苦丁茶粗多酚對DSS誘導C57BL/6J小鼠潰瘍性結腸炎的預防作用

趙 欣,騫 宇

(重慶第二師范學院 重慶市功能性食品協同創新中心;重慶市功能性食品工程技術研究中心; 功能性食品研發重慶市工程實驗室;生物與化學工程系,重慶 400067)

苦丁茶粗多酚對DSS誘導C57BL/6J小鼠潰瘍性結腸炎的預防作用

趙 欣,騫 宇*

(重慶第二師范學院 重慶市功能性食品協同創新中心;重慶市功能性食品工程技術研究中心; 功能性食品研發重慶市工程實驗室;生物與化學工程系,重慶 400067)

目的:通過DSS(葡聚糖硫酸鈉)誘導潰瘍性結腸炎(UC)動物模型對苦丁茶粗多酚(KTCP)的UC預防效果進行了研究。方法:使用試劑盒檢測小鼠的血清指標,同時使用RT-PCR技術檢測小鼠結腸組織的mRNA表達。結果:動物實驗結果顯示KTCP能控制UC造成的小鼠體重下降和疾病活動指數(Disease activity index,DAI)增高;同時,KTCP還可以使UC造成結腸長度縮短和結腸重量/結腸長度比值降低得到有效的控制。解剖小鼠后對小鼠的血清和組織進行實驗,觀察到KTCP可以提高血清中SOD(超氧化物歧化酶)含量、降低細胞因子IL-6(白介素-6)、IL-12(白介素-12)和TNF-α(腫瘤壞死因子-α)的水平;KTCP還可以降低結腸組織中MPO(髓過氧化物酶)、MDA(丙二醛)的含量、提高GSH(谷胱甘肽)的含量。RT-PCR實驗結果顯示,相對于對照組KTCP可以下調結腸組織中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和CXCR2的mRNA表達。同時,高濃度的KTCP使小鼠的實驗指標更接近于正常組小鼠,顯示出更好的效果。結論:KTCP具有較好的潰瘍性結腸炎的預防作用。

苦丁茶,多酚,潰瘍性結腸炎,趨化因子受體,表達

苦丁茶作為一種傳統的純天然保健飲料,是冬青科植物大葉冬青的葉制備而成的一種飲品,與綠茶、紅茶等傳統茶葉相比,在口感、成分、生理活性作用上都有一定的差異[1]。苦丁茶包含超過200種成分,其中包括苦丁皂甙、氨基酸、維生素C、多酚、黃酮、蛋白質等生理活性物質[2]。綠茶等傳統茶葉含有20%～35%茶飲料中的茶多酚,有研究表明苦丁茶也含有超過20%的多酚類物質[3]。

結腸炎是發生在結腸的炎癥性病變,包括潰瘍性結腸炎、缺血性結腸炎、偽膜性結腸炎,其中潰瘍性結腸炎作為非特異性炎癥性疾病在結腸炎中發病率最高,在我國潰瘍性結腸炎在人群中的發病率已經超過10/10萬[4]。潰瘍性結腸炎有導致結腸癌的可能,有調查顯示，在歐美國家患潰瘍性結腸炎10年以上者,引發結腸癌的危險性提高,患病25年者危險性達到9%[5]。因為潰瘍性結腸炎的引發原因尚不清楚,調整攝入食物的種類可能是一種有效的手段。

