遼寧地區不同豬瘟疫苗免疫效果比較試驗

李鳳元+宋淑英

摘要：在遼寧選取3個使用不同廠家豬瘟疫苗的生豬養殖場，對受試場的豬瘟疫苗免疫效果進行評估，比較疫苗免疫效果。結果表明，在遼寧地區使用的強制免疫疫苗和杭州某公司生產的豬瘟疫苗，免疫效果較好，其抗體生成率較高，可在遼寧地區生豬飼養場推廣應用，以確保遼寧地區豬瘟的綜合防控效果。

關鍵詞：豬瘟疫苗；免疫；效果；遼寧地區

中圖分類號：S858.28；S851 文獻標識碼：A 文章編號：1007-273X（2017）05-0007-02

豬瘟（CSF）是由黃病毒科瘟病毒屬的豬瘟病毒（CSFV）引起的一種傳染病。該病具有傳染性強、高度接觸性、熱性等特點[1]。豬是豬瘟病毒的惟一天然宿主，該病毒能夠引起各年齡階段豬發病。由于具有較高的傳染性和致死性，該病被歸類為一類動物疫病[2，3]。

由于我國對豬瘟實施了較長時間的強制免疫，因此該病在我國的流行和發病特點均已出現了較大的變化。目前，該病的發病多為隱性感染，感染病豬多無明顯發病癥狀。亞臨床感染或隱性感染病豬多表現為非典型癥狀[4]，但隱性感染病豬可常期帶毒，并向周圍環境排出病毒。隱性感染的母豬可將攜帶的病毒垂直傳播給新生的仔豬，造成木乃伊胎、死胎或仔豬帶毒。當機體在其他因素作用下出現抵抗能力降低時易造成豬瘟的大規模暴發[5]。給生豬養殖業帶來巨大經濟損失。疫苗免疫仍是豬瘟防控的首選方案，但目前市場上的豬瘟疫苗品種繁多，各種疫苗免疫效果參差不齊，給豬瘟的防控帶來不確定因素[6]。本試驗在遼寧選取了3個使用不同廠家豬瘟疫苗的生豬養殖場，對受試場的豬瘟疫苗免疫效果進行評估，比較疫苗免疫效果，為遼寧地區豬瘟防控提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 受試豬場 分別在遼寧撫順、錦州、阜新地區選取3家規模化生豬飼養場，每場選取4窩16頭仔豬（公母各半）進行豬瘟疫苗免疫效果比較試驗。

1.1.2 受試疫苗 撫順豬場使用本省豬瘟強制免疫疫苗；錦州豬場使用杭州某疫苗公司生產的豬瘟疫苗；阜新豬場使用北京某疫苗公司生產的豬瘟疫苗。

1.1.3 主要材料 豬瘟ELISA抗體檢測試劑盒購于深圳康百德生物科技有限公司；無菌注射器、真空采血管、電熱恒溫培養箱（CDF-DX006）、恒溫數顯水浴鍋（BC303）、多道可調微量移液器（Eppendorf）、單道可調微量移液器（Thermo fisher）等由遼寧省重大動物疫病應急中心提供。

1.2 方法

1.2.1 血液樣品采集 第1次采血：在仔豬23日齡（首免前2 d）時，對受試仔豬進行前腔靜脈采血，用于測量母源抗體。第2次采血：在首免后30 d對各組受試仔豬進行第2次采血。第3次采血：在加強免疫后30 d進行第3次采血。

1.2.2 疫苗免疫 第1次免疫：在仔豬25日齡時，于頸側部注射豬瘟疫苗，注射劑量按照說明書參考劑量進行。第2次免疫：在首輪免疫后30 d，仔豬55日齡時，在頸部肌肉進行豬瘟疫苗加強免疫。

1.2.3 豬瘟抗體ELISA檢測

（1）血清制備。將采集的血液按照常規血清制備方法室溫放置，當析出血清后離心。血清應清亮、無溶血。

（2）洗滌液制備。將濃縮的洗滌液于恒溫水浴鍋中使其保持在25 ℃，搖動使沉淀的鹽溶解后用無菌去離子水進行20倍稀釋，稀釋后的洗滌液于4 ℃保存。

（3）樣品稀釋。在血清稀釋板中，按1∶40的體積比稀釋待檢血清。同時按照1∶40的體積比稀釋陽性對照和陰性對照。

（4）加樣方法。取預包被的檢測板，將稀釋好的待檢血清100 μL加入檢測板孔中。陰性對照和陽性對照各加2個孔，每孔加入100 μL。輕輕振勻孔中的樣品，放置于37 ℃恒溫培養箱中溫育30 min。

