RGS20基因在Luminal型乳腺癌的表達(dá)及臨床病理特征相關(guān)性研究

李權(quán)　孫藝涵　蔡業(yè)豐

[摘要] 目的 探討RGS20基因表達(dá)與Luminal型乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系。 方法 利用癌癥基因組圖譜數(shù)據(jù)庫（TCGA數(shù)據(jù)庫）篩選出1023例乳腺癌病例和98例癌旁對(duì)照樣本，收集RGS20基因表達(dá)譜資料和臨床信息資料，分析RGS20基因表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的相關(guān)性及對(duì)預(yù)后的影響。結(jié)果 RGS20基因在不同乳腺癌分子分型中存在明顯的表達(dá)差異，其中在Luminal型乳腺癌為低表達(dá)，而在三陰性乳腺癌中為高表達(dá)。同時(shí)在Luminal型乳腺癌中，對(duì)RGS20基因表達(dá)水平與其臨床病理特征進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)RGS20基因表達(dá)水平與人種存在相關(guān)性（P<0.05），其在黑種人中表達(dá)最高。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)RGS20表達(dá)水平與ER受體水平存在密切相關(guān)（P<0.001），ER受體陽性組其RGS20為低表達(dá)。 結(jié)論 RGS20基因在Luminal型乳腺癌中表現(xiàn)為低表達(dá)，有別于其他類型的乳腺癌，且其表達(dá)水平與人種存在相關(guān)性，其中可能的機(jī)制是ER受體表達(dá)導(dǎo)致了RGS20基因的低表達(dá)，RGS20基因可能成為Luminal型乳腺癌的一個(gè)新的分子標(biāo)志物。

[關(guān)鍵詞] RGS20；乳腺癌；Luminal型乳腺癌；臨床病理特征

[中圖分類號(hào)] R737.9 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2016）36-0021-05

[Abstract] Objective To study the relationship between RGS20 gene expression and clinicopathological features of Luminal breast cancer， since the relationship between RGS20 and clinicopathological features of Luminal type breast cancer is not studied so far. Methods RGS20 gene expression and clinical information were collected by screening 1023 cases of breast cancer patients and 98 cases of paracancerous tissue samples in TCGA database. The correlation between RGS20 gene expression and clinicopathological features and prognosis of breast cancer was analyzed. Results The expression levels of RGS20 gene were significantly different in different molecular types of breast cancer， which was low in Luminal type breast cancer and high in triple negative breast cancer. the expression level of RGS20 gene and its clinicopathological features were analyzed in Luminal type breast cancer. The expression level of RGS20 gene was found statistically correlated with human race（P<0.05）， which was the highest among black people. Further analysis showed that RGS20 expression was closely related to ER receptor levels（P<0.001）， and ERGS-positive group had low RGS20 expression. Conclusion RGS20 gene is expressed in Luminal type breast cancer， which is different from other types of breast cancer， and its expression level is related to human race. The possible mechanism is that ER receptor expression leads to low expression of RGS20 gene. Therefore， RGS20 gene may become a new molecular marker of Luminal type breast cancer.

[Key words] RGS20； Breast cancer； Luminal type breast cancer； Clinicopathological features

乳腺癌是一種復(fù)雜異質(zhì)性疾病，在組織學(xué)形態(tài)、細(xì)胞起源、突變、轉(zhuǎn)移、疾病分級(jí)、治療反應(yīng)性及臨床表現(xiàn)等方面均有不同[1]。基于乳腺癌達(dá)分子表型，乳腺癌一般被分為3種亞型：Luminal型，Her-2多表達(dá)型，三陰性型乳腺癌。Luminal型乳腺癌是指雌激素受體陽性乳腺癌，約占所有乳腺癌的2/3。Lumina乳腺癌往往形態(tài)學(xué)上分化較好，與其它類型相比預(yù)后較好。

