狂犬病活疫苗免疫后抗體檢測結(jié)果及其分析

魏秋霞，楊 建，郭 莉，侯 巍，劉 梅

(1.四川省雅安市農(nóng)業(yè)局動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 雅安 625000；2.四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610047；3.四川省蘆山縣農(nóng)業(yè)局動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 蘆山 625600)

狂犬病活疫苗免疫后抗體檢測結(jié)果及其分析

魏秋霞1，楊 建1，郭 莉2，侯 巍2，劉 梅3

(1.四川省雅安市農(nóng)業(yè)局動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 雅安 625000；2.四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610047；3.四川省蘆山縣農(nóng)業(yè)局動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 蘆山 625600)

為了解狂犬病活疫苗免疫效果，對雅安市8縣(區(qū))的農(nóng)村犬(狂犬病活疫苗免疫后)進(jìn)行隨機(jī)抽樣，用ELISA方法檢測免疫抗體，對免疫抗體合格率及對免疫抗體合格率可能有影響的因素進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，調(diào)查的犬抗體總合格率為77.68%，不同縣(區(qū))的犬血清免疫抗體合格率差異較大，最高的達(dá)到100%，最低的僅為40%；使用不同疫苗廠家疫苗、不同的免疫時(shí)間對狂犬病免疫抗體合格率均存在顯著性影響。

狂犬病；免疫抗體；合格率；影響

狂犬病(Rabies)又稱恐水癥，是由狂犬病毒引起的一種人獸共患接觸性傳染病。我國是狂犬病疫情較嚴(yán)重的國家之一，人間病例數(shù)量一直位于各類傳染病報(bào)告死亡數(shù)的前3位。感染犬仍是我國人狂犬病的主要傳染來源，對犬只進(jìn)行疫苗免疫是預(yù)防、控制狂犬病發(fā)生最有效的途徑，而免疫后抗體水平的高低是評估實(shí)際免疫效果的重要指標(biāo)。

我國狂犬病主要流行于農(nóng)村，農(nóng)村犬大多不進(jìn)行拴養(yǎng)，犬之間以及犬與人的接觸機(jī)會(huì)較多，存在較大的犬間狂犬病傳播和人狂犬病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。我市農(nóng)村飼養(yǎng)犬占全市犬總數(shù)的80%以上，為了解農(nóng)村犬狂犬病疫苗免疫效果，本試驗(yàn)對全市8縣(區(qū))農(nóng)村犬隨機(jī)抽樣進(jìn)行調(diào)查，以期為全市有效防控狂犬病提供一定的科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)疫苗 狂犬病活疫苗(Flury株)，分別來自國產(chǎn)疫苗廠家A、疫苗廠家B和疫苗廠家C。

1.1.2 血清樣品 2016年7月4～12日，對我市8個(gè)縣(區(qū))內(nèi)農(nóng)村犬進(jìn)行簡單隨機(jī)抽樣，共計(jì)血清樣品327份。按常規(guī)方法，采集犬血液進(jìn)行血清分離(無嚴(yán)重溶血)，然后置于-20℃保存待用，使用前血清經(jīng)56℃熱滅活30min。

1.1.3 檢測試劑 犬狂犬病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)，購自深圳市康百得生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 犬只免疫時(shí)間和免疫劑量等情況 抽樣犬只均為農(nóng)村犬，所調(diào)查犬都進(jìn)行了狂犬病疫苗免疫，且均為單聯(lián)活疫苗，免疫時(shí)間均在2016年3～6月期間，免疫劑量嚴(yán)格按各廠家疫苗說明書使用，均免疫1次。

1.2.2 檢測方法 嚴(yán)格按照廠家酶聯(lián)免疫法試劑盒說明、檢驗(yàn)方法操作，設(shè)置陽性、陰性及空白對照。

1.2.3 結(jié)果判定 只有陰性對照孔平均OD值≤0.15，臨界對照平均OD值≥0.30，試驗(yàn)結(jié)果才有效。樣本OD值≥臨界對照OD值時(shí)，判為狂犬病毒抗體陽性，且抗體水平高于0.5IU/mL；樣本OD值<臨界對照OD值時(shí)，判為狂犬病毒抗體陰性,且抗體水平低于0.5IU/mL。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)分析 所有數(shù)據(jù)用Microsoft Excel、SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2016年3～6月，全市各縣(區(qū))對轄區(qū)內(nèi)犬只進(jìn)行了摸底調(diào)查統(tǒng)計(jì)，并開展集中免疫。農(nóng)村犬均采用單聯(lián)活疫苗，農(nóng)村犬免疫覆蓋率達(dá)到了96.79%，本次調(diào)查采集的均為疫苗免疫后的犬血清樣品。試驗(yàn)檢測結(jié)果顯示：陰性對照平均值<0.15(減去了空白對照)，臨界對照平均值>0.70(減去了空白對照)，試驗(yàn)結(jié)果有效。

