豬乙型腦炎疫苗免疫試驗(yàn)

段正贏，周丹娜，楊克禮，郭 銳，劉 威，劉澤文，袁芳艷，田永祥

（湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所/農(nóng)業(yè)部畜禽細(xì)菌病防治制劑創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/動(dòng)物胚胎工程及分子育種湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430064）

豬乙型腦炎疫苗免疫試驗(yàn)

段正贏，周丹娜，楊克禮，郭 銳，劉 威，劉澤文，袁芳艷，田永祥

（湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所/農(nóng)業(yè)部畜禽細(xì)菌病防治制劑創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/動(dòng)物胚胎工程及分子育種湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430064）

乙型腦炎（Japanese encephalitis,JE）又稱日本乙型腦炎、流行性乙型腦炎，俗稱乙腦，是由流行性乙型腦炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）引起的一種人畜共患傳染病[1]，也是導(dǎo) 致豬繁殖障礙的主要疾病之一。蚊蟲是該病的傳播媒介，呈明顯的季節(jié)性流行。豬是該病的擴(kuò)散宿主，乙型腦炎病毒可通過(guò)蚊蟲叮咬傳染給人。豬感染本病后，母豬主要表現(xiàn)為死胎，公豬主要表現(xiàn)為急性睪丸炎，肥育豬主要表現(xiàn)為持續(xù)高熱，仔豬主要表現(xiàn)為腦炎。該病毒還可引起人的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，對(duì)人類健康和養(yǎng)殖業(yè)均可造成較大威脅[2]。

豬場(chǎng)對(duì)豬乙型腦炎的預(yù)防，主要是采取加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、檢疫、隔離、消毒等措施，最主要的預(yù)防措施是注射乙型腦炎疫苗[3]，目前臨床 上普遍采用的是豬乙型腦炎減毒活疫苗和鼠腦滅活疫苗。為了解豬 JE 疫苗的免疫效果，2016 年 9 月，將兩個(gè)廠家生產(chǎn)的弱毒活疫苗及湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所實(shí)驗(yàn)室自制的滅活疫苗在湖北某豬場(chǎng)進(jìn)行了免疫試驗(yàn)，采集免疫后血清檢測(cè)抗體水平，并以此評(píng)價(jià)豬 JE 疫苗的免疫效果，以期為臨床預(yù)防該病提供參考。

1 材料與方法

1.1 試劑

1.2 疫苗

A、B 兩種豬 JE 疫苗，分別來(lái)自國(guó)內(nèi)兩個(gè)疫苗生產(chǎn)企業(yè)，兩種疫苗均為弱毒疫苗，且均在有效期內(nèi)，并按說(shuō)明書要求進(jìn)行保存和使用。C 疫苗為實(shí)驗(yàn)室自制滅活疫苗。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及分組

在湖北某規(guī)模化豬場(chǎng)選擇乙型腦炎陰性健康豬80 頭，體重均為 20 kg 左右（55～60 日齡），分組時(shí)盡量考慮性別的平均分配。

將 80 頭 JE 抗體陰性豬分成 4 組，每組 20 頭，分別為疫苗 A 免疫組、疫苗 B 免疫組、疫苗 C 免疫組和空白對(duì)照組。按場(chǎng)里管理要求，免疫接種豬瘟、偽狂犬病等疫苗，常規(guī)飼養(yǎng)管理。

1.4 免疫程序

試驗(yàn)豬于 55～60 日齡免疫 1 次，疫苗接種劑量均為 1 頭份/頭，免疫途徑為頸部肌肉注射。

1.5 血樣的采集及處理

從疫苗免疫后開始，每隔7 d對(duì)試驗(yàn)豬進(jìn)行采血，5mL/頭，共采血 7 次。全血送至實(shí)驗(yàn)室后采用離心方法分離血清，并將血清保存于-20 ℃冰箱中，備用。

為安排好學(xué)員的學(xué)習(xí)、工作與生活，河北省圖書館在學(xué)員到館之前電話聯(lián)系到每一位學(xué)員，了解每個(gè)人在受援單位的專業(yè)背景、工作崗位、培訓(xùn)需求，并根據(jù)實(shí)際情況，為每個(gè)學(xué)員預(yù)先安排首個(gè)培訓(xùn)崗。