G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白（RGS蛋白）是一種Gα亞基GTP酶活性增敏劑，能使GTP酶活性增加100倍，突然中斷G蛋白信號(hào)，并對(duì)G蛋白耦聯(lián)受體（GPCRs）的生物學(xué)特征產(chǎn)生顯著的影響。G蛋白偶聯(lián)受體（GPCRS）家族是一種細(xì)胞表面受體，多項(xiàng)證據(jù)證明改變GPCRS的表達(dá)水平和活性能夠調(diào)節(jié)多種細(xì)胞功能比如細(xì)胞增殖、存活能力、運(yùn)動(dòng)性和腫瘤的生長、血管生成和轉(zhuǎn)移。RGS蛋白和GPCRS的結(jié)合具有高度選擇性，產(chǎn)生完全不同的分子作用。RGS蛋白在卵巢癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌等多種腫瘤中都有不同程度的表達(dá)，并作為一種致癌信號(hào)在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起到重要作用，至少有6種RGS蛋白（RGS2、4、10、16、17、19）參加細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)[2-5]。RGS20同屬于RZ/A家族，氨基末端區(qū)富含一串與膜附著有關(guān)的半胱氨酸基序，在大腦中高表達(dá)，尤其是尾狀核和顳葉。RGS20通常被認(rèn)為是Gαz選擇性GTP酶激活蛋白，同時(shí)也可以與Gαi亞基相互作用從而削弱細(xì)胞信號(hào)傳遞。RGS20自身并沒有致癌潛能，但是在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（NIH3T3）它通過增加致癌性的Rasgv引導(dǎo)腫瘤病灶形成，調(diào)節(jié)細(xì)胞聚集，運(yùn)動(dòng)性和侵襲能力促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)移。同時(shí)，RGS20在轉(zhuǎn)移黑色素瘤和轉(zhuǎn)移乳腺癌中高表達(dá)[6-8]。

目前，國內(nèi)外鮮有RGS20基因和乳腺癌的相關(guān)性研究，本研究旨在通過檢測(cè)RGS20基因在各類型乳腺癌組織中的表達(dá)，并探討RGS20與luminal型乳腺癌的臨床病理特征的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 TCGA數(shù)據(jù)庫分析

癌癥基因組圖譜（TCGA）數(shù)據(jù)庫是目前最大的癌癥生物信息數(shù)據(jù)庫，包含了大量的生物醫(yī)學(xué)信息，我們從中選取乳腺癌患者的RGS20基因表達(dá)數(shù)據(jù)和臨床數(shù)據(jù)，在TCGA數(shù)據(jù)庫中篩選得到1023例乳腺癌病例和98例癌旁對(duì)照樣本用于分析研究。

按照2011年《St. Gallen》的乳腺癌分子分型指南，對(duì)乳腺癌進(jìn)行分子分型：Luminal 型（ER和/或 PR+）、Her-2陽性型（Her-2過表達(dá)、ER 和 PR-）、三陰性型（ER 和 PR-、Her-2-）。根據(jù)上述乳腺癌分子分型標(biāo)準(zhǔn)，在TCGA數(shù)據(jù)中，篩選出Luminal型乳腺癌共有824例，Her-2陽性型乳腺癌共有38例，三陰性型乳腺癌共有161例。同時(shí)，收集入組患者的臨床數(shù)據(jù)：性別、年齡、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等數(shù)據(jù)，以及收集RGS20的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)（RPKM），以RGS20基因轉(zhuǎn)錄組表達(dá)數(shù)據(jù)的中位數(shù)作為區(qū)分RGS20高低表達(dá)的界值，進(jìn)行后續(xù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)軟件包（IBM SPSS statistics 21.0）進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)來判斷其是否符合正態(tài)分布，如果符合正態(tài)分布，則組間比較采用獨(dú)立樣本t；若不符合正態(tài)分布，則采用非參數(shù)Mann-Whitney檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)及率[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)及Fisher確切概率法。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 RGS20基因在不同亞型乳腺癌中表達(dá)情況