甩掉孔中的溶液，用洗滌液洗板5次，每孔加入洗滌液200 μL，每次靜置3 min，在干凈的吸水紙上拍干。

每孔加入羊抗豬酶標二抗100 μL，放置于37 ℃恒溫培養箱中孵育30 min。洗滌5次并在吸水紙上拍干。

每孔先加底物液A 50 μL，再加底物液B 50 μL，混勻后室溫避光顯色10 min。

每孔加入終止液50 μL，并在10 min內進行結果測定。

（5）結果判定。在酶標儀中測量各孔OD630 nm。試驗成立條件為陽性對照孔平均OD630 nm≥1.0，陰性對照孔平均OD630 nm<0.30。樣品OD630 nm>0.35為陽性，否則為陰性。

2 結果與分析

經豬瘟ELISA抗體檢測試劑盒檢測，3不同生產廠家生產的豬瘟疫苗免疫后抗體生成率具體情況見表1。由表1可知，受試養殖場豬瘟母源抗體水平均較低，其中阜新場母源抗體水平最低，為0；撫順受試場較高，為6.25%；錦州受試場母源抗體水平最高，為18.75%；首免后，撫順受試場強制免疫疫苗抗體生成水平最高，檢測抗體陽性率為100%；北京某公司生產的豬瘟疫苗（阜新受試場）抗體檢測陽性率次之，為87.50%；杭州某公司生產的豬瘟疫苗（錦州受試場）抗體檢測陽性率最低，為81.25%。加強免疫后，杭州某公司生產的豬瘟疫苗（錦州受試場）抗體檢測陽性率最高，為100%；強制免疫疫苗（撫順受試場）的抗體生成水平次之，檢測抗體陽性率為93.75%；北京某公司生產的豬瘟疫苗（阜新受試場）抗體檢測陽性率最低，為75.00%。

綜合分析表1的3種疫苗抗體檢測結果，遼寧地區使用的豬瘟強制免疫疫苗和杭州某公司生產的豬瘟疫苗在此次試驗中豬瘟抗體陽性率相對較好。強制免疫疫苗在首免后，疫苗保護率可達100%，加強免疫后抗體保護率可達93.75%；杭州某公司生產的疫苗可在加強免疫后達到100%的抗體保護率，且首免后抗體保護率也相對較高，達到81.25%。因此這兩種疫苗抗體水平和保護率較為理想。

3 討論

豬瘟為OIE規定的A類傳染病，是國際貿易中重要的檢查傳染病。該病最早在1833于美國發現，初稱為豬霍亂[7]。最初許多歐洲國家如荷蘭、比利時、意大利等已宣布消滅該病，但有報道指出上述國家又相繼暴發豬瘟。在我國，豬瘟流行特點變化較大，主要以隱性感染和慢性感染為主，易造成母豬帶毒，使仔豬先天性感染，對豬群健康造成潛在風險，是影響生豬養殖業的主要疫病之一，給養殖業造成巨大的經濟損失[8-10]。

目前，豬瘟的防控主要是以疫苗免疫為主。但目前市售豬瘟疫苗種類眾多，免疫效果也不盡相同。因此選擇免疫效果好、抗體保護率高的疫苗，對豬瘟進行有效地綜合防控具有較為實際的應用意義。本試驗對遼寧地區使用較多的3種豬瘟疫苗的免疫效果進行了評估，結果表明，在遼寧地區使用的強制免疫疫苗和杭州某公司生產的豬瘟疫苗其免疫效果較好，抗體生成率較高，可在遼寧地區生豬飼養場推廣應用，以確保遼寧地區豬瘟的綜合防控效果。

參考文獻：

[1] 劉 建，湯德元，李春燕，等.我國豬瘟流行新趨勢與防控措施[J].豬病防控，2013（2）：37-39.

[2] 趙 耘，寧宜寶.豬瘟疫苗研究進展[J].動物醫學進展，2004，25（1）：39-42.

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