腹腔鏡下射頻消融聯(lián)合靜脈化療對(duì)PTEN通路和Wnt通路介導(dǎo)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響

吳杭源，陳衛(wèi)，吳鳴宇

（1.江蘇省無(wú)錫市第五人民醫(yī)院 肝病科，江蘇 無(wú)錫 214005；2.江蘇省無(wú)錫市第五人民醫(yī)院腫瘤科，江蘇 無(wú)錫 214005；3.江蘇省無(wú)錫市人民醫(yī)院 肝膽外科，江蘇 無(wú)錫 214021）

腹腔鏡下射頻消融聯(lián)合靜脈化療對(duì)PTEN通路和Wnt通路介導(dǎo)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響

吳杭源1，陳衛(wèi)2，吳鳴宇3

（1.江蘇省無(wú)錫市第五人民醫(yī)院 肝病科，江蘇 無(wú)錫 214005；2.江蘇省無(wú)錫市第五人民醫(yī)院腫瘤科，江蘇 無(wú)錫 214005；3.江蘇省無(wú)錫市人民醫(yī)院 肝膽外科，江蘇 無(wú)錫 214021）

目的探討腹腔鏡下射頻消融術(shù)（LRFA）聯(lián)合靜脈化療對(duì)PTEN通路、Wnt通路介導(dǎo)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。方法收集2013年5月-2016年6月該院收治的肝細(xì)胞癌患者90例，按照隨機(jī)數(shù)表法分為觀察組（n=45）及對(duì)照組（n=45）。觀察組患者接受LRFA聯(lián)合靜脈化療，對(duì)照組患者僅接受靜脈化療。術(shù)后1周取兩組患者的肝臟病灶組織標(biāo)本，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法（RT-PCR）檢測(cè)其中PTEN信號(hào)通路、Wnt信號(hào)通路相關(guān)基因mRNA表達(dá)量；采用放射免疫法檢測(cè)血清腫瘤標(biāo)志物含量。結(jié)果治療1周后，觀察組患者的病灶組織PTEN通路相關(guān)基因PTEN mRNA表達(dá)量高于對(duì)照組患者，缺氧誘導(dǎo)因子-1（HIF-1）和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）mRNA表達(dá)量低于對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；觀察組患者的病灶組織Wnt通路相關(guān)基因β-鏈蛋白（β-catenin）、細(xì)胞周期蛋白D1（CyclinD1）、c-myc和基質(zhì)金屬蛋白酶7（MMP-7）mRNA表達(dá)量低于對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；觀察組患者的血清腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白（AFP）、γ-谷胺酰轉(zhuǎn)肽酶同工酶Ⅱ（GGT-Ⅱ）、胰島素樣生長(zhǎng)因子-2（IGF-2）、糖類抗原19-9（CA19-9）含量低于對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論LRFA聯(lián)合靜脈化療可通過(guò)PTEN通路、Wnt通路抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)，具有積極的臨床意義。

肝癌；腹腔鏡下射頻消融術(shù)；靜脈化療；PTEN通路；Wnt通路

原發(fā)性肝細(xì)胞癌是惡性程度較大的腫瘤性疾病，多數(shù)患者早期癥狀不顯著、至臨床確診時(shí)已到中晚期，只能接受保守治療控制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[1]。全身靜脈化療是最常見(jiàn)的保守治療方法，通過(guò)化療藥物的腫瘤細(xì)胞毒性作用遏制腫瘤生長(zhǎng)。但是全身化療對(duì)正常組織臟器的損傷較大，且肝臟腫瘤局部的藥物濃度不高，腫瘤細(xì)胞殺滅作用有限[2-3]。腹腔鏡下射頻消融術(shù)（laparoscopic radiofrequency ablation，LRFA）是近年興起的全新惡性腫瘤治療方法，較多研究證實(shí)該術(shù)式與姑息性切除術(shù)相比，并未增加患者死亡率且可以減少手術(shù)創(chuàng)傷[4-5]。本次研究將LRFA與靜脈化療聯(lián)合應(yīng)用于本院原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者中，初步探討聯(lián)合治療對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，選取2013年5月-2016年6月本院收治的肝細(xì)胞癌患者90例作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)如下：①經(jīng)臨床病理學(xué)確診；②原發(fā)性肝細(xì)胞癌；③肝細(xì)胞癌無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；④患者簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)如下：①伴全身其他組織臟器惡性腫瘤性疾病；②伴嚴(yán)重心臟、腎臟功能不全；③伴自身免疫性疾病；④伴造血系統(tǒng)功能障礙；⑤患者自愿放棄治療或者中途退出治療。

按照隨機(jī)數(shù)表法，90例患者被分為觀察組及對(duì)照組各45例。對(duì)照組中，男24例，女21例，年齡40～76歲，平均（64.38±7.11）歲，體質(zhì)指數(shù)（body mass index，BMI）值21.5～26.7 kg/m2，平均（23.14±2.98）kg/m2；觀察組中，男25例、女20例，年齡42～73歲，平均（64.15±7.53）歲，BMI值21.3～26.9 kg/m2，平均（23.52±2.76）kg/m2。兩組患者的性別、年齡和BMI值分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

