Survivin和Smac在乳腺癌中的表達及臨床意義*

劉兆華，盧思英，張振濤

(1.廊坊衛生職業學院護理系，河北廊坊 065000；2.承德護理職業學院護理系，河北承德 067000；3.河北省廊坊市人民醫院醫務科 065000)

Survivin和Smac在乳腺癌中的表達及臨床意義*

劉兆華1，盧思英2△，張振濤3

(1.廊坊衛生職業學院護理系，河北廊坊 065000；2.承德護理職業學院護理系，河北承德 067000；3.河北省廊坊市人民醫院醫務科 065000)

目的 探討Survivin、Smac在乳腺癌中的表達及臨床意義。方法 采用免疫組織化學法檢測Survivin蛋白和Smac蛋白在88例乳腺癌組織和32例遠端正常組織中的表達水平，分析其表達與乳腺癌的關系以及二者之間的相關性。結果 Survivin、Smac在乳腺癌組織中的陽性表達率分別為71.59%、55.68%，Survivin、Smac在癌旁正常乳腺組織中的陽性表達率分別為6.25%、84.28%，比較差異均有統計學意義(P<0.05)；Smac的陽性表達、Survivin的陽性表達與乳腺癌患者腫瘤的臨床分期、病理分級、淋巴結轉移相關(P<0.05)，與患者的年齡及腫瘤大小無明顯相關性(P>0.05)。Survivin、Smac二者的表達呈負相關(r=-0.410，P<0.05)。結論 Smac、Survivin與乳腺癌的發生、發展有關，可作為判斷乳腺癌生物學行為的重要指標，聯合檢測能更好地判斷乳腺癌的預后。

乳腺腫瘤；免疫組織化學；Survivin；Smac

近年來，我國乳腺癌發病率明顯升高，且有年輕化的趨勢[1]。本研究試圖用免疫組織化學SP法檢測Survivin蛋白和Smac蛋白在乳腺癌中表達情況，以尋找乳腺癌新的有效的檢測分子，為乳腺癌的臨床診斷治療，以及預后的判斷提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取廊坊市人民醫院腫瘤外科在2011-2012年中手術切除并已全部確診為乳腺癌的組織標本88例，來源均為女性患者，年齡32～83歲，平均(52.5±6.2) 歲。腫瘤直徑為0.5～9.0 cm。臨床分期Ⅰ～Ⅱ期52例，Ⅲ～Ⅳ 36例；病理分級Ⅰ～Ⅱ級59例，Ⅲ級29例；淋巴有轉移者56例，淋巴無轉移者32例。選取遠端正常組織(癌灶>10 cm)32例，年齡39～77歲，平均(56.3±5.0)歲。患者均為首次發現腫瘤，術前未做過放、化療和內分泌方面的治療。選取的所有標本的病理診斷均由兩名高年資病理科醫師給出。本研究患者均知情同意。

1.2 主要試劑 Survivin兔抗人單克隆抗體和Smac兔抗人多克隆抗體購于北京BIOSS生物技術公司；二氨基聯苯胺(DAB)顯色試劑盒，兔免疫組織化學試劑盒購于北京中杉金橋生物技術公司。

1.3 方法 所有手術切除標本(均經病理證實為癌浸潤)及癌旁正常組織均使用10%甲醛溶液固定，制作石蠟切片并連續切成若干張厚4 μm的切片，分別進行蘇木精-伊紅(HE)染色，Smac免疫組織化學染色和Survivin免疫組織化學染色。一抗分別使用Smac 兔抗人多克隆抗體(1∶100)、Survivin兔抗人單克隆抗體(1∶60)?？乖迯途捎梦⒉ㄐ迯?。用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作陰性對照，用已知的Survivin蛋白陽性的乳腺癌組織和Smac蛋白陽性的心肌組織為對應的陽性對照。

1.4 結果判斷 參照許良中等[2]免疫組織化學結果的判斷標準，在光學顯微鏡下(×100)每張切片選10個視野進行觀察，計數各視野中癌細胞的染色情況，采用半定量計數方法判定結果。(1)染色強度：無色為0分，淡黃色為1分，黃色為2分，棕黃色或褐色為3分；(2)陽性細胞所占的比例：陰性為0分，陽性細胞(≤10%)為1分，陽性細胞(10%～50%)為2分，陽性細胞(>50%～75%)為3分，陽性細胞(>75%)為4分。判斷標準a為染色強度分值×陽性細胞比例分值,a<3分為陰性(-)；a≥3分為陽性(+)，兩名高年資病理科醫生雙盲讀片判定以上結果。