茶多酚物質多存在于包括綠茶、紅茶和烏龍茶等多種傳統茶葉中,有多種生理活性作用,包括抗氧化、提高免疫力、抗炎和抗癌效果等[6-8]。有研究表明苦丁茶中多酚類物質包括羥基酪醇葡萄糖苷、綠原酸、4,5-O-二咖啡酰奎尼酸、3,5-O-二咖啡酰奎尼酸和3,4-O-二咖啡酰奎尼酸等綠原酸及其衍生物[9],與傳統綠茶、紅茶中含兒茶素類化合物等多酚物質有明顯差異,因此苦丁茶的生理活性作用也可能與綠茶等傳統茶葉有一定差異。部分研究對苦丁茶多酚物質的基礎生活活性作用進行了研究,證實苦丁茶多酚具有一定的抗氧化功效[10-11]。同時基礎實驗證明,多種食品的多酚提取物對結腸炎有一定的生理活性作用[12-13]。因此,本研究利用實驗動物模型觀察苦丁茶多酚物質對化學誘導的潰瘍性結腸炎的預防效果,并通過包括分子生物學實驗手段對作用機制進行初步分析,實驗結果將有助于推動苦丁茶多酚物質功能性作用的研究,積累一定理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

苦丁茶 安國市祁珍養生食品有限公司出產野生苦丁茶,由重慶食品工業研究所馮璨高級工程師鑒定為真品。

DSS(葡聚糖硫酸鈉) 美國MPBIO公司;MPO、GSH、MDA、SOD測定試劑盒 南京建成生物工程研究所;IL-6、IL-12、TNF-α血清細胞因子測定試劑盒 美國BioLegend公司;CycleTESTTM PLUS DNA染色試劑盒 德國Becton Dickinson公司;Trizol試劑、oligodT18、RNase、dNTP 和MLV 美國Invitrogen公司;RT-PCR引物TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、CXCR2 天根生化科技有限公司;Folin-Ciocalteu 試劑、綠原酸標準品 美國Sigma公司;其余試劑均為國產分析純；雄性6周齡SPF級C57BL/6J小鼠64只(體重20～25 g) 重慶醫科大學動物實驗中心,動物許可證號:SCXK(渝)2012-0001。

Biomate3S紫外可見光分光光度儀、A200PCR儀、LUX多功能性酶標儀 美國Thermo Fisher Scientific公司;Tancon2500PCR凝膠成像儀 上海天能科技有限公司;ICEN-24R高速冷凍離心機 杭州奧盛儀器有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 苦丁茶多酚物質的提取 按文獻[14]方法,稱取50 g打碎成粉的苦丁茶樣品,加入50 mL的45%(體積比)的乙醇溶液,90 ℃下浸提30 min,重復1次浸提后合并2次浸提液后調節提取液的pH至6.0,然后加入80 mL的AlCl3(3 g)和ZnCl2(6 g)混合沉淀劑進行沉淀,接著對混合液進行離心分離(3000 r/min、10 min),將100 mL鹽酸(12%,體積比)加入收集到的沉淀中轉溶,分離出上清液,分別2次加入100 mL乙酸乙酯進行萃取。最后對萃取液進行旋轉蒸發得到苦丁茶粗多酚提取物(KTCP)。

1.2.2 苦丁茶多酚物質的測定 將綠原酸溶于蒸餾水中配制成綠原酸原液,然后稀釋綠原酸原液得到不同濃度的綠原酸溶液,按Folin-Ciocalteu比色法在1 mL不同濃度的綠原酸溶液中加入3 mL的Folin-Ciocalteu顯色劑和4.5 mL的飽和Na2CO3溶液后定容至25 mL。去顯色后的溶液在747 nm處測定吸光度值,以吸光度值為X軸坐標,綠原酸溶液濃度為Y軸坐標繪制綠原酸標準濃度。將KTCP溶解于蒸餾水中采用以上的方法測定吸光度值后對照標準曲線求得苦丁茶粗多酚的含量[3]。

1.2.3 動物實驗 C57BL/6J小鼠適應環境飼養一周后將體重為(25±2) g的C57BL/6J小鼠分為5組,分別是正常組、對照組、苦丁茶多酚低濃度組和苦丁茶多酚高濃度組,每組16只。正常組小鼠在整個實驗過程中不進行樣品處理,維持正常飼養;對照組小鼠在前14 d內不進行樣品處理,維持正常飼養,從15 d開始小鼠飲水更換為含有DSS(3%,質量分數)的飲水;苦丁茶多酚低濃度組高濃度小鼠實驗開始后每天按25和50 mg/kg苦丁茶多酚對小鼠實施灌胃一次,苦丁茶多酚灌胃實施14 d后小鼠飲水更換為含有DSS(3%)的飲水,整個實驗在第22 d對全部小鼠進行斷頸處死,采用動脈取血收集血漿,并收集小鼠結腸部分,對結腸的重量和長度進行測量[14]。同時對DAI進行測定,

