海林格:致力成為動物疫苗黏膜免疫領導者
——記2017海大論道暨第一屆動物黏膜免疫與疫苗設計論壇

海林格:致力成為動物疫苗黏膜免疫領導者
——記2017海大論道暨第一屆動物黏膜免疫與疫苗設計論壇

本刊編輯/薛惠莉

為推動動物黏膜免疫系統理論體系的行業認知與了解，推廣黏膜免疫疫苗設計的研發和臨床應用，3月20-22日，四川海林格生物制藥有限公司（以下簡稱“海林格”）在廣州召開了“2017海大論道——第1屆動物黏膜免疫與疫苗設計技術論壇”。海林格公司特別邀請了國內黏膜免疫頂級專家、國內首個黏膜免疫疫苗申報團隊、各省生豬現代產業技術體系疾病控制研究室崗位科學家以及國內著名養殖企業的總經理/技術總監組成了超重量級的實踐型專家團隊主講本次論壇各類技術專題報告；以“匯聚全球黏膜免疫前沿智慧，引領中國動物疫病防控創新”為主題，與會嘉賓圍繞當前主要疫病防控和動物黏膜免疫疫苗的研究進展情況進行了闡述分析，并就動物疫苗的研究與生產提出了精彩見解與對策。

什么是黏膜免疫？

傳統的肌肉注射免疫大家都知道，那到底什么是黏膜免疫？黏膜免疫基礎理論研究證明，動物黏膜免疫系統是指機體與外界相接觸的腔道黏膜表面的免疫系統，主要由呼吸道、消化道、泌尿生殖道黏膜及某些外分泌腺（如唾液腺、淚腺及乳腺等）黏膜相關的淋巴組織所組成的免疫系統，是機體抵抗病原微生物入侵的第一道屏障。已知的黏膜部位免疫細胞（如M細胞、樹突狀細胞）和免疫分子（如SIgA)的數量均超過全身免疫系統，黏膜免疫系統在防御動物傳染病的發生中發揮著不可替代的重要作用，且又具有相對獨立性。

圖1 會議現場

目前，動物黏膜免疫系統理論體系的認知和黏膜免疫（疫苗設計和黏膜免疫佐劑研制）的實踐還沒有受到行業的研究開發和臨床應用的重視。海林格公司近年來致力于共同黏膜免疫系統疫苗設計研究和臨床應用實踐，取得了超出預期的臨床效果。

滴鼻免疫流感活疫苗已得到認可

南京農業大學博士生導師楊倩教授深入淺出地為與會者做 “動物共同黏膜免疫理論體系與疫苗設計技術”的報告。關于鼻腔免疫及其疫苗設計，楊教授提到由于鼻腔后部黏膜下分布有豐富的毛細血管和大量黏膜相關的淋巴組織，鼻腔免疫具有抗原誘導免疫反應閾值低、抗原用量少，不受消化酶的影響、不引起免疫耐受等優點，鼻腔免疫誘導免疫反應能力保持較長時間。2010年美國啟動流感疫苗工程，通過滴鼻免疫活的流感疫苗已得到認可，鼻腔免疫預防豬的豬繁殖與呼吸綜合征、豬支原體肺炎和豬流感等病已有研究。同樣，鼻腔免疫存在著挑戰，鼻腔上皮纖毛的擺動和上皮黏液可分別影響抗原的滯留和吸收；抗原進入鼻腔后只能在黏膜表面做短暫的停留；假復層纖毛柱狀上皮細胞間的緊密連接產生的物理屏障；多數抗原單獨進行鼻腔免疫時免疫原性較弱等特點，所以要有相應的設計原則。首先要解決疫苗抗原在鼻腔黏膜表面黏附和滯留問題，黏膜疫苗需要黏附在黏膜上，黏附的時間越長發揮的效果就越好，然后增強抗原的免疫原性，促進M細胞、樹突狀細胞有效攝取抗原，解決抗原跨上皮吸收的困難。

因黏膜免疫較難計算抗原量和確定免疫反應，缺乏標準化試驗和臨床評價標準。盡快建立黏膜免疫評價標準，靶向M細胞和樹突狀細胞（針對黏膜組織）針對感染選擇接種的途徑，黏膜疫苗設計上需要考慮動物和各種病原的不同安全性、穩定性（在胃腸道），成本是制約免疫增強劑在畜牧生產中應用的關鍵，尋找低成本、易制備、高效且安全的獸用疫苗免疫增強劑。

楊教授表示根據黏膜免疫特點，如何增加抗原的遞呈是核心問題，但可通過免疫增強佐劑等方式解決；而口服免疫疫苗則需要克服消化酶的降解，而且需要二次免疫才能達到預期效果。鼻腔免疫則需要克服纖毛的擺動，想辦法延長疫苗抗原在其的停留時間。

4款豬用疫苗產品組合已上市

海林格公司總經理趙金旺分享了海林格公司對動物黏膜免疫的理解、疫苗產品方案和研發方向，展現了海林格公司在動物黏膜免疫領域特色發展道路上的藍圖。

海林格公司針對當前養豬業最常見的7大疫病：豬瘟、豬偽狂犬病、豬圓環病毒病、豬流行性腹瀉病毒病、豬藍耳病、豬支原體肺炎和口蹄疫，海林格公司目前推出4款豬用疫苗產品組合。