1.6 抗體檢測(cè)

用武漢科前生物股份有限公司生產(chǎn)的豬 JE 抗體 ELISA 檢測(cè)試劑盒對(duì)所有血清樣品進(jìn)行抗體檢測(cè)，操作方法參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。樣品乙型腦炎抗體判定標(biāo)準(zhǔn)：S/P 值≥0.21 為陽(yáng)性，S/P 值＜0.21為陰性。

2 結(jié)果

對(duì)不同免疫組、空白對(duì)照組在免疫后不同階段的血清進(jìn)行 JE 抗體檢測(cè)，免疫后 1 周，疫苗免疫組開始有少量豬只轉(zhuǎn)陽(yáng)；免疫后 3 周，抗體陽(yáng)性率均達(dá)到80%以上；免疫后 4～7 周，抗體陽(yáng)性率在 85%～100%；抗體陽(yáng)性率為逐漸上升趨勢(shì)。空白對(duì)照組在第 5～7周，抗體陽(yáng)性率在 25%～20%。結(jié)果見(jiàn)表 1 和圖 1。

表1 豬JE疫苗免疫組與空白對(duì)照組血清抗體檢測(cè)

圖1 豬JE疫苗免疫組與空白對(duì)照組抗體陽(yáng)性率比較

3 小結(jié)與討論

豬是 JEV 最重要的傳染源、儲(chǔ)存宿主和擴(kuò)大器[4]。豬在感染 JEV 后病毒血癥維持時(shí)間較長(zhǎng)，而且豬感染后一般不出現(xiàn)腦炎癥狀，而種豬感染后的癥狀主要為流產(chǎn)、死胎等。隨著豬的飼養(yǎng)量日漸增多，并且豬群每年的更新速度很快，而新生仔豬由于母源抗體的消失，同時(shí)在未進(jìn)行疫苗免疫接種的情況下，對(duì)JEV 十分易感，可由攜帶 JEV 的蚊蟲叮咬后發(fā)生感染從而成為新的傳染源[5]。

通過(guò)對(duì) A、B 弱毒苗免疫組和空白對(duì)照組 JE 抗體陽(yáng)性率的比較分析發(fā)現(xiàn)，兩個(gè)弱毒苗免疫組在免疫后 4 周抗體水平均可達(dá)到 90%以上，并可維持到7 周以上。A、B 兩種疫苗均為 SA14-14-2 毒株的弱毒苗，表明兩個(gè)廠家生產(chǎn)的 JE 疫苗，在免疫效果上無(wú)明顯差異。

C疫苗組為滅活疫苗組，在免疫后4周抗體水平達(dá)到 85%，5 周后抗體水平均可達(dá)到 90%以上，也可維持到 7 周以上。與 A、B 弱毒苗免疫組相比，免疫效果上也無(wú)明顯差異。

另外，在本試驗(yàn)過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)，空白對(duì)照組在第5周后出現(xiàn)了抗體轉(zhuǎn)為陽(yáng)性的情況，出現(xiàn)這種情況的原因有可能是本次試驗(yàn)選用的疫苗中有弱毒苗，各試驗(yàn)組之間只是相對(duì)分欄，但還是飼養(yǎng)在一棟?rùn)谏醿?nèi)，疫苗毒有可能通過(guò)蚊蟲叮咬而傳染給其他欄舍內(nèi)的豬；其次，由于檢測(cè)抗體所用的 ELISA 試劑盒無(wú)法區(qū)分疫苗毒和野毒，也無(wú)法排除有可能是野毒感染后而產(chǎn)生的抗體。

通過(guò)本次試驗(yàn)，顯示弱毒疫苗與滅活疫苗在免疫效果上無(wú)明顯差異，表明乙型腦炎疫苗對(duì)豬進(jìn)行免疫接種后，均可達(dá)到較理想的免疫效果，說(shuō)明乙型腦炎疫苗的預(yù)防接種仍然是現(xiàn)階段防控乙型腦炎最有效的預(yù)防措施之一。因此，對(duì)于乙型腦炎的防控，首先要做好免疫預(yù)防，在此前提下，還要切實(shí)做到加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好環(huán)境消毒、滅蚊等生物安全工作，才能防止本病的發(fā)生。

[1] 殷震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].2 版.北京：科學(xué)出版社，1997：470-473.