1.2.4 小鼠結腸組織中MPO、GSH、MDA含量的測定 在洗凈的小鼠結腸中加入9倍質量的生理鹽水,采用超聲粉碎將結腸組織勻漿,然后按試劑盒說明書對小鼠結腸組織中MPO、GSH、MDA的含量進行測定。

1.2.5 小鼠血清中SOD含量的測定 解剖小鼠后將收集到的小鼠血漿放置1 h后進行離心分離(4000 r/min、10 min),取上層血清按試劑盒說明書對小鼠血清中的SOD含量進行測定。

1.2.6 小鼠血清炎癥相關細胞因子的測定 取小鼠血清采用ELISA法按試劑盒說明書測定小鼠血清中的IL-6、IL-12和TNF-α細胞因子含量。

1.2.7 RT-PCR法測定結腸組織相關表達 取小鼠的結腸組織粉碎后用RNAzol提取結腸組織的總RNA,然后將總RNA濃度稀釋到1 μg/μL。取2 μL稀釋后的總RNA提取液,在其中依次加入1 μL的oligodT18、RNase、dNTP、MLV酶和10 μL的5×buffer,在條件37 ℃ 120 min,99 ℃ 4 min,4 ℃ 3 min合成cDNA。然后以反轉錄-聚合酶鏈反應法擴增TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和CXCR2的mRNA表達,同時以持家基因GAPDH作為內參照按同樣條件進行擴增。最后用含溴化乙錠瓊脂(1%濃度)電泳檢查PCR擴增產物,并用Image1.44軟件進行半定量分析[15]。

1.3 數據統計

實驗重復三次后將三次平行實驗結果取平均值,然后使用SAS9.1統計軟件采用one-way ANOVA方法分析各組數據在p<0.05 水平上相互是否具有顯著差異。

圖2 苦丁茶粗多酚對小鼠體重(A)、DAI(B)、結腸長度(C)和結腸重量/結腸長度比值(D)的影響(DSS誘導小鼠潰瘍性結腸炎開始)Fig.2 The Influence of KTCP(Kuding tea crude polyphenol)on mice body(A),DAI(B),colon length(C) and colon weight/colon length(D)of mice(from DSS induced ulcerative colitis)注:不同字母表示各組數據平均值顯著性差異(p<0.05),圖3～圖5和表1、表2同。

2 結果與分析

2.1 苦丁茶粗多酚中的多酚物質含量

通過對綠原酸標準品吸光度的測定繪制出標準曲線為Y=217.4X-1.611(R2=0.998,Y為綠原酸含量,X為吸光度值)(圖1),對照綠原酸標準曲線可計算出KTCP中多酚物質的含量達到63.1%(綠原酸計)。實驗結果證明KTCP中的多酚物質含量較高,后續動物實驗中起到關鍵作用的物質是苦丁茶多酚類物質。