對(duì)照組患者接受常規(guī)靜脈化療，具體如下：奧沙利鉑（L-OHP）85 mg/m2，靜脈滴注、第15天；亞葉酸鈣（LV）200 mg/m2，5-氟尿嘧啶（5-FU）前2 h靜脈滴注，第15和16天； 5-FU 400 mg/m2，靜脈滴注，第15和16天，5-FU 600 mg/m2，微泵注入、持續(xù)22 h，第15和16天。

觀察組患者接受LRFA聯(lián)合靜脈化療，具體如下：患者取平臥位，經(jīng)彩色多普勒超聲儀（荷蘭飛利浦公司，型號(hào)IE33）定位肝臟腫瘤位置后常規(guī)消毒鋪巾，局麻下在右上腹肋緣下作一弧形切口，入腹后適當(dāng)游離腹腔粘連及肝臟。采用射頻治療儀（美國(guó)邁德醫(yī)療科技有限公司，型號(hào)S-1500）及射頻針，沿腫瘤周圍肝針縫合一圈，根據(jù)腫瘤大小步入2或3根射頻針并覆蓋腫瘤根部。設(shè)置射頻消融參數(shù)如下：輸出功率150 W、靶溫度105℃，對(duì)直徑＜4.0 cm的腫瘤科一次性完成治療，對(duì)直徑≥4.0 cm的腫瘤科進(jìn)行多次射頻治療。消融結(jié)束后再次B超探查腫瘤是否消融完全，如存在未消融區(qū)域則再次布針對(duì)其進(jìn)行消融。每次退針均在燒針道模式下退出，防止正常肝臟組織出血或者腫瘤種植轉(zhuǎn)移。拔針后明確無(wú)出血、膽漏后結(jié)束手術(shù)。術(shù)后靜脈化療方案同對(duì)照組患者。

1.3 蛋白表達(dá)的檢測(cè)

治療后1周，對(duì)兩組患者進(jìn)行肝臟腫瘤組織活檢，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法（reverse transcriptionpolymerase chain reaction，RT-PCR）測(cè)定PTEN信號(hào)通路基因PTEN、缺氧誘導(dǎo)因子-1（hypoxia inducible factor-1，HIF-1）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）mRNA表達(dá)量；Wnt信號(hào)通路基因β-鏈蛋白（β-catenin）、細(xì)胞周期蛋白D1（CyclinD1）、c-myc和基質(zhì)金屬蛋白酶7（matrix metallo proteinase-7，MMP-7）mRNA表達(dá)量。具體方法如下：按照RNA提取試劑盒（美國(guó)Sigma公司，貨號(hào)T9424）說(shuō)明進(jìn)行肝組織標(biāo)本總RNA提取，采用紫外分析、瓊脂糖電泳檢測(cè)總RNA濃度及完整性。根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（美國(guó)Roche公司，貨號(hào)11939823001）說(shuō)明書(shū)將總RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。PCR反應(yīng)條件：95℃，30 s（1個(gè)循環(huán)）→95℃，5 s（1個(gè)循環(huán)）→60℃，31 s（40個(gè)循環(huán)）。反應(yīng)結(jié)束采用軟件分析PCR過(guò)程中的CT值，設(shè)置對(duì)照組患者的目標(biāo)基因mRNA表達(dá)量為100，相應(yīng)計(jì)算觀察組患者的目標(biāo)基因mRNA表達(dá)量。

1.4 血清腫瘤標(biāo)志物

治療后1周，取兩組患者的空腹、外周靜脈血2 ml，室溫靜置30 min、4℃離心（3 500 r/min）15 min，取上清液并采用放射免疫法測(cè)定其中腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）、γ-谷胺酰轉(zhuǎn)肽酶同工酶Ⅱ（gamma glutamyl peptidase Ⅱ，GGT-Ⅱ）、胰島素樣生長(zhǎng)因子-2（insulin like growth factor -2，IGF-2）和糖類抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

文中數(shù)據(jù)錄入軟件SPSS 20.0，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PTEN通路相關(guān)基因表達(dá)

治療1周后，觀察組患者的病灶組織PTEN通路相關(guān)基因PTEN mRNA表達(dá)量高于對(duì)照組患者，HIF-1和VEGF mRNA表達(dá)量低于對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 Wnt通路相關(guān)基因表達(dá)

治療1周后，觀察組患者的病灶組織Wnt通路相關(guān) 基因β-catenin、CyclinD1、c-myc和MMP-7 mRNA表達(dá)量均明顯低于對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 腫瘤標(biāo)志物