在TCGA數(shù)據(jù)庫中，根據(jù)乳腺癌分子分型標(biāo)準(zhǔn)，將乳腺癌患者分為Luminal型乳腺癌（ER+/PR+）824例，Her-2陽性型乳腺癌（ER-/PR-，Her-2+）38例和三陰性型乳腺癌（ER-/PR-，Her-2-）161例，分別計(jì)算各組的RGS20基因的表達(dá)水平。在所有分組中，RGS20基因的表達(dá)水平在所有乳腺癌中的表達(dá)明顯低于正常組（1023 vs. 98，P=0.002）。RGS20基因在三陰性型乳腺癌中的表達(dá)明顯高于正常組織（161 vs. 98，P<0.001），RGS20基因在Luminal型乳腺癌中的表達(dá)明顯地低于正常組織（824 vs. 98，P<0.001），然而RGS20基因在Her-2陽性型乳腺癌中的表達(dá)與正常組并沒有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（38 vs. 98，P=0.512），見圖1。

2.2 RGS20基因與Luminal型乳腺癌的臨床病理特征關(guān)聯(lián)性分析

本研究進(jìn)一步探索RGS20基因與luminal型乳腺癌的臨床病理特征之間的相關(guān)性，見表1。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：RGS20基因表達(dá)高低與年齡、TNM臨床分期、病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病例特征之間不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性，但是意外發(fā)現(xiàn)在Luminal型乳腺癌中，RGS20基因的表達(dá)與人種存在相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.009），在黑種人中表達(dá)最高，黃種人次之，白中人最低，見圖2。

2.3 RGS20基因表達(dá)與ER受體狀態(tài)的相關(guān)性

由于RGS20基因表達(dá)水平在Luminal乳腺癌組織、正常乳腺組織、三陰性乳腺癌組織中遞增，由此我們推測(cè)RGS20基因表達(dá)與ER受體表達(dá)程度有關(guān)。為了驗(yàn)證此假設(shè)，我們將TCGA數(shù)據(jù)庫分成ER陽性組和ER陰性組，分別比較兩組RGS20基因的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)ER陰性組的乳腺RGS20基因表達(dá)水平顯著高于ER陽性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（808 vs. 215，P<0.001），見圖3。

3討論

2015年中國癌癥年度報(bào)道公布了最新的國家癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，乳腺癌發(fā)病高居女性惡性腫瘤之首。僅乳腺癌新發(fā)人數(shù)就占據(jù)新發(fā)女性惡性腫瘤總數(shù)的15%，預(yù)計(jì)2015新發(fā)乳腺癌達(dá)272400人，因乳腺癌死亡人數(shù)達(dá)70700人。資料顯示乳腺癌是女性30～59歲年齡組最常見的癌癥，同時(shí)乳腺癌是45歲以下女性因癌致死最常見的原因。女性乳腺癌的年齡標(biāo)準(zhǔn)發(fā)生率和死亡率均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，具體升高程度不詳[9]。其中乳腺癌最常見的類型為luminal型乳腺癌，Luminal型又分為Luminal A型（ER+，PR+，Her-2-，ki-67低表達(dá)）和Luminal B型（ER+，PR+，Her-2+或ki-67高表達(dá)），雖然同屬激素受體陽性，但是臨床特點(diǎn)及對(duì)治療反應(yīng)性和預(yù)后有明顯差異[10]。Luminal A是乳腺癌最常見的分子亞型，通常為早期乳腺癌，復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)較低，對(duì)內(nèi)分泌治療敏感，化療不敏感，預(yù)后最好[11]。與Luminal A相比Luminal B的診斷時(shí)年齡更輕，腫塊更大，進(jìn)展相對(duì)較快，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率更高，激素受體水平較低，腫瘤組織學(xué)分級(jí)更高，對(duì)內(nèi)分泌治療敏感性較低，化療較敏感，預(yù)后相對(duì)較差[12]。相關(guān)研究表明Luminal A和Luminal B在五年生存率上并沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但是Luminal B型乳腺癌在確診后5年內(nèi)復(fù)發(fā)率較高[13]。