圖1 綠原酸標準曲線Fig.1 The standard curve of chlorogenic acid

2.2 苦丁茶粗多酚對結腸炎癥狀的影響

相對于正常組小鼠,DSS誘導結腸炎的對照組小鼠從DSS誘導開始體重下降,KTCP可以緩解DSS造成的小鼠體重下降,其中高濃度的KTCP(50 mg/kg)比低濃度的KTCP(50 mg/kg)具有更強的體重下降緩解效果(圖2A)。潰瘍性結腸炎患者常出現體重減輕、腹瀉、出血等癥狀,DAI可以作為評價潰瘍性結腸炎的標準[16],DSS小鼠潰瘍性結腸炎模型小鼠也出現相似的癥狀,本實驗中對照組小鼠的體重下降最多,同時對照組小鼠均出現出血癥狀,KTCP緩解了小鼠體重下降,同時出現出血癥狀的小鼠數量也大大下降。DAI指數顯示KTCP可以大幅度降低DSS造成的潰瘍性結腸炎癥狀(圖2B),起到預防潰瘍性結腸炎的作用。結腸長度和結腸重量/結腸長度的比值也是評價潰瘍性結腸炎的重要指標,結腸長度縮短和結腸重量/結腸長度比值的增加都是潰瘍性結腸炎加重的標志[14]。本實驗中正常組小鼠的結腸長度最長,結腸重量/結腸長度比值最短(圖2C);對照組小鼠表現出相反的趨勢;KTCP能使結腸炎小鼠結腸長度和結腸重量/結腸長度的比值接近于正常組小鼠(圖2D),50 mg/kg KTCP組小鼠的結腸長度和結腸重量/結腸長度的比值更接近于正常組小鼠。

表1 苦丁茶粗多酚對小鼠結腸組織MPO、GSH、MDA含量的影響

表2 苦丁茶粗多酚對小鼠血清細胞因子IL-6、IL-12和TNF-α水平的影響

2.3 苦丁茶粗多酚對小鼠結腸組織MPO、GSH和MDA含量的影響

由表1可知,對照組小鼠結腸組織中的MPO和MDA含量比其他各組小鼠都高,GSH含量最低;正常組小鼠則表現出相反的趨勢,MPO和MDA含量表現出最低的含量,GSH含量最高。KTCP可以顯著(p<0.05)降低對照組小鼠的MPO、MDA含量和增加GSH含量,50 mg/kg濃度KTCP處理的小鼠的MPO、GSH和MDA含量比25 mg/kg濃度KTCP處理小鼠更接近于正常組小鼠。髓過氧化物酶(MPO)能在中性粒細胞中大量表達,在單核細胞和某些類型的巨噬細胞中的表達程度較輕,結腸中大量出現MPO表示中性粒細胞內流進入結腸組織,MPO活性降低是發炎組織中中性粒細胞聚集降低的表現[17]。DSS誘導結腸炎的一個表現就是結腸組織出現白細胞浸潤,白細胞浸潤是活性氧(ROS)和活性氮(RNS)的重要產生原因,ROS和RNS均是造成細胞損傷的細胞毒性劑[18]。結腸中過量的ROS將破壞組織中氧化/抗氧化平衡,從而增加脂質過氧化和降低結腸中GSH的含量,MDA則是脂質過氧化的終產物[19]。因此降低MPO、MDA含量和增加GSH含量均可以起到抑制結腸炎的作用,本研究中KTCP具有以上的效果,能夠發揮實驗潰瘍性結腸炎的預防作用。

2.4 苦丁茶粗多酚對小鼠血清SOD含量的影響

通過對小鼠血清的分析可知(圖3),正常組小鼠的SOD含量最高((66.3±3.2) U/mL),對照組小鼠的SOD含量最低((28.7±0.7) U/mL);相對對照組,KTCP可以顯著提高DSS誘導結腸炎小鼠的SOD含量,25和50 mg/kg處理小鼠的SOD含量分別為(42.8±2.2)、(53.6±2.8) U/mL。在正常體細胞中,SOD保護自由基引發的組織損傷,抑制體內SOD的降低可以有效地緩解機體的損傷[20]。從實驗結果可以看出KTCP可以顯著地緩解由于DSS誘導結腸炎造成的SOD含量下降,起到保護機體的作用。

圖3 苦丁茶粗多酚對小鼠血清SOD含量的影響Fig.3 The influence of serum KTCP (Kuding tea crude polyphenol)on SOD of mice

