探討抗癆膠囊劑體內外抗肺結核作用

張麗麗

【中圖分類號】R512.62 【文獻標識碼】B 【文章編號】2095-6851（2017）04-0-01

肺結核（pulmonary tubereulosis）是由結核桿菌引起的慢性肺部感染，常在機體抵抗力降低和細胞介導的變態(tài)反應性增高時發(fā)病。目前全球已有1/3人口約17億人感染結核病，現有結核患者2000萬。每年發(fā)生新患者約800萬，每年死于結核病者約300萬人。我國三次肺結核流行病學抽樣調查表明，活動性肺結核患病率：1979年為717/10萬，1984年為550/10萬，1990年為523/10萬[1]。近年來，由于耐藥菌株的增加，許多以前能有效防治結核的西藥的療效受到了很大的限制，肺結核已經成為一種引起國際上高度重視的傳染病。中醫(yī)認為本病歸屬“肺癆”范疇，是由于癆蟲侵蝕肺葉引起的一種具有傳染性的慢性衰弱性疾病。在治療上多采取扶正驅邪的方法，收到了較好的療效。抗癆膠囊由百部、黃芪等數味中藥組成，該方在臨床用于肺結核的輔助治療中取得了較好效果，本文擬報告該藥的部分實驗研究結果如下。

1.材料和方法

1.1 試驗藥品 抗癆膠囊劑：1g浸膏相當于6.42g原生藥，由四川省中藥研究所藥化室提供。臨用前用蒸餾水配成所需濃度的混懸液備用，本實驗劑量按g原生藥/kg計算。

利福平（RPP）膠囊：0.15g×100粒，成都錦華藥業(yè)有限公司出品，批號為080912，有效期至2010-08，臨用前用0.5%CMC配成所需濃度的混懸液備用。

1.2 試驗菌株 H37RV標準菌（ATCC27294）：牛型分支桿菌；單耐RFP菌；單耐INH菌；單耐SM菌；耐INH+SM+RFP菌；均由中國疾病預防控制中心結核病預防控制分中心提供。

2.實驗動物

豚鼠：一級動物；雌雄各半，體重：300～320g。生產許可證號：15號，由四川省實驗動物研究所提供。

3.實驗環(huán)境

四川省中藥研究所藥理實驗室，清潔級動物使用環(huán)境，合格號為：醫(yī)動字第24103117號。

4.方法與結果

4.1 對細菌生長的影響

4.1.1 體外對結核菌生長的影響 最小抑菌濃度（MIC）的測定[2，3]：采用試管法，將藥物分別加入蘇通培養(yǎng)基內后，加入定時的菌液（1mg/ml，每支接種0.1ml），經37℃培養(yǎng)2周后，每支吸0.1ml轉種于2支改良羅氏（L-J）培養(yǎng)基斜面同時設空白對照管。在含藥蘇通培養(yǎng)基內培養(yǎng)2周見細菌生長的最小濃度為最小抑菌濃度。

最小殺菌濃度（MBC）的測定：將在蘇通培養(yǎng)基內未見細菌生長的培養(yǎng)物，分別吸取0.05ml接種于改良羅氏（L-J）斜面，經37℃培養(yǎng)4周后，所接種的2支培養(yǎng)基斜面上的菌落數之和少于5個的最小稀釋度的藥物濃度為該藥的最小殺菌濃度。

4.1.2 體內對結核感染豚鼠的作用 豚鼠經PPD測試陰性后，隨機分組，分別灌胃抗癆膠囊20g/kg、10g/kg、5g/kg；利福平50mg/kg及等量蒸餾水，1次/d，連續(xù)45D。在給藥后2周，除對照組外，在各豚鼠蹊部皮下注射菌懸液0.5ml/只（將1mg/ml的菌懸液稀釋100倍）使動物感染結核桿菌。在末次給藥后24h處死動物，解剖肉眼計數每個臟器的結核結節(jié)，取肺臟、肝臟及脾臟稱濕重并計算其臟器指數，然后稱取一定量的組織做勻漿以便做結核菌培養(yǎng)，同時將各組織置于10%福爾馬林中固定并做切片以便做HE染色和Z-N染色彩。

取肝臟組織、脾臟組織和肺組織置于10%福爾馬林中固定后，用石蠟包埋，切片，進行抗酸染色（即Z-N染色）以顯示組織中的結核菌數量，染色后讀片，并按下述標準進行打分：0分，未見抗酸桿菌；1分：3～9條/100個視野；2分：1～10條以上/每視野，然后用秩和檢驗進行統計學分析。，抗癆膠囊均有減少各臟器的抗酸桿菌數量的趨勢，但與模型組比較無統計學差異。

5.小結

我國是世界22個結核病高負擔國家之一，結核病患者數量居世界第2位。2000年第四次全國結核病流行病學抽樣調查顯示，全國活動性肺結核患者病率為367/10萬[4]。隨著結核病的高發(fā)，在抗結核治療過程中引起的藥物性肝損害也明顯增加，抗結核藥所致的肝損害已成為我國藥物性肝損害的重要原因[5]。目前抗結核治療方案仍以異煙肼、利福平及乙胺丁醇聯合應用為主，這些藥物均可引起肝損害，甚至發(fā)生急性肝壞死致肝功能衰竭而死亡。因此從其他途徑尋找毒性小并能有效防治肺結核的藥物已是醫(yī)藥工作者主要研究課題之一。中藥的特點是成分復雜，能從多方面起作用，達到根治疾病的目的。本項目擬從中藥研究開發(fā)一個能有效防治肺結核的藥物，本研究結果顯示抗癆膠囊無論是體外或體內均可顯著抑制結核菌的生長。現代研究表明百部有抑制結核桿菌生長的作用，而黃芪具有調節(jié)機體免疫功能的作用。其原因有待進一步探討。

參考文獻

[1] 姚石安.中醫(yī)治療肺結核新方評析.浙江中醫(yī)雜志，1993，4：187.

[2] 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學.人民衛(wèi)生出版社出版，2002：1712-1720.

[3] 盧潤生，劉傳金，漆浩珊，等.結核菌實驗動物模型探討.中國防癆通訊，1990，12（3）：118.

[4] 劉敬東.結核病的“復燃”及其防治對策.國外醫(yī)學流行病學傳染病學分冊，2004，31（6）：321.

[5] 吳苑珊，鄭金琨，黎月玲，等.509例藥源性肝損文獻分析.藥物不良反應雜志，2002，4（6）：364.