到目前為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了至少20種RGS蛋白，每種均有含有大約120個(gè)氨基酸的保守序列，正是這保守區(qū)使得RGS蛋白能夠負(fù)性調(diào)節(jié)G蛋白信號(hào)[14，15]。RGS蛋白家族參與多種細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)，包括促進(jìn)腫瘤發(fā)生和進(jìn)展，增值，分化，對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)反應(yīng)，跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，胚胎發(fā)育等[16]。最近多項(xiàng)的研究表明RGS蛋白不僅僅是Gα亞基GTP酶激活蛋白，在不同細(xì)胞中還表現(xiàn)出不同的分子功能。隨著對(duì)RGS蛋白家族研究的深入，許多RGS蛋白被證明與腫瘤進(jìn)展相關(guān)。比如，RGS17在肺癌和膀胱癌中通過促進(jìn)cAMP信號(hào)通路和CREB磷酸化維持腫瘤細(xì)胞的增殖。RGS19通過與GAIP（Gα-interacting protein）作用蛋白的羧基端的PDZ基序結(jié)構(gòu)耦聯(lián)促進(jìn)細(xì)胞增殖。RGS16具有促進(jìn)甲基化的作用，可以影響乳腺癌的蛋白表達(dá)。RGS4通過阻斷MMP2/9減少細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移。已經(jīng)有一些RGS蛋白被驗(yàn)證具有調(diào)節(jié)細(xì)胞遷移的能力，比如RGS1與調(diào)節(jié)趨化因子誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移有關(guān)，RGS3影響鼠類動(dòng)物B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移[4，5，17-19]。此外，針對(duì)RGS蛋白的靶向治療藥物的研究也不斷出現(xiàn)[19]。

在此項(xiàng)研究中，通過分析TCGA數(shù)據(jù)庫我們發(fā)現(xiàn)Luminal型乳腺癌RGS20基因表達(dá)低于正常對(duì)照組，RGS20基因在三陰性乳腺癌型中呈現(xiàn)高表達(dá)，然而Her-2陽性乳腺癌與正常組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三陰性乳腺是一種侵襲性極高，惡性程度高，復(fù)發(fā)率高的高危型乳腺癌。三陰性乳腺癌占浸潤性乳腺癌的10%～20%[20]，非裔美國人和非洲女性發(fā)病率較高，可高達(dá)50%。亞洲女性發(fā)病率與白人女性發(fā)病率相似，BRCA1突變患者中更多[21]。好發(fā)于相對(duì)年輕的婦女，預(yù)后通常較差[22]。而Luminal型是乳腺癌最常見的分子亞型，預(yù)后想對(duì)較好，局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的機(jī)率較低[10]。綜合結(jié)果表明RGS20基因在乳腺癌中的高表達(dá)可能具有促癌作用，提示是RGS20基因可能是一種致癌基因，提示預(yù)后不佳。已有兩項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)RGS20在黑色素瘤和轉(zhuǎn)移性乳腺癌中轉(zhuǎn)錄水平顯著提升，暗示RGS20具有促癌作用[8，23]。由此推斷l(xiāng)uminal乳腺癌預(yù)后較好可能與RGS20低表達(dá)有關(guān)。另一個(gè)有意思的現(xiàn)象，RGS20基因在三陰性型乳性癌和luminal型乳腺癌中呈相反的表達(dá)，可能歸因于在雌激素敏感基因中通過褪黑色抑制RGS20基因表達(dá)或者促進(jìn)RGS20基因降解[24-26]，根據(jù)TCGA數(shù)據(jù)庫的分析，ER受體水平與RGS20基因表達(dá)成負(fù)相關(guān)，從而解釋了RGS20基因在Luminal型乳腺癌表達(dá)比正常乳腺組織低，而三陰性乳腺癌的RGS20基因表達(dá)高于正常乳腺組織。此外我們發(fā)現(xiàn)，在Luminal型乳腺癌中不同人種表達(dá)存在顯著差異，黑種人RGS2基因高表達(dá)。國外有文獻(xiàn)報(bào)道在ER陽性乳腺癌人群中，黑人相較于白種人有較差的預(yù)后，并且此差距在明確診斷后兩年內(nèi)最明顯[26，27]。這與本研究結(jié)果一致，間接表明RGS20基因高表達(dá)在乳腺癌中的促癌作用。綜上所述，此項(xiàng)研究為說明在乳腺癌中RGS20基因可能是一個(gè)致癌基因，其在Luminal型乳腺癌中RGS20基因低表達(dá)，而三陰性乳腺癌高表達(dá)，可能與ER受體的表達(dá)有關(guān)，同時(shí)也說明其對(duì)乳腺癌的預(yù)后有一定的影響，提示RGS20基因可能作為一種新分子標(biāo)志物判斷乳腺癌的進(jìn)展和預(yù)后。

