統計學分析，進行單因素方差分析或t檢驗，P＜0.05表示差異有顯著性。

2 結果

2.1 各組大鼠缺血再灌注損傷后心肌梗死范圍測定結果

模型組梗死區濕重大于假手術組，高、中、低劑量組梗死區濕重小于模型組，差異有顯著性（P＜0.05）；模型組心肌梗死范圍大于假手術組，高、中、低劑量組心肌梗死范圍小于模型組，差異有顯著性（P＜0.05），見表1。

表1 各組大鼠缺血再灌注損傷后心肌梗死范圍比較（±s）

表1 各組大鼠缺血再灌注損傷后心肌梗死范圍比較（±s）

注：與假手術組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

組別梗死區濕重（g）0.005±0.003 0.331±0.024a0.254±0.041b0.167±0.038b0.098±0.061bn假手術組模型組低劑量組中劑量組高劑量組15 15 15 15 15心肌濕重（g）0.651±0.024 0.659±0.037 0.664±0.025 0.671±0.042 0.660±0.032心肌梗死范圍（%）0.07±0.01 47.12±2.17a34.33±3.04b28.42±2.08b19.34±3.14b

2.2 各組大鼠血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量測定結果

模型組大鼠血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶活性高于假手術組，差異有顯著性（P＜0.05）；高、中、低劑量組血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶活性低于模型組，差異有顯著性（P＜0.05）；模型組大鼠丙二醛含量高于假手術組，差異有顯著性（P＜0.05）；高、中、低劑量組丙二醛含量分別低于模型組，差異有顯著性（P＜0.05）；模型組超氧化物歧化酶活性低于假手術組，差異有顯著性（P＜0.05）；高、中、低劑量組超氧化物歧化酶活性高于模型組，差異有顯著性（P＜0.05），見表2。

表2 各組乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量測定結果（±s）

表2 各組乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量測定結果（±s）

注：與假手術組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

組別磷酸肌酸激酶（U/L）48.6±12.3 198.7±23.8a171.4±15.9b124.9±10.8b79.3±14.2b假手術組模型組低劑量組中劑量組高劑量組丙二醛（nmol/ml）0.65±0.12 3.54±0.45a2.83±0.37b2.08±0.41b1.32±0.36b乳酸脫氫酶（U/L）1 242.1±263.1 3158.3±158.7a2563.9±147.5b2019.6±205.8b1 601.5±163.4b超氧化物歧化酶（NU/mg）59.6±10.7 29.3±11.4a35.8±9.7b41.6±6.8b50.7±8.9b

3 討論

心肌梗死在祖國醫學中被稱為心脈瘀阻、心氣衰微，與患者氣虛、氣滯、血瘀、痰飲有關。心肌梗死是冠脈血流被阻斷而引起供血區域心肌缺血缺氧性壞死，屬于急癥[4，5]。心肌梗死經臨床治療后冠脈再通，而冠脈再通可引起心肌缺血再灌注損傷。在對心肌缺血再灌注損傷的研究中發現，氧化損傷起著重要作用，心肌缺血后可產生氧自由基，使心肌細胞受損，進一步加重損傷。所以，心肌缺血再灌注損傷是心肌梗死后的重要病理生理過程，減輕心肌缺血再灌注損傷對改善患者預后起著重要作用。

映山紅即杜鵑花，具有和血、調經、祛風濕功效。映山紅總黃酮是其有效成分[6]。研究表明，映山紅總黃酮具有抗氧化以及抑制細胞鈣超載、抑制一氧化氮的作用[7]。本研究結果顯示，模型組心肌梗死范圍顯著大于假手術組，而高、中、低劑量組心肌梗死范圍顯著小于模型組，說明映山紅總黃酮有助于減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷程度；模型組血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶水平顯著高于假手術組，而高、中、低劑量組血清乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶水平分別低于模型組，說明映山紅總黃酮對缺血再灌注損傷大鼠心肌產生保護作用；模型組血清超氧化物歧化酶水平低于假手術組，高、中、低劑量組血清超氧化物歧化酶活性高于模型組，而模型組血清丙二醛含量高于假手術組，高、中、低劑量組血清丙二醛含量分別低于模型組，說明映山紅總黃酮能夠提高缺血再灌注大鼠心肌抗氧化損傷能力，減輕氧化損傷程度。可以認為，映山紅總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷有保護作用，可能與其抗氧化作用有關。

[1]邵瑩，吳啟南，周婧，等.淡竹葉黃酮對大鼠心肌缺血/再灌注損傷的保護作用[J].中國藥理學通報，2013，29（2）：241-247.

[2]任小宇，孫桂波，張強，等.三七莖葉皂苷對大鼠離體心臟缺血/再灌注損傷的保護作用[J].中國藥理學通報，2012，28（1）：92-96.

[3]鄭曙云，徐建國，趙振中.參附注射液對大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響[J].中國中西醫結合雜志，2004，24（6）：541-543.

[4]袁麗萍，陳飛虎，范麗，等.映山紅花總黃酮對鹽酸異丙腎上腺素誘導大鼠心肌缺血的保護作用[J].中國現代應用藥學，2007，6（5）：356-359.

[5]于洪艷，朱丹，丁寧.丹紅注射液預處理對心肌缺血/再灌注損傷大鼠心肌細胞凋亡的影響[J].中醫臨床研究，2015，6（13）：3-5.

[6]譚秦莉，劉冬，李玉寶，等.總黃酮化合物藥理作用研究進展[J].安徽中醫學院學報，2009，4（3）：62-64.

[7]韓黎黎，范一菲，陳志武.映山紅花總黃酮對全腦缺血再灌注大鼠腦基底動脈超極化反應的誘導作用[J].中草藥，2011，10（6）：1164-1168.

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1671-1246（2017）13-0086-02