2.5 苦丁茶粗多酚對小鼠血清細胞因子IL-6、IL-12和TNF-α水平的影響

由表2可知,25和50 mg/kg濃度KTCP處理小鼠血清的IL-6、IL-12和TNF-α細胞因子水平顯著低于對照組(p<0.05),50 mg/kg濃度KTCP處理小鼠血清的細胞因子水平僅高于正常組。促炎性細胞因子IL-6、IL-12和TNF-α可以增強炎癥癥狀,導致潰瘍性結腸炎患者結腸組織損傷,抑制促炎性細胞因子的水平可以起到抑制炎癥的作用[21]。KTCP可以起到降低細胞因子IL-6、IL-12和TNF-α水平的作用從而達到預防潰瘍性結腸炎的作用。

2.6 苦丁茶粗多酚對小鼠結腸組織TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表達的影響

由圖4可以看出,相對于對照組小鼠結腸組織,KTCP可以顯著下調結腸炎小鼠結腸組織中TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表達,并且50 mg/kg濃度KTCP可以使結腸炎小鼠的表達更接近正常組小鼠。TNF-α、IL-1β和IL-6均是潰瘍性結腸炎發展中的關鍵因子,炎癥患者體內的TNF-α水平較正常人更高[14];IL-1β能刺激腹瀉和減少抑炎因子進入結腸,從而促進潰瘍性結腸炎的發展[22];IL-6是受到炎癥刺激后在體內產生的因子,可以加劇結腸炎的程度[23]。通過PT-PCR實驗顯示,KTCP可以有效地降低結腸組織中TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表達,起到預防潰瘍性結腸炎的作用,并且高濃度的KTCP效果更好。

圖4 苦丁茶粗多酚對小鼠結腸組織TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表達的作用(A)及半定量分析(B)Fig.4 Effects of TNF-α,IL-1β and IL-6 mRNA of KTCP(Kuding tea crude polyphenol) on colon tissue of mice(A)and semi-quantitative analysis(B)

2.7 苦丁茶粗多酚對小鼠結腸組織CXCR2和IL-8 mRNA表達的影響

結果顯示，正常組小鼠結腸組織中的CXCR2和IL-8表達僅為對照組小鼠的0.7%和4.9%(圖5),25 mg/kg濃度KTCP作用下表達為對照組小鼠的29.7%和78.5%,50 mg/kg濃度KTCP的作用可以使CXCR2和IL-8的表達更為接近正常組小鼠,僅為對照組小鼠的16.5%和68.6%。機體出現炎癥后體內的趨化因子受體及配體會出現大量表達[24],其中趨化因子受體CXCR2是一種非常重要的腸道疾病關聯因子,在急性炎癥中,趨化因子通過氨基葡聚糖的作用能夠大量集中在內皮細胞表面,通過與相應的趨化因子受體結合,使內皮細胞大量釋放促炎細胞因子,加劇炎癥[25]。CXCR2與其配體IL-8結合后可引起中性粒細胞的遷移和大量增加,從而加劇組織損傷,使潰瘍性結腸炎加劇[26]。KTCP可以有效的降低CXCR2和IL-8在結腸中的mRNA表達,從而達到預防潰瘍性結腸炎的目的。

圖5 苦丁茶粗多酚對小鼠結腸組織CXCR2和IL-8 mRNA表達的作用(A)及半定量分析(B)Fig.5 Effects of CXCR2 and IL-8 mRNA of KTCP (Kuding tea crude polyphenol)on colon tissue of mice(A)and semi-quantitative analysis(B)

3 結論

本研究通過建立DSS化學誘導潰瘍性結腸炎動物模型來觀察苦丁茶粗多酚(KTCP)對潰瘍性結腸炎的預防效果。在實驗過程中發現KTCP可以抑制結腸炎造成的小鼠體重下降、DAI增高和控制DSS造成的結腸長度縮短、結腸重量/結腸長度比值降低。通過對小鼠血清的實驗也進一步表明KTCP可以增加結腸炎小鼠血清中SOD的含量,降低促炎細胞因子IL-6、IL-12和TNF-α的水平。對小鼠結腸組織的分析也表明,KTCP可以提高結腸炎小鼠結腸組織中GSH的含量、降低MPO、MDA的含量;同時下調結腸組織中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和CXCR2的mRNA表達。通過以上的作用KTCP可以起到對DSS誘導潰瘍性結腸炎的預防效果,并且KTCP的作用呈濃度依賴,濃度越高,對潰瘍性結腸炎的預防效果越好。

[1]葉國盛. 苦丁茶[J]. 特種經濟動植物,2002,5(3):26.

