永川地區懷孕婦女地中海貧血基因型分布狀況及干預模式探討

樊中桂

402160重慶市永川區婦幼保健院

永川地區懷孕婦女地中海貧血基因型分布狀況及干預模式探討

樊中桂

402160重慶市永川區婦幼保健院

目的：探討永川地區懷孕婦女地中海貧血基因型分布狀況，預防和控制重型與中間型地中海貧血患兒出生。方法：選擇孕婦1.5萬例，行地中海貧血篩查。對確診為地中海貧血的患者行α、β-地中海貧血基因型分析。結果：經基因檢測確診1 185例地中海貧血患者，α-地中海貧血889例，β-地中海貧血195例，αβ復合型地中海貧血101例。α-地中海貧血患者中，突變類型主要為缺失型；β-地中海貧血中，CD41-42、IVS-Ⅱ654、IVS-Ⅱ-28為突變類型。結論：闡明了永川區地中海基因突變類型及構成比，對于預防和控制重型、中間型地中海貧血患兒有重要意義。

地中海貧血；孕婦；基因型分布；干預模式

β-地中海貧血是一種遺傳性疾病，β-珠蛋白基因簇定位于11pter-p15.5，世界上約有1億以上的人口攜帶這種疾病的突變基因。到目前為止，在我國人群中發現的β-地中海貧血突變類型已超過34種[1]，主要分布在廣東、廣西、海南、臺灣、香港等省市及相鄰省區的部分地區。據報道，廣東人口β-地中貧血攜帶率1.83%～3.36%，廣西和海南更高。傳統的地中海貧血篩查方法主要有血常規測定、紅細胞脆性檢測、血紅蛋白電泳等，這些方法共同的不足之處是只能對患者進行初步的地中海貧血篩查，無法對患者基因型進行確診，而且對輕型地中海貧血容易漏診，造成下一代重癥地中海貧血兒的出生[2]。本項目采用PCR體外擴增結合DNA膜芯片反向點雜交技術，進行β-地中海貧血的臨床診斷，現報告如下。

資料與方法

2015年1月-2016年12月行產前檢查孕婦1.5萬例為研究對象，并且全部納入地中海貧血篩查。

方法：①分離提取DNA：按照3 mm×3 mm形狀進行剪切圓形血斑，并加入1.5 IEP管中。嚴格按照DNA提取試劑盒說明書進行提取分離，并從血斑中提取出所需的DNA。②基因診斷：采用PCR體外擴增結合DNA膜芯片反向點雜交技術檢測α、β-地中海貧血基因型，嚴格按照技術說明書進行規范檢測，在GeneAmpPCR System 97擴增儀行PCR、PCR產物雜交與顯色[3]。通過對結果的分析，共計檢測出3種缺失型α-地中海貧血、3種突變型α-地中海貧血、16種突變型β-地中海貧血。其中，3種缺失型α-地中海貧血由--SER、-α3.7、-α 4.2；3種突變型α-地中海貧血有CS、QS、WS；16種突變型β-地中海貧血有 -28(A-G)、 -29(A-G)、 C(-AAAC)、Int(T-G)、 CD14/15(+G)、 CD17(A-T)、CD27/28(+C)、 β E(G-A)、 CD31(-C)、CD41/42(-TTCT)、 CD43(G-T)、 CD71/72(+A)、 IVS-1-1(G-T， G-A)、 IVS-1-5(G-C)及IVS-Ⅱ-654(C-T)。

統計學方法：本研究數據資料均采用SPSS 18.0軟件包進行分析處理，計量數據表示形式為百分率(%)。

結 果

地中海貧血基因分型情況：經基因檢測，1.5萬例地中海貧血疑似患者中確診的地中海貧血患者1 185例，其中，α-地中海貧血889例、β-地中海貧血195例、αβ復合型地中海101例，見表1。

α-地中海貧血主要基因型分布情況：889例α-地中海貧血患者中，--/αα基因型667例(75.02%)、--α/αα基因型56例(6.30%)、--α/αα基因型72例(8.09%)、αα/αα基因型 72例(8.09%)、αα/αα基因型22 例(9.9%)。由此可知，α-地中海貧血主要基因型為--/αα基因型、--α/αα基因型，見表2。