“海聯安”，即豬瘟活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗組合產品。為解決豬瘟超前免疫臨床上實際操作不易落實，以及避免仔豬肌注豬瘟活疫苗病毒、豬偽狂犬病活疫苗病毒（早期免疫接種）等受到母源抗體干擾的情況，海大集團畜牧獸醫研究院在成功研制出豬流行性腹瀉病毒滅活疫苗黏膜免疫佐劑的基礎上，又成功研制出針對豬瘟活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗專用黏膜免疫佐劑。依據專有的黏膜免疫（佐劑）技術，在仔豬出生1～3日齡，鼻腔噴鼻黏膜免疫豬瘟活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗組合產品，因不受母源抗體的干擾或影響，取得了理想的豬瘟、豬偽狂犬病活疫苗的臨床免疫效果。

針對豬圓環病毒病防控存在的注射與應激問題、保護時間短（免疫100日齡左右仍有發病）等問題，海林格推出“海圓安”產品，即豬圓環病毒2型疫苗，采用原創佐劑生物油活性物質聚合緩釋技術，使疫苗具有不怕冷、不怕熱，好抽易打，無應激，除僵豬等顯著效果。

即將上市的黏膜免疫“海瀉安”，即豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉病毒二聯滅活疫苗，據了解，該產品擁有2項豬流行性腹瀉核心國家發明專利技術。另外，海林格預計2017-2019年上市銷售的疫苗產品還有，副豬嗜血桿菌三價滅活疫苗和豬支原體肺炎滅活疫苗。

此次會議還邀請到中國動物衛生與流行病學中心家畜病監測室負責人李曉成研究員，海大集團畜牧獸醫研究院院長王貴平博士，河南省生豬產業技術體系首席科學家郭成留研究員，中國獸醫協會動物診療分會副會長、豬病組組長白挨泉教授，廣東溫氏食品集團股份有限公司養豬事業部生產技術部副總經理王連想博士，云南智康源農牧科技有限公司董事長彭克高研究員，云南農業大學副教授、碩士生導師、中國病理生理學會動物病理生理學專業委員會秘書長嚴玉霖博士，江西省畜禽育種中心主任、江西農大動科院王亞鳴副教授，海大集團益豚豬業事業部獸醫總監、海大集團湖南益豚豬業公司副總經理陳果亮博士等知名專家，其中，李曉成研究員作了《2017年我國豬病流行態勢分析》的報告，王貴平院長作《豬流行性腹瀉病原分離鑒定及黏膜免疫疫苗的研究》的報告。

王院長的報告分析了當前豬流行性腹瀉病毒（PEDV）流行趨勢：由北向南逐漸加強。目前流行的特點：產房出現跳躍式爆發，沒有明顯季節性。據統計，消化道感染的發病率在感染性疾病中居第二位，在感染過程中，腸道黏膜的免疫屏障被破壞，造成臨床各種癥狀，因此，研究腸道黏膜的免疫屏障至關重要，在腸道黏膜免疫中起重要作用的是分泌型SIgA。

圖2 會議合影

據王院長介紹，海大研究院從2010年-2016年間在廣東豬場臨床分離到52株PEDV毒株，經過篩選培育出毒力較強、免疫原性最好的流行株，通過不斷改進培養方法，病毒滴度及生長速度都得到很大提高，并突破了病毒培養從平面到懸浮培養的關鍵技術研究，為規模化生產奠定基礎。

克服PEDV的培養難題后，海大研究院對免疫劑型、佐劑和免疫途徑也進行了深入研究。目前腹瀉疫苗主要以肌肉注射、后海穴注射為主，效果并不很理想，因此海大研究院在黏膜免疫途徑方面做了大膽嘗試，通過口服免疫的膠囊、混懸液、包裹顆粒等，最終選定噴鼻免疫方式。據他介紹，PEDV的靶細胞是腸上皮細胞，而形成有效的免疫反應應該是阻斷病毒進入腸道上皮細胞，取決于在消化道表面的SIgA。而仔豬SIgA來源則依賴母乳中SIgA含量的高低。根據胃腸道——乳房免疫軸理論，通過胃腸道或呼吸道免疫，可誘導相關免疫細胞分化并遷移到乳腺中定居，合成大量SIgA 釋放到乳汁中。

由于噴鼻免疫的腹瀉疫苗還沒有先例，海大研究院還同步研發了具有強烈細胞膜親和作用，抵御鼻黏膜分泌物破壞、能協助突破黏膜屏障，提高抗原遞呈細胞識別病毒和亞單位抗原的新型黏膜免疫佐劑。

論壇活動期間，海林格公司組織與會專家學者、大型養殖客戶蒞臨海林格公司的研發承接機構——海大集團研究院進行了參觀考察，嘉賓再次見證了海大集團雄厚的科研實力。

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四川海林格生物制藥有限公司是廣東海大集團股份有限公司的控股子公司，前身是國營企業四川省獸醫生物藥品廠，是一家具有50多年歷史，專業從事獸醫生物制品研發、生產、銷售和服務于一體的高科技企業，2015年5月由廣東海大集團股份有限公司控股重組后更名為“四川海林格生物制藥有限公司”。