[2]沈強,司輝清,于洋. 苦丁茶化學成分研究進展[J]. 茶業通報,2010,32(1):21-24.

[3]劉麗香,Tanguy Laura,梁興飛,等. Folin-Ciocalteu比色法測定苦丁茶中多酚含量[J]. 茶葉科學,2008,28(2):101-106.

[4]汪蕓,崔丁鹿. 潰瘍性結腸炎脾胃氣虛證的研究進展[J]. 現代中西醫結合雜志,2015,24(25):2845-2847.

[5]鄭紅斌. 潰瘍性結腸炎全球發病情況比較[J]. 中華消化雜志,2001,21(4):242-243.

[6]鄭笑男. 茶多酚抗氧化功能及保護實驗性肝損傷作用的研究進展[J]. 臨床合理用藥雜志,2011,15(4):126-128.

[7]龔裕強,李雷清,施小燕. 茶多酚抗炎作用研究進展[J]. 中國急救醫學,2006,26(7):540-542.

[8]廖系晗,金翠蘭. 茶多酚及其抗癌機理的研究進展[J]. 時珍國醫國藥,2006,17(9):1783-1785.

[9]孫怡,張鑫,張文芹,等. 苦丁茶冬青苦丁茶中多酚類物質的分離純化與結構解析[J]. 食品科學,2011,32(11):60-63.

[10]劉佳,焦士蓉,唐遠謀,等. 苦丁茶多酚的提取及抗氧化活性[J]. 食品科學,2011,32(14):134-138.

[11]劉麗香,梁興飛,孫怡,等. 苦丁茶提取物多酚含量與抗氧化活性的測定[J]. 茶葉科學,2008,28(4):289-293.

[12]張燕,張紅,迪麗胡瑪爾,等. 新疆石榴皮多酚對實驗性結腸炎的藥效學研究[J]. 中國民族民間醫藥,2011,20(6):16-18.

[13]王雨楠,努爾迪達,迪麗達爾,等. 葡萄籽多酚對DSS誘導的小鼠潰瘍性結腸炎的抑制作用[A]. 第十五屆中國中西醫結合學會微循環專業委員會暨第二屆中國微循環學會痰瘀專業委員會學術會議資料匯編[C],北京:中國中西醫結合學會,2015:15.

[14]Song J L,Qian Y,Li G J.Anti-inflammatory effects of kudingcha methanol extract(Ilex kudingcha C.J. Tseng)in dextran sulfate sodium-induced ulcerative colitis[J]. Molecular Medicine Reports,2013,8(4):1256-1262.

[15]馮霞,趙欣. 不同容器發酵水豆豉預防CCl4誘導肝損傷的研究[J]. 現代食品科技,2016,37(7):338-342.

[16]Strober W,Fuss Ij,Blumberg R S. The immunology of mucosal models of inflammation[J]. Annual Review of Immunology,2002,20:495-549.

[17]Mustafa A,El-Medany A,Hagar H H,et al. Ginkgo biloba attenuates mucosal damage in a rat model of ulcerative colitis[J]. Pharmacological Research,2006,53(4):324-330.

[18]Osman N,Adawi D,Ahrné S,et al. Probiotics and blueberry attenuate the severity of dextran sulfate sodium(DSS)-induced colitis[J]. Digesrive Disease and Sciences,2008,53(9):2464-2473.

[19]FIOCCHI C. Inflammatory bowel disease:new insights into mechanisms of inflammation and increasingly customized approaches to diagnosis and therapy[J]. Current Opinion in Gastroenterology,2004,20(4):309-310.

