菊花在制劑工藝中不同滅菌方式對質量影響的考察

劉超，喻貴英，劉偉霞，昌秦芬，汪楊

太極集團重慶桐君閣藥廠有限公司，重慶南岸 401336

菊花在制劑工藝中不同滅菌方式對質量影響的考察

劉超，喻貴英，劉偉霞，昌秦芬，汪楊

太極集團重慶桐君閣藥廠有限公司，重慶南岸 401336

目的考察制劑中不同滅菌方式對菊花的滅菌效果及質量的影響。方法分別采用濕熱滅菌、輻照滅菌、低溫干燥3種方法進行考察。結果滅菌效果順序：輻照滅菌＞濕熱滅菌＞低溫干燥；對指標成份的影響：不同的滅菌方式對綠原酸、木犀草苷無顯著影響，但濕熱滅菌法對3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸影響較大，損失率約50%～60%。結論對菊花藥材采用輻照滅菌與濕熱滅菌法均可取得較好效果,但考慮到輻照滅菌的安全性需要進一步研究，傳統的中藥制劑大多以濕熱滅菌方式為主，為了確保產品的內在質量，需要進一步優化濕熱滅菌工藝參數。

菊花藥材；加工方式；質量影響

菊花為菊科植物(Chrysenthemum morifklium Ramat)的干燥頭狀花序，具有疏風、清熱、明目、解毒等功效[1]。菊花含有多種化學成分，現代研究表明，菊花含有黃酮類、酚酸類、揮發油類、氨基酸和糖類等活性物質[2]，因品種、產地、采摘期、加工炮制等不同，其主要化學成分的種類和含量有一定的差異[3]。其中黃酮和酚酸等多酚類物質是作為評價菊花品質優劣的重要指標，同時作為含菊花制劑內在質量優劣的評價指標。《中國藥典》(2015版)根據菊花產地和加工方法的不同，收載了亳菊、滁菊、貢菊和杭菊4個品種，并規定了菊花中綠原酸(3-CQA)、木犀草苷(L-7-O-Glu)和3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸(3，5-DCQA)的最低含量[1]。菊花藥材為大宗農副產品，容易染菌，為了確保其制劑的微生物限度，制劑時需對菊花藥材進行滅菌處理。該文研究采用不同加工方式對制劑中菊花藥材的滅菌效果及質量影響進行考察,以指導制劑工藝設計及改進工作。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

PH030J型電熱恒溫干燥箱(江蘇常州)；小型手控壓力滅菌器YXQ-WF32A(成都鍋爐輔機廠)；KQ-500DBB型數控超聲波清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司)；安捷倫HP1260型高效液相色譜儀。

1.2 試藥

對照品綠原酸（批號：110753-201314）、木犀草苷（批號：111720-201408）和3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸（批號：111782-201405）均購于中國藥品生物制品檢定研究院；所用菊花藥材由太極集團重慶桐君閣藥廠有限公司提供。

2 方法與結果

2.1 樣品的制備

2.1.1 樣品來源 分別取庫存3批藥材各2 kg，進行凈選，混勻，均分成4份，每份各0.5 kg。

2.1.2 未滅菌藥材 分別取上述凈選的3批菊花藥材各0.5 kg即可。

2.1.3 輻照滅菌藥材 分別取上述凈選的3批菊花藥材各0.5 kg，采Co60輻照滅菌，劑量控制在3 kGy以內。

2.1.4 濕熱滅菌藥材 分別取上述凈選的3批菊花藥材各0.5 kg，采用濕熱壓滅菌121℃,40min，70～80℃干燥2 h即可。

2.1.5 低溫干燥藥材 分別取上述凈選的3批菊花藥材各0.5 kg，置于電熱恒溫干燥箱中，60℃干燥4 h即可。

2.2 衛生學檢驗方法與結果

按《中國藥典》2015年版四部規定對以上樣品進行衛生學檢驗，結果見表1。

2.3 含量測定方法

2.3.1方法《中國藥典》2015版一部菊花含量測定方法。

2.3.2 色譜條件 色譜柱為：Agilent Eclipse XDB-C18（250 mm×4.6 mm，5.0 μm）色譜柱；柱溫30℃；檢測波長為348 nm；流速1.0 mL/min；進樣量5 μL；以乙腈為流動相A，以0.1%磷酸溶液為流動相B，按表2梯度進行洗脫。

表2 流動相梯度洗脫表

表3 不同滅菌方法對藥材含量影響結果比較

2.3.3 對照品溶液的制備 取綠原酸對照品、木犀草苷對照品、3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每1 mL含綠原酸35 μg，木犀草苷25 μg，3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸80 μg的混合溶液，即得(10℃以下保存)。

2.3.4 供試品溶液的制備 取樣品粉末(過四號篩)約0.25 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率500 W，頻率40 kHz) 40 min，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.3.5 測定溶液 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μL，注入液相色譜儀，測定。

2.4 檢測結果

不同滅菌方法對藥材含量影響結果見表3

2.5 不同滅菌方式的液相圖譜比較

不同滅菌方式的液相圖具體見圖1、圖2、圖3、圖4、圖5。

3 討論

①實驗結果表明，濕熱滅菌與輻照滅菌均能較好地殺滅微生物，起到較好的滅菌效果；而低溫干燥僅能減少藥材中的部分微生物。若制劑中以藥粉入藥,則應采用濕熱滅菌或輻照滅菌更能保證衛生學質量。

圖1 對照品混合溶液圖譜

圖2 凈選藥材圖譜

圖3 低溫干燥藥材圖譜

圖4 輻照滅菌圖譜

圖5 濕熱滅菌圖譜

②通過對不同加工方式樣品的色譜圖分析，溫熱滅菌的藥材色譜圖中，組份色譜峰相對減少，3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸的峰高明顯降低；其他兩種加工方式的藥材與原藥材比較，組份色譜峰與峰高基本相同。實驗結果表明加工方式對菊花的組成成份有一定影響。

③濕熱滅菌對菊花藥材外觀顏色的影響比輻照滅菌、低溫干燥等方式對菊花藥材的外觀顏色的影響更明顯,且對菊花的指標成份有較大的影響，特別是對3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸的影響，通過濕熱滅菌會導致3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸損失約60%；輻照滅菌雖對菊花外觀及指標成份影響較小，但存在鈷60殘留的安全隱患，需要進一步研究。因此在工藝設計及改進時，應根據制劑的實際情況確定滅菌方式及滅菌參數，確保產品質量；在制定產品質量標準時也應充分考慮不同的廠家采用的不同滅菌工藝對產品質量的影響，而制定合理的限度標準。

[1]《中國藥典》[S].2015年版一部.2015：310-311.

[2]謝占芳，張倩倩，朱凌佳，等.菊花化學成分及藥理活性研究進展[J]，河南大學學報：醫學版，2015，34（4）：290-300.

[3]覃珊，溫學森.藥用菊花質量影響因素研究進展[J]，2010年全國中醫院院長暨道家文化與中醫藥養生論壇，2010：96-100.

R28

A

1672-5654（2017）04（c）-0112-04

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.12.112

2017-01-20）

劉超（1966-），男，重慶人，本科，工程師，研究方向：制藥工程。