目前，RGS20基因作為作為一種致癌基因，促進(jìn)細(xì)胞侵襲和浸潤的機(jī)制尚未明確被闡述。早前一項(xiàng)研究提示RGS20基因可能通過多種不同途徑，在轉(zhuǎn)錄或翻譯水平調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移浸潤。一方面RGS20基因促進(jìn)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)變從而進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞間連接的分解，下調(diào)鈣粘連蛋白上調(diào)波形蛋白增加細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性和侵襲性。一方面和RGS17基因相似的是，RGS20基因很有可能間接地通過活化cAMP/PKA通路調(diào)節(jié)細(xì)胞聚集和轉(zhuǎn)移。另一方面，RGS20 基因參加一些Gi/z偶聯(lián)受體如褪黑素，MT1， 阿片μ受體，toll樣受體等的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)影響細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移[26]。

本研究結(jié)果提示在Luminal型乳腺癌中低表達(dá)，而RGS20基因在三陰性乳腺癌中高表達(dá)，由此推測(cè)Luminal型乳腺癌的良好預(yù)后可能與RGS20基因低表達(dá)密切相關(guān)。此外RGS20基因高表達(dá)與ER受體低表達(dá)，在luminal型乳腺癌中，其表達(dá)與人種存在相關(guān)性，說明RGS20基因可能是Luminal型乳腺癌的一個(gè)新分子標(biāo)志物。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Lv M，Li B，Li Y，et al. Predictive role of molecular subtypes in response to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer patients in Northeast China[J]. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention Apjcp，2011，12（9）：2411-2417.

[2] Hurst JH，Hooks SB. Regulator of G-protein signaling（RGS）proteins in cancer biology[J]. Biochemical Pharmacology，2009，78（10）：1289-1297.

[3] Hurst J，Mendpara N，Hooks SB. Regulator of G-protein signalling expression and function in ovarian cancer cell lines[J]. Cellular & Molecular Biology Letters，2009，14（1）：153-174.

[4] James MA，Lu Y，Liu Y，et al. RGS17，an overexpressed gene in human lung and prostate cancer，induces tumor cell proliferation through the cyclic AMP-PKA-CREB pathway[J]. Cancer Research，2009，69（5）：2108-2116.

[5] Wiechec E，Overgaard J，Hansen LL. A fragile site within the HPC1 region at 1q25.3 affecting RGS16，RGSL1，and RGSL2 in human breast carcinomas[J]. Genes Chromosomes & Cancer，2008，47（9）：766-780.

[6] Nixon AB，Casey PJ. Analysis of the regulation of microtubule dynamics by interaction of RGSZ1（RGS20）with the neuronal stathmin，SCG10[J]. Methods in Enzymology，2004， 390（6）：53-64.

[7] Wang Y，Ho G，Zhang JJ，et al. Regulator of G protein signaling Z1（RGSZ1） interacts with Galpha i subunits and regulates Galpha i-mediated cell signaling[J]. Journal of Biological Chemistry，2002，277（50）：48325-48332.

[8] Riker AI，Enkemann SA，F(xiàn)odstad O，et al. The gene expression profiles of primary and metastatic melanoma yields a transition point of tumor progression and metastasis[J]. BMC Medical Genomics，2008，1（1）：1-13.

[9] Chen W，Zheng R，Baade PD，et al. Cancer statistics in China，2015[J]. CA：A Cancer Journal for Clinicians，2016， 66（2）：115-132.

