應(yīng)用生物光譜技術(shù)研究細(xì)胞損傷和組織生長(zhǎng)的生物分子特征性變化

顧依然?趙昀

摘 要：目的：觀察應(yīng)用生物光譜技術(shù)研究細(xì)胞損傷和組織生長(zhǎng)的生物分子特征性變化情況。方法：共設(shè)計(jì)2大實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)1：苯并芘誘導(dǎo)不同細(xì)胞生物周期的MCF-7乳腺癌細(xì)胞的生物學(xué)改變實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)2：雞胚胎角膜生長(zhǎng)發(fā)育的生物分子特征性變化實(shí)驗(yàn)。觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果：B[α]P誘導(dǎo)與MCF-7細(xì)胞生物學(xué)改變有關(guān)，雞胚胎發(fā)育10--18，生物分子結(jié)構(gòu)變化顯著。結(jié)論：可將生物光譜技術(shù)，作為研究細(xì)胞損傷和組織生長(zhǎng)的生物分子特征性變化的主要技術(shù)，提高研究的科學(xué)性水平。

關(guān)鍵詞：生物光譜技術(shù)；細(xì)胞損傷；組織生長(zhǎng)；生物分子特征性變化

生物組織由蛋白質(zhì)及核算等生物分子構(gòu)成，不同生物分子，在光譜學(xué)振動(dòng)譜帶方面，均存在一定的差異，隨著組織的生長(zhǎng)以及生物分子構(gòu)象的變化，振動(dòng)譜帶同樣會(huì)發(fā)生一定的改變。本文在應(yīng)用生物光譜技術(shù)的基礎(chǔ)上，通過(guò)實(shí)驗(yàn)的方法，對(duì)細(xì)胞損傷和組織生長(zhǎng)的生物分子特征性變化進(jìn)行了研究：

一、材料與方法

1.材料與試劑

（1）實(shí)驗(yàn)1材料與試劑。

材料如下：①低俗臺(tái)式離心機(jī)。②超凈工作臺(tái)。③振動(dòng)器。④水浴箱。⑤血球細(xì)胞計(jì)數(shù)器。⑥Low-E載玻片等。試劑如下：①胎牛血清。②青霉素-鏈霉素。③DMEM培養(yǎng)基。④B[α]P。⑤二甲基亞砜等。

（2）實(shí)驗(yàn)2材料。

材料如下：①Low-E載玻片。②OPUS軟件。③拉曼光譜儀。④白來(lái)航雞雞蛋。

2.方法

（1）實(shí)驗(yàn)1方法。

①細(xì)胞培養(yǎng)：選擇人類乳腺癌MCF-7細(xì)胞，常規(guī)采用T75培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。②細(xì)胞染毒：采用不同濃度的B[α]P，對(duì)MCF-7細(xì)胞染毒。③制片：細(xì)胞染毒后，吸棄培養(yǎng)瓶的細(xì)胞培養(yǎng)液制片。④光譜檢測(cè)：采用ATR-FTIR光譜檢測(cè)方法檢測(cè)。⑤處理光譜檢測(cè)圖像。

（2）實(shí)驗(yàn)2方法。

①光譜檢測(cè)：采用拉曼光譜檢測(cè)方法檢測(cè)。②處理圖譜，并計(jì)算分析數(shù)據(jù)。

3.觀察指標(biāo)

觀察苯并芘誘導(dǎo)不同細(xì)胞生物周期的MCF-7乳腺癌細(xì)胞的生物學(xué)改變情況（實(shí)驗(yàn)1）。

觀察雞胚胎角膜生長(zhǎng)發(fā)育的生物分子特征性變化情況（實(shí)驗(yàn)2）。

4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件 SPSS 21.0處理數(shù)據(jù)，p<0.05時(shí)，認(rèn)為數(shù)據(jù)對(duì)比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

二、結(jié)果

1.苯并芘誘導(dǎo)不同細(xì)胞生物周期的MCF-7乳腺癌細(xì)胞的生物學(xué)改變情況

苯并芘誘導(dǎo)不同細(xì)胞生物周期的MCF-7乳腺癌細(xì)胞的生物學(xué)改變情況（細(xì)胞數(shù)量的變化）如圖1：

通過(guò)圖1可以看出，在低劑量B[α]P誘導(dǎo)下，不同周期的MCF-7細(xì)胞生物學(xué)變化顯著。

2.雞胚胎角膜生長(zhǎng)發(fā)育的生物分子特征性變化情況

雞胚胎角膜生長(zhǎng)發(fā)育的生物分子特征性變化情況如圖2：

通過(guò)圖2可以看出，雞胚胎發(fā)育的10--18d內(nèi)，角膜的生物分子結(jié)構(gòu)改變情況較為明顯，主要表現(xiàn)為蛋白質(zhì)、糖原以及DNA/RNA的改變。

三、討論

近些年來(lái)，隨著人們飲食結(jié)構(gòu)的改變，以腫瘤為主的各類疾病發(fā)病幾率顯著提升，目前已經(jīng)對(duì)人類健康造成了極大的威脅，對(duì)腫瘤的發(fā)生機(jī)制以及生物標(biāo)記物情況等進(jìn)行研究，是確保腫瘤治療有效率，能夠得到進(jìn)一步提升的關(guān)鍵。

本文將兩種技術(shù)應(yīng)用到了具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)苯并芘誘導(dǎo)不同細(xì)胞生物周期的MCF-7乳腺癌細(xì)胞的生物學(xué)改變情況以及雞胚胎角膜生長(zhǎng)發(fā)育的生物分子特征性變化情況進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)，在低劑量B[α]P誘導(dǎo)下，不同周期的MCF-7細(xì)胞生物學(xué)變化顯著。雞胚胎發(fā)育的10--18d內(nèi)，角膜的生物分子結(jié)構(gòu)改變情況較為明顯，主要表現(xiàn)為蛋白質(zhì)、糖原以及DNA/RNA的改變。證實(shí)了生物光譜技術(shù)用于研究細(xì)胞損傷和組織生長(zhǎng)的生物分子特征性變化的價(jià)值。

四、結(jié)語(yǔ)

綜上所述，可將生物光譜技術(shù)，作為研究細(xì)胞損傷和組織生長(zhǎng)的生物分子特征性變化的主要技術(shù)，提高研究的科學(xué)性水平。

參考文獻(xiàn)：

[1]姚軍，李佳. 納米微孔聚乙酸內(nèi)酯聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)兔損傷關(guān)節(jié)軟骨結(jié)締組織生長(zhǎng)因子蛋白的影響[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2014，18：2887-2890.

[2]余強(qiáng)，劉洪，楊文萍. 免疫球蛋白A1和肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子與腹型過(guò)敏性紫癜患兒胃組織損傷關(guān)系的研究[J]. 中國(guó)循證兒科雜志，2013，06：463-466.

作者簡(jiǎn)介：顧依然（1995-8-），男，籍貫：江蘇省無(wú)錫人，學(xué)歷：本科，南昌大學(xué)在讀。