不同品種長壽花試管苗再生體系的建立

任改婷++張桂芳++張黎

摘要：以5個品種長壽花的葉片和莖段為試驗材料，開展長壽花試管苗繁育研究，探討光照強度及不同植物激素組合對愈傷誘導率、叢芽誘導率、增殖系數等方面的影響。結果發現，不同品種之間存在差異，月桂、節日、霍恩愈傷誘導最佳培養基為MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA；西倫的為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA；紫繽的為MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。月桂、西倫叢芽誘導最佳培養基為MS+2.0mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，節日的為MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，紫繽、霍恩的為MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。月桂增殖最佳培養基為MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L ZT+0.3 mg/L NAA，節日為MS+0.4 mg/L ZT+0.3 mg/L NAA，西倫、霍恩的為MS+0.4 mg/L 6-BA+0.4 mg/L ZT+0.2 mg/L NAA，紫繽的為MS+0.4 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA。花泥作為載體進行瓶外生根，生根率達90%以上，最佳光照度為2 500 lx。

關鍵詞：長壽花；試管苗；品種差異；再生體系

中圖分類號： S682.390.4+3文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2017）09-0027-03

長壽花（Kalanchoe blossfeldiana）是景天科伽藍菜屬肉質草本花卉，原產馬達加斯加，別稱矮生伽藍菜、壽星花、假川蓮，因其花葉可觀，花期長、耐干旱、栽培容易、裝飾效果好，是國際花卉市場中發展最快的盆花之一[1-2]。隨著品種不斷推陳出新，市場品種越來越多。目前，國內有關長壽花組織培養差異性研究較少和缺乏系統的研究，且不同研究者的結果差異較大[3]。本試驗以5個品種長壽花為材料，比較其試管苗愈傷誘導、叢芽誘導、叢芽增殖、生根差異，研究品種差異性及影響長壽花試管育苗玻璃化、徒長的主要因子，為提高試管育苗成活率提供科學依據，并為研究不同品種長壽花試管苗再生體系的建立奠定基礎。

1材料與方法

1.1材料

試驗材料取自寧夏園藝產業園花藝館，為長壽花月桂（Loren）、節日（Fiesta）、西倫（Theron）、紫繽（Leonardo）、霍恩（Hawn）品種的葉片和莖段。

1.2試驗方法

1.2.1不同品種長壽花啟動培養基篩選

啟動培養基成分：MS+不同濃度6-BA和NAA（表1），附加30 g/L蔗糖、6 g/L 瓊脂，pH值為5.8。試驗材料用洗潔精清洗3 min，流水沖洗 15 min 后，置于超凈工作臺上，將葉片用0.1% Hgcl2滅菌 8 min，莖段滅菌10 min，再用無菌水沖洗3遍。外植體經過滅菌處理后，將葉片切成1.5 cm×1.5 cm大小，莖段切成1.5～2.0 cm小段，接種于初代培養基中，培養溫度為（24±2） ℃。每瓶接種3個外植體，每個處理10瓶，試驗重復3次，30 d后統計愈傷誘導率和叢芽誘導率。

1.2.2不同品種長壽花繼代培養基篩選

試驗采取L9（34）正交設計，選擇6-BA、ZT、NAA等3種激素，共9個處理（表2）。切取初代培養的無菌苗接種到不同激素配比的增殖培養基，每處理接種10瓶，重復3次，培養30 d后統計增殖后的總芽數，計算增殖系數、玻璃化率。

1.2.3光照度對長壽花生長的影響

將5個品種初代培養的無菌苗轉接于對應的繼代增殖最佳培養基上，設光照度分別為1 500、2 000、2 500 lx，培養60 d后統計節數、節間長度。

1.2.4長壽花瓶外生根

選取繼代培養中生長健壯、高（45±0.3） cm、具2對葉的無菌苗，作為瓶外生根的植株，煉苗后插入填有花泥（用牙簽戳洞）和草炭，并添加不同濃度NAA處理的穴盤內，每穴1株，插入深度為1.5～2 cm，30 d后，統計生根率。

1.3數據統計及分析

采用DPS軟件對數據進行處理，采用Duncans新復極差法進行多重比較。

愈傷誘導率=出現愈傷的外植體數/未污染的外植體數×100%；

叢芽誘導率=萌生叢芽的外植體數/未污染的外植體數×100%；

增值系數=增殖后的總芽數/接種的芽數；

玻璃化率=玻璃化的總苗數/接種的總苗數×100%；

生根率=生根株數/培養株數×100%。

2結果與分析

2.1不同品種長壽花初代培養

2.1.1不同品種長壽花葉片愈傷誘導差異性比較

研究發現，不同處理間長壽花葉片愈傷誘導率存在差異，其中A1為月桂、節日、霍恩3個品種最佳愈傷誘導培養基，該處理中的愈傷誘導率顯著高于其他5個處理。西倫的愈傷誘導率在A1和A6間無顯著差異，但兩者與A2、A3、A4、A5差異極顯著；由于A6愈傷生長狀況優于A1，因此A6為西倫愈傷誘導最佳培養基。紫繽的愈傷誘導率在A2和A4間無顯著差異，兩者與A1、A3、A5、A6之間差異極顯著；由于A4愈傷生長狀況優于A2，因此A4為紫繽愈傷誘導最佳培養基（表3、表4）。

2.2.2不同品種長壽花莖段叢芽誘導差異性比較

研究發現，A6為月桂最佳叢芽誘導培養基，在該培養基中月桂莖段叢芽誘導率極顯著高于A1、A2、A3、A4、A5處理。A2為節日最佳叢芽誘導培養基，在該培養基中節日莖段叢芽誘導率與A1、A3、A4、A5、A6之間差異極顯著。A6為西倫最佳叢芽誘導培養基，在該培養基中莖段叢芽誘導率與A1、A2、A3、A4、A5之間差異極顯著。紫繽芽誘導率在A1和A2之間無顯著差異，但兩者與A3、A4、A5、A6差異極顯著；由于在A1培養基中叢芽生長狀況優于A2培養基，因此A1為最佳叢芽誘導培養基。A1為霍恩最佳叢芽誘導培養基，在該培養基中其莖段叢芽誘導率與A1、A2、A3、A4、A5之間差異極顯著（表5、表6）。