[10] Ignatiadis M，Sotiriou C. Luminal breast cancer：From biology to treatment[J]. Nature Reviews Clinical Oncology，2013，10（9）：494-506.

[11] Prat A，Cheang MC，Martín M，et al. Prognostic significance of progesterone receptor-positive tumor cells within immunohistochemically defined luminal A breast cancer[J]. Journal of Clinical Oncology Official Journal of the American Society of Clinical Oncology，2013，31（12）：203-209.

[12] 白鴿，張建清，楊媚，張莉. Luminal A型與Luminal B型乳腺癌的臨床病理特征及預(yù)后比較[J]. 實(shí)用腫瘤雜志，2012，27（1）：55-59.

[13] Tran B. Luminal-B breast cancer and novel therapeutic targets[J]. Breast Cancer Research，2011，13（6）：1-10.

[14] Burchett SA. Regulators of G protein signaling：A bestiary of modular protein binding domains[J]. Journal of Neurochemistry，2000，75（4）：1335-1351.

[15] Posner BA，Mukhopadhyay S，Tesmer JJ，et al. Modulation of the affinity and selectivity of RGS protein interaction with G alpha subunits by a conserved asparagine/serine residue[J]. Biochemistry，1999，38（24）：7773-7779.

[16] De VL，Gist FM. RGS proteins：More than just GAPs for heterotrimeric G proteins[J]. Trends in Cell Biology，1999， 9（4）：138-144.

[17] Tso PH，Wang Y，Wong SYS，et al. RGS19 enhances cell proliferation through its C-terminal PDZ motif[J]. Cellular Signalling，2010，22（11）：1700-1707.

[18] Cheng C，Yue W，Li L，et al. Regulator of G-protein signaling 4：A novel tumor suppressor with prognostic significance in non-small cell lung cancer[J]. Biochemical & Biophysical Research Communications，2016，469（13）：384-391.

[19] Sj？觟gren B. Regulator of G protein signaling proteins as drug targets：Current state and future possibilities[J]. Advances in Pharmacology，2011，62（1）：315-347.

[20] Boyle P. Triple-negative breast cancer：Epidemiological considerations and recommendations[J]. Annals of Oncology，2012，23（suppl-6）：vi7-vi12.

[21] Brenton JD，Carey LA，Ahmed AA，Caldas C. Molecular Classification and Molecular Forecasting of Breast Cancer：Ready for Clinical Application？[J]. Journal of Clinical Oncology，2005，23（29）：7350-7360.

[22] Dent R，Trudeau M，Pritchard KI，et al. Triple-negative breast cancer：Clinical features and patterns of recurrence[J]. Clinical Cancer Research An Official Journal of the American Association for Cancer Research，2007，13（15 Pt 1）：4429-4434.

[23] Depiereux E. Enhanced Meta-analysis Highlights Genes Involved in Metastasis from Several Microarray Datasets[J].Journal of Proteomics & Bioinformatics，2011，（2）：36-43.

[24] Girgert R，Hanf V，Emons G，et al. Membrane-bound melatonin receptor MT1 down-regulates estrogen responsive genes in breast cancer cells[J]. Journal of Pineal Research，2009，47（1）：23-31.

[25] Lai L，Yuan L，Cheng Q，et al. Alteration of the MT1 melatonin receptor gene and its expression in primary human breast tumors and breast cancer cell lines[J]. Breast Cancer Research and Treatment，2009，118（2）：293-305.

[26] Yang L，Lee MM，Leung MM，et al. Regulator of G protein signaling 20 enhances cancer cell aggregation，migration，invasion and adhesion[J]. Cellular Signalling，2016， 28（11）：1663-1672.

[27] Warner ET，Tamimi RM，Hughes ME，et al. Racial and Ethnic Differences in Breast Cancer Survival：Mediating Effect of Tumor Characteristics and Sociodemographic and Treatment Factors[J]. Journal of Clinical Oncology Official Journal of the American Society of Clinical Oncology，2015，33（20）：2254-2261.

（收稿日期：2016-06-12）