β-地中海貧血主要基因型分布情況：β-地中海貧血195例，基因型CD41-42有85例、基因型IVS-Ⅱ-654有40例、基因型-28有35例、基因型CD17有18例、基因型CD71-72有17例。

表1 地中海貧血基因分型情況

表2 α-地中海貧血主要基因型分布情況

討 論

地中海貧血又稱海洋性貧血，是一種遺傳性溶血性貧血疾病。本病在地中海沿岸國家和東南亞各國多見，是我國南方各省最常見、危害最大的遺傳病，人群發生率高達10%以上。本組疾病的臨床癥狀輕重不一，大多表現為慢性進行性溶血性貧血[4]。目前對重型地中海貧血尚無有效治療手段，僅能依靠輸血維持患者生命，進行造血干細胞移植花費巨大，目前成功率也僅在70%左右。早發現和淘汰重癥地中海貧血兒是唯一方法，因此產檢篩查與高危夫婦產前基因診斷，防止重型地中海貧血兒的出生顯得極為重要[5]。重癥地中海貧血患兒的出生是世界公認的公共衛生問題，通過產前診斷阻止重癥患兒出生是首選預防措施。地中海貧血是WHO優先推薦在發展中國家實施預防的遺傳性疾病，預防地中海是中國南方高發區減少出生缺陷的戰略需求。

我國南方的廣西、廣東、海南、香港等省市及其周邊地區是本病的高發地區。全國29個省、市、自治區90萬人血紅蛋白病調查結果表明，人群中α-地中海貧血的基因缺陷攜帶率2.64%[6]。

綜上所述，本研究對永川區疑似地中海貧血患者進行了分析，對確診患者的基因型分布狀況進行了準確的分析，檢測方法準確可靠，可確定受檢孕婦是否攜帶地中海貧血基因，從而為干預方案提供有價值的參考，以降低新生兒地中海貧血的發生率。

[1]包碧惠.地中海貧血臨床診斷進展[J].現代生物醫學進展,2014,8(5)：979.

[2]陸國輝.產前遺傳病診斷[M].廣州：廣東科技出版社,2015.

[3]陳正勤.桂林地區α-地中海貧血的產前基因診斷[J].廣東醫學,2009,30(2)：219-220.

[4]張明.血液學指標正常的α-地中海貧血基因攜帶者的檢出及臨床意義[J].中國婦幼保健,2015,24(3)：376-377.

[5]蔡中才.重慶地區地中海貧血的產前篩查結果報告[J].中國優生與遺傳雜志.2012,12(2)：109-110.

[6]李澤松.多重聚合酶鏈反應在α-地中海診斷中的應用[J].中華檢驗學雜志,2005,28(3)：247-250.

Genotype distribution and intervention model of thalassemia of pre pregnancy population in Yongchuan area

Fan Zhonggui
The Maternal and Child Health Hospital of Yongchuan District,Chongqing City 402160

Objective：To explore the genotype distribution of thalassemia of pre pregnancy population in Yongchuan area,to prevent and control children birth with middle and severe type of thalassemia.Methods：15 thousand pregnant women were selected and they were screened for thalassemia.The patients diagnosed with thalassemia were given alpha,beta thalassemia genotype analysis.Results：1 185 patients were diagnosed for thalassemia by gene analysis,including alpha thalassemia in 889 cases,195 cases of thalassemia and 101 cases of compound alpha beta thalassemia.In alpha thalassemia patients,the main mutation type was deletion type.In beta thalassemia,CD41-42、IVS-Ⅱ654、IVS-Ⅱ-28 were types of mutations.Conclusion：In this study,we clarified the types and composition of mutations in the mediterranean in Yongchuan area,which had important significance for the prevention and control of severe and middle type of children with thalassemia.

Thalassemia;Pre pregnancy population;Genotype distribution;Intervention model

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.14.60