[20]Alscher R G,Erturk N,Heath L S. Role of superoxide dismutases(SODs)in controlling oxidative stress in plants[J]. Journal of Experimental Botany,2002,53(372):1331-1341.

[21]Hyams J,Damaraju L,Blank M. Induction and maintenance therapy with infliximab for children with moderate to severe ulcerative colitis[J]. Clinical Gastroenterology and Hepatology,2012,10(4):391-399.

[22]Dionne S,D’agata Id,Hiscott J,et al. Colonic explant production of IL-1and its receptor antagonist is imbalanced in inflammatory bowel disease(IBD)[J]. Clinical and Experimental Immunology,1998,112(3):435-442.

[23]Papadakis K A,Targan S R. Role of cytokines in the pathogenesis of inflammatory bowel disease[J]. Annual Review of Medicine,2000,51:289-298.

[24]崔曼莉,張明鑫,張超,等. 腫瘤相關性炎癥與結腸癌[J]. 世界華人消化雜志,2016,24(32):4343-4353.

[25]Akcay A,Nguyen Q,Edelstein C L. Mediators of inflammation in acute kidney injury[J]. Mediators of Inflammation,2009,2009(2):137072.

[26]胡婉明,王俊普,李景和. 趨化因子受體CXCR1、CXCR2與腫瘤研究進展[J]. 現代生物醫學進展,2012,12(32):6389-6392.

Preventive effects of Kuding tea crude polyphenols in DSS-induced C57BL/6J mice ulcerative colitis

ZHAO Xin,QIAN Yu*

(Chongqing Collaborative Innovation Center for Functional Food;Chongqing Engineering Research Center of Functional Food;Chongqing Engineering Laboratory for Research and Development of Functional Food; Department of Biological and Chemical Engineering,Chongqing University of Education,Chongqing 400067,China)

Objective:The preventive effects of Kuding tea crude polyphenol(KTCP)on ulcerative colitis were determined through the DSS(Dextran sulfate sodium salt)-induced ulcerative colitis(UC)animal model in this study. Method:Experiment kits were used for the mice serum determination,meanwhile,the mRNA of mice colon tissue were determined by RT-PCR assay. Results:The animal experiment results showed that KTCP could control the UC caused mice body weight reduction and DAI(disease activity index)raise. Meantime,KTCP also could control the UC caused colon length shortening and colon ratio of weight/colon length reduction. After dissection,the serum and tissue of mice were experimentalized,it was observed that KTCP could increase the content of SOD(superoxide dismutase)in serum,decrease the cytokine levels of IL-6(interleukin-6),IL-12(interleukin-12)and TNF-α(tumor necrosis factor alpha). And it was also observed that KTCP could reduce the MPO(myeloperoxidase),MDA(malondialdehyde)contents and raise the GSH(glutathione)content in colon tissues. RT-PCR experiment results showed that KTCP could decrease the TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-8 and CXCR2 mRNA in colon tissues compared to the control group mice. Meanwhile high concentration of KTCP could make the experiment index close to the normal group mice,and showed the better activities. Conclusion:As can be seen,KTCP had a good preventive effects of UC.

Kuding tea;polyphenol;ulcerative colitis;chemokine receptor;expression

2016-12-06

趙欣(1981-)，男，博士，教授，研究方向：食品營養和功能性食品，E-mail:zhaoxin@cque.edu.cn。

*通訊作者:騫宇(1976-)，女，博士，副教授，研究方向：食品營養和功能性食品，E-mail:qianyubaby@126.com。

重慶高校創新團隊建設計劃自助項目(CXTD201601040);重慶第二師范學院引進高層次人才項目(2013BSRC01)；重慶市工程技術研究中心建設項目(cstc2015yfpt_gcjsyjzx0027)。

TS201.4

A

1002-0306(2017)09-0357-06

10.13386/j.issn1002-0306.2017.09.061