2.1 不同縣(區(qū))的犬狂犬病抗體檢測情況

對327份犬血清樣品進(jìn)行狂犬病抗體的檢測，結(jié)果有254份血清抗體水平合格，總合格率為77.68%。不同縣(區(qū))的犬血清抗體水平差異較大，最高的達(dá)到100%，最低的僅為40%。對不同區(qū)域犬的狂犬病抗體合格率進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)不同區(qū)域的犬抗體合格率存在差異，其中縣E、縣G與其它6個(gè)縣(區(qū))的合格率差異極其顯著(P<0.01)。具體如表1所示。

表1 各縣(區(qū))狂犬病免疫抗體合格率比較

2.2 不同生產(chǎn)廠家的疫苗對免疫抗體合格率的影響

本次調(diào)查的犬免疫的均為狂犬病活疫苗，免疫程序均為1次/年，免疫保護(hù)期為1年。共采集了327只犬的血清樣品。其中177只犬使用了國產(chǎn)疫苗A，62只犬使用了國產(chǎn)疫苗B，88只犬使用了國產(chǎn)疫苗C，抗體合格數(shù)、合格率如表2所示。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，3個(gè)廠家的疫苗免疫后抗體合格率均在70%以上，疫苗A、疫苗B免疫所產(chǎn)生的抗體合格率差異不大，但二者免疫抗體合格率與疫苗C差異極其顯著(P<0.01)。

表2 不同疫苗廠家對狂犬病免疫抗體合格率影響

2.3 不同免疫時(shí)間對免疫抗體合格率影響

如表3所示，此次檢測樣品按這4個(gè)免疫時(shí)間段統(tǒng)計(jì)，每個(gè)時(shí)間段免疫的抗體合格率均大于70%，免疫時(shí)間與抗體合格率之間存在相關(guān)性，差異顯著，尤其是6月以后免疫的抗體合格率(6月后免疫時(shí)間已達(dá)到狂犬病疫苗免疫后要求的監(jiān)測時(shí)間間隔)與其它3組的合格率差異極其顯著(P<0.01)。

表3 免疫時(shí)間對免疫抗體合格率影響

3 討論

世界衛(wèi)生組織(WHO)認(rèn)為，預(yù)防人類狂犬病最具成本效益的戰(zhàn)略是為犬類接種疫苗并消除犬類狂犬病。目前國際上公認(rèn)犬有效免疫率達(dá)到70%以上，即可有效控制狂犬病的傳播。因此，要控制狂犬病在人間傳播，對本地區(qū)的犬類進(jìn)行狂犬病疫苗的免疫及免疫效果評價(jià)尤為重要。本次監(jiān)測調(diào)查結(jié)果顯示，全市犬只免疫抗體總合格率為77.68%，達(dá)到了70%的標(biāo)準(zhǔn)，但不同區(qū)域之間存在較大差異，有兩個(gè)縣(區(qū))合格率分別僅為40%、55%。現(xiàn)在農(nóng)村犬大多不進(jìn)行拴養(yǎng)，犬之間以及犬與人的接觸機(jī)會(huì)較多，存在較大的犬間狂犬病傳播和人狂犬病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。檢測結(jié)果經(jīng)單因素統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，使用不同疫苗廠家疫苗、免疫時(shí)間不同對狂犬病免疫抗體合格率均存在顯著性影響，這可能與采樣方式、采樣數(shù)量及疫苗效果等因素有關(guān)。

綜上所述，本次免疫抗體檢測對全市8個(gè)縣(區(qū))農(nóng)村犬進(jìn)行隨機(jī)采樣，發(fā)現(xiàn)不同區(qū)域之間狂犬病抗體合格率存在較大差異，免疫效果存在區(qū)域不均衡性；使用不同廠家同類型疫苗以及免疫時(shí)間兩因素與犬的狂犬病抗體合格率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。本次監(jiān)測大部分縣(區(qū))免疫抗體合格率達(dá)到了世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的70%的有效免疫保護(hù)率標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合近幾年本市未出現(xiàn)狂犬病人間病例情況，總體認(rèn)為雅安市對狂犬病的防控效果較好，但也存在個(gè)別縣免疫抗體合格率較低的情況，說明部分區(qū)域仍存在發(fā)生狂犬病的風(fēng)險(xiǎn)。今后，應(yīng)針對不同縣(區(qū))的實(shí)際情況，進(jìn)一步查找原因，重點(diǎn)進(jìn)行補(bǔ)免、監(jiān)測等防控。

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2017-2-22

魏秋霞,碩士研究生,主要從事動(dòng)物疫病預(yù)防控制工作。E-mail：weiqx905@163.com。