1.5 統計學處理 采用SPSS17.0版統計軟件，計數資料用率表示，組間采用χ2檢驗，Smac和Survivin表達的相關性采用Spearman等級相關分析，檢驗水準α=0.05，P<0.05差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 Survivin、Smac在乳腺癌組織和正常組織中表達的差異 癌組織中Survivin陽性表達率為71.59%，正常組織中Survivin的陽性表達率6.25%，癌組織中的表達率高于正常組織，比較差異有統計學意義(χ2=40.356，P<0.05)；癌組織中Smac陽性表達率為55.68%，正常組織中Smac陽性表達率84.38%，癌組織中的表達率低于正常組織，比較差異有統計學意義(χ2=8.320，P<0.05)。

2.2 Survivin、Smac的表達與臨床病理特征的關系 Survivin陽性表達率的升高與乳腺癌病理分級、臨床分期的提高呈正相關，比較差異有統計學意義(P<0.05)，而乳腺癌中Smac蛋白的表達與之相反；有淋巴結轉移者Survivin的陽性表達率高于無淋巴結轉移者，比較差異有統計學意義(P<0.05)。有淋巴結轉移者Smac陽性表達率低于無淋巴結轉移者，比較差異有統計學意義(P<0.05)；乳腺癌中Survivin和Smac的表達與患者年齡、腫瘤大小無關(P>0.05)，見表1。

表1 Survivin、Smac在乳腺癌中的表達與臨床病理特征間的關系[n(%)]

2.3 Survivin與Smac在乳腺癌中表達的相關性 乳腺癌中Survivin蛋白與Smac蛋白的表達呈負相關(r=-0.410，P<0.05)，見表2。

3 討 論

Survivin基因是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的成員之一，研究顯示，在乳腺癌組織中，Survivin的陽性表達率高于遠端正常組織[3-5]，提示Survivin的高表達可能與乳腺癌的發生、發展有關。本研究結果顯示，Survivin在乳腺癌組織中的陽性表達率高于在遠端正常組織中的陽性表達率，與上述文獻報道結果類似。此外，在乳腺癌不同病理分級中，Survivin表達不同，在Ⅰ～Ⅱ級的乳腺癌中的陽性表達率低于在Ⅲ級的乳腺癌的陽性表達率。Survivin在乳腺癌不同臨床分期中的表達也不相同，Ⅰ～Ⅱ期中的Survivin的陽性表達率低于Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌的陽性表達率，這提示Survivin在乳腺癌中的表達與腫瘤病理分級和臨床分期的有關，腫瘤細胞的惡性程度越高，Survivin的表達越高，預后越不佳，與耿聃等[6]的研究結果相似。乳腺癌有淋巴結轉移組Survivin的陽性率明顯高于無淋巴結轉移組，由此可以推斷，Survivin的表達越高越容易發生淋巴轉移，與Al-Joudi等[7]、Tsai等[8]的研究報道結果類似。

Smac是一種新型線粒體促凋亡蛋白，由Du等[9]在2000年時從Hela細胞分離出來的，有研究表明該蛋白能中和或拮抗一種或幾種凋亡抑制蛋白(IAP)家族成員，對腫瘤細胞有促凋亡作用。有研究顯示，Smac在正常乳腺組織中的表達高于在乳腺浸潤性導管癌組織中的表達[10-12]，本研究也得出相似的結果。另外，本研究顯示Smac的表達與乳腺癌病理分級、臨床分期呈負相關，在無淋巴轉移組織中高表達，可推測Smac通過促腫瘤細胞凋亡參與乳腺癌的發生、發展，Smac的表達水平越低，腫瘤的惡性程度越高，預后不良，易發生淋巴結轉移。

本研究結果顯示，乳腺癌中Survivin與Smac表達的負相關可推測二者存在負反饋調節作用或拮抗作用，Smac表達的降低可引起Survivin表達的升高，抑制了腫瘤細胞凋亡，促進了腫瘤的發生、發展及惡性增殖。

綜上所述，乳腺癌的發生、發展是復雜病理過程，與許多因素有關。從不同系腫瘤組織研究中能看出Survivin、Smac在癌細胞的發生、發展中有著非常重要的作用。

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[11]杜寧，李保衛，趙宇輝，等．Smac/DIABLO與Livin在乳腺癌組織表達及其臨床意義[J]．現代腫瘤醫學，2011，19(11)：2236-2238．

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驗交流·

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.14.031

廊坊市科學技術研究與發展計劃項目(2013013019C)。 作者簡介：劉兆華(1979-)，碩士，講師，主要從事護理及病理方面研究?！?/p>

，E-mail：bellbird3301@163.com。

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1671-8348(2017)14-1966-02

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