頂果木組培芽苗生根培養基的優化探究

曾建英

摘 要 頂果木為中國特有種，屬國家重點保護植物。為促進頂果木的推廣種植，優化頂果木組培芽苗的生根培養基，探討了外植體材料的采集與消毒、芽的誘導分化、繼代增殖培養及組培苗的生根培養等方面對頂果木生根成活的影響及其最優組合，旨在為建立頂果木優良無性系繁殖體系打下良好的基礎。

關鍵詞 頂果木；組織培養；生根培養基；優化

中圖分類號：S792.99 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2017.03.060

頂果木又名頂果樹，不同的地方有不同的叫法，別名有毛榔、白椿等，頂果木屬于蘇木科高大落葉喬木，其外形高大通直，木材能夠久藏，可制家具和裝修用料；樹頂和枝丫含有豐富的木纖維素，可用作纖維板和紙張的制作材料；頂果樹開花鮮艷，可以用作行道樹裝飾街景作為風景樹。近年來，頂果樹作為珍貴樹種，受到越來越多的人的重視和了解，社會對頂果樹的需求量也逐漸增加，但由于頂果樹稀少，已被國家列為三級保護樹種，頂果樹的種子育苗數量也逐漸受到限制。為了解決頂果樹稀少這一問題，發展頂果樹的繁殖培養技術是主要途徑。

1 材料與方法

1.1 材料

研究材料為頂果木的幼嫩葉芽，選取頂果木的幼苗進行萌芽促生。任意選取頂果木的一段枝干，并截取30 cm，將截取出來的頂果木枝干上的葉芽作為外植體培養物。

1.2 方法

1.2.1 外植體采集方式

任意剪取頂果木上一段枝干，將枝干上葉片剪除，留取枝干上新生萌芽，清洗干凈后剪取新生萌芽約1.5～2.0 cm作為外植體，采集60棵外植體，并將外植體放置在干凈器皿上等待消毒。

1.2.2 頂果木外植體消毒

外植體的消毒方式主要選用3種，將60棵外植體均分3組，分別按照以下方式消毒：（1）將過氧化氫稀釋成含量為10%的消毒水，消毒外植體8 min；（2）將酒精稀釋成含量為70%的消毒水，用來消毒外植體10 s，隨后再用第一種消毒方式消毒5 min；（3）采用含量0.1%的氯化汞稀釋液，添加2、3滴混合液消毒外植體6 min。60棵外植體消毒完畢之后再采用無菌清水清洗3到5次，并采用濾紙吸干外植體上附著水滴。最后將60棵外植體接種在1/2 MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA誘導培養基中。

1.2.3 外植體誘導分化

60棵（三組）外植體分別經過3種消毒方式后接種在培養基上，并將外植體均分2份，分別采[1]用全光照或暗培養的培養方式進行頂果樹幼芽誘導分化。其中，暗培養誘導分化先進行7 d的暗培養，隨后進行全光培養。3組外植體均培養30 d，隨后觀察記錄外植體的生長情況。頂果樹外植體材料經過消毒和芽誘導分化后的結果見表1。

1.2.4 外植體增殖培養和生根培養

1.2.4.1 外植體增殖培養方式

將誘導成功的外植體分別接種在三種培養基上（6-BA、KT、NAA三種培養基）[2]，培養溫度和光照條件分別設置為25～30 ℃和8～10h/d。

1.2.4.2 外植體生根培養方式

增殖外植體苗芽后進行生根培養，共選用三種生根培養基（NAA、IBA、6-BA）。

外植體的增殖培養和生根培養均采用正交設計方法，兩種培養方式因子與水平見表2。

2 結果與分析

2.1 外植體消毒與誘導分化統計結果

由本次試驗可知，在3種消毒方式對比中，以第二種消毒方式最佳，即：先70%酒精消毒10 s，再用10%的過氧化氫消毒5 min；3種光照培養方式中以暗培養+全光培養的誘導方式最好。經統計，外植體平均消毒成功率和平均誘導成功率分別為80.0%和55.2%。

2.2 頂果樹芽的繼代增殖培養統計結果

外植體繼代增殖培養40 d后試驗結果見表3。由表3可知：在4種試驗因子中，序號2和序號4的因子增殖系數極差最大，分別為0.8和0.7，由此可知，序號2和序號4是重要因子。結合正交試驗，可以得出4種較好的組合水平。分別為：A組合（MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA）；B組合（MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.4mg/L NAA）；C組合（MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA）；D組合（MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.4mg/L NAA）。

按以上4種組合配制培養基又做了一次輔助試驗，結果表明A、B、C、D組合對應繁殖系數為3.2、3.6、2.8和2.4。由此可知，A組合的增殖效果較好。

2.3 組培苗的生根培養統計結果

外植體增殖之后進行生根試驗培養基培養[3]，外植體生根培養30d后進行正交試驗，正交試驗結果見表4。由表4可知，在1-4序號中，第4序號極差較大，表明這一因子是外植體的主要調節因子。結合正交試驗，可以得知四種較好的正交組合，分別為：E組合（1/2MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L IBA+0.1mg/L 6-BA）；F組合（1/2MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L IBA+0.3mg/L 6-BA）；G組合（1/2MS+0.5mg/L NAA+1.0mg/L IBA+0.1mg/L 6-BA）；H組合（1/2MS+0.5mg/L NAA+1.0mg/L IBA+0.3mg/L 6-BA）。

以上E、F、G、H四種組合的生根培養基生根概率分別為0.62%、0.82%、0.65%、0.58%，由此可知，F組合的生根率最佳。

3 結論

當前我國在推廣頂果樹種植中，培育良種和育苗是急需解決的問題。為了保障頂果樹的育苗數量和生長質量，本文進行了培養試驗，將頂果樹的葉芽作為外植體，總結一種頂果樹的組織培養繁殖技術。試驗結果表明，在外植體3種消毒方式對比中，以第二種消毒方式最佳，即70%酒精+10%的過氧化氫消毒方式；在3種誘導分化對比中，以暗培養7 d+全光培養的方式最佳；在繼代增殖培養和生根培養試驗中，兩者的最佳培養基組合分別為A組合和F組合，兩者的增殖系數和生根率可達到3.6和82%。

參考文獻

[1]黎素平，朱昌叁，廖英漢，等.頂果木扦插繁殖技術研究[J].林業實用技術，2011（10）：25-27.

[2]黎素平，郭耆，朱昌叁.頂果木高產栽培技術[J].現代農業科技，2011（14）：229-230.

[3]徐位力，許潮漩，林榮華.頂果木組培增殖培養基的優化[J].廣東林業科技.2014，30（4）：58-61.

（責任編輯：趙中正）