[2] 段正贏，周丹娜，郭銳，等.淺談豬乙型腦炎的防治[J].湖北畜牧獸醫(yī)，2015，36（8）：25-26.

[3] 劉剛.豬乙型腦炎抗體檢測(cè)試驗(yàn)[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014（1）：66-67.

[4] 陳孝明，亓文寶，張桂紅，等.廣東省部分規(guī)模化豬場(chǎng)乙腦抗體的監(jiān)測(cè)與分析[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（9）：154-155.

[5] 張海明，薛紅，段曉冬，等.豬流行性乙型腦炎免疫抗體消長(zhǎng)規(guī)律的研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2013（9）：109-112.

（編輯：郭玉翠）

睡覺(jué)緩解慢性疼痛好于鎮(zhèn)痛藥

【埃菲社倫敦 5 月 8 日電】題：多睡覺(jué)或攝入咖啡因緩解慢性疼痛效果好于鎮(zhèn)痛藥

英國(guó)《自然》周刊刊登的一篇新研究報(bào)告顯示，多睡覺(jué)或攝入含咖啡因等提神成分的食物，可以明顯緩解慢性疼痛，其效果要好于布洛芬、嗎啡等鎮(zhèn)痛藥。

波士頓兒童醫(yī)院和哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院聯(lián)合進(jìn)行的一項(xiàng)研究通過(guò)在小鼠身上的實(shí)驗(yàn)，對(duì)重度或慢性睡眠不足與對(duì)疼痛刺激敏感度之間的關(guān)聯(lián)進(jìn)行了分析和評(píng)估。

睡眠醫(yī)學(xué)專家克洛艾·亞歷山大博士介紹說(shuō)，研究人員用玩具、游戲等娛樂(lè)活動(dòng)對(duì)小鼠進(jìn)行了睡眠剝奪，以此模擬那些用夜間睡眠時(shí)間看電視的人的生理狀況。然后，研究人員又對(duì)這些小鼠對(duì)疼痛刺激的敏感度進(jìn)行了評(píng)估和測(cè)定，這些刺激來(lái)自一定程度的熱、冷、擠壓以及辣椒素。研究人員記錄了小鼠對(duì)每一種疼痛刺激的反應(yīng)時(shí)間。

亞歷山大說(shuō)：“我們發(fā)現(xiàn)，連續(xù) 5 天的適度睡眠剝奪會(huì)顯著加劇健康小鼠對(duì)疼痛的敏感度。”而令人驚訝的是，布洛芬、嗎啡等常用鎮(zhèn)痛藥并不能抑制由睡眠剝奪導(dǎo)致的疼痛敏感度提升。而實(shí)驗(yàn)表明，咖啡因、莫達(dá)非尼等覺(jué)醒促進(jìn)劑則可以在小鼠身上有效抑制睡眠剝奪導(dǎo)致的疼痛敏感度提升。

亞歷山大表示，這一研究發(fā)現(xiàn)提供了一種以前不為人知的新鎮(zhèn)痛機(jī)制，這種機(jī)制取決于承受疼痛的動(dòng)物的生理狀況。許多患者陷于疼痛與睡眠不足的惡性循環(huán)之中，而咖啡因等覺(jué)醒促進(jìn)劑可以打破這種惡性循環(huán)，發(fā)揮鎮(zhèn)痛藥無(wú)法達(dá)到的效果。

（轉(zhuǎn)自 參考消息[N]，2017-05-10）

S858.285.3

A

1002-1957(2017)03-0095-02

2017-04-17

湖北省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新中心項(xiàng)目（2017-620-000-001-026）；動(dòng)物胚胎工程及分子育種湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題（2017ZD159）

段正贏（1970-），男，湖北鐘祥人，高級(jí)獸醫(yī)師，主要從事家畜傳染病研究工作.E-mail：dzy2030@126.com

田永祥（1965-），男，湖北武漢人，研究員，主要從事家畜傳染病研究工作.E-mail：tyxanbit@163.com