治療1周后，觀察組患者的血清腫瘤標(biāo)志物AFP、GGT-Ⅱ、IGF-2和CA19-9含量均明顯低于對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表1 治療后腫瘤組織PTEN通路相關(guān)基因表達(dá)量比較 （±s）Table 1 Comparison of expression of PTEN pathway related genes in tumor tissues after treatment （±s）

表1 治療后腫瘤組織PTEN通路相關(guān)基因表達(dá)量比較 （±s）Table 1 Comparison of expression of PTEN pathway related genes in tumor tissues after treatment （±s）

組別 PTEN HIF-1 VEGF觀察組（n=45） 143.28±18.29 67.21±7.05 70.12±7.65對(duì)照組（n=45） 100.00±10.19 100.00±9.88 100.00±11.17t值 7.29 8.19 8.36P值 0.019 0.013 0.011

表2 治療后腫瘤組織Wnt通路相關(guān)基因表達(dá)量比較 （±s）Table 2 Comparison of expression of Wnt pathway related genes in tumor tissues after treatment （±s）

表2 治療后腫瘤組織Wnt通路相關(guān)基因表達(dá)量比較 （±s）Table 2 Comparison of expression of Wnt pathway related genes in tumor tissues after treatment （±s）

組別 β-catenin CyclinD1 c-myc MMP-7觀察組（n=45） 67.28±7.09 59.84±6.74 65.37±7.94 71.28±7.69對(duì)照組（n=45） 100.00±9.74 100.00±10.05 100.00±9.82 100.00±11.17t值 8.29 9.17 8.62 9.02P值 0.012 0.008 0.010 0.009

表3 治療后血清腫瘤標(biāo)志物含量比較 （±s）Table 3 Comparison of serum tumor markers after treatment （±s）

表3 治療后血清腫瘤標(biāo)志物含量比較 （±s）Table 3 Comparison of serum tumor markers after treatment （±s）

組別 AFP/（μg/L） GGT-Ⅱ/（pg/ml） IGF-2/（μg/L） CA19-9/（u/ml）觀察組（n=45） 34.28±4.98 2.01±0.24 153.27±18.95 19.27±2.12對(duì)照組（n=45） 91.75±9.06 3.98±0.45 275.88±30.64 38.94±4.76t值 8.29 5.18 11.28 7.39P值 0.013 0.024 0.000 0.019

3 討論

LRFA是目前中晚期惡性腫瘤性疾病的主要治療方法之一，在結(jié)直腸肝轉(zhuǎn)移患者的研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，LRFA可降低腫瘤局部復(fù)發(fā)率，肯定了其治療效果。LRFA是將400～500 kHz高頻電流產(chǎn)生的離子震蕩轉(zhuǎn)化為熱能并傳導(dǎo)至腫瘤細(xì)胞內(nèi)，一旦惡性腫瘤細(xì)胞被加熱至≥50℃，將發(fā)現(xiàn)細(xì)胞膜溶解、蛋白質(zhì)變性等一系列不可逆性改變，最終出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞死亡[6]。LRFA可局部作用于腫瘤組織并使之壞死，對(duì)周圍正常組織臟器的影響較小，是目前廣受關(guān)注的中晚期惡性腫瘤輔助治療手段。本次研究在傳統(tǒng)靜脈化療基礎(chǔ)上加入LRFA治療，具體從腫瘤生長(zhǎng)信號(hào)通路等方面展開(kāi)研究。

較多研究均證實(shí)，PTEN信號(hào)通路在細(xì)胞增殖、凋亡中發(fā)揮重要作用，是腫瘤血管生成的調(diào)節(jié)中心[7-8]。PTEN是一種抑癌基因，較多腫瘤中存在其突變及表達(dá)減少，是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要因素之一。HIF-1和VEGF均是PTEN信號(hào)通路的下游基因，HIF-1在腫瘤缺氧狀態(tài)下充當(dāng)轉(zhuǎn)錄激活介質(zhì)，可與VEGF啟動(dòng)子缺氧效應(yīng)元件HRE結(jié)合共同調(diào)節(jié)VEGF表達(dá)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體（vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR）轉(zhuǎn)錄，實(shí)現(xiàn)促腫瘤血管新生的作用[9-10]。本研究在治療后獲得肝癌病灶組織標(biāo)本，經(jīng)RT-PCR檢測(cè)PTEN信號(hào)通路基因表達(dá)后發(fā)現(xiàn)：與對(duì)照組患者相比，觀察組患者的腫瘤組織PTEN信號(hào)通路基因PTEN mRNA表達(dá)量較高，HIF-1和VEGF mRNA表達(dá)量較低，提示加入LRFA治療后肝癌組織的PTEN抑癌活性被激活，同時(shí)HIF-1和VEGF等促腫瘤血管生成基因表達(dá)被遏制，整體腫瘤細(xì)胞的血供及氧供均被阻斷，腫瘤細(xì)胞向凋亡發(fā)展。

Wnt信號(hào)通路在多種惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中均扮演重要角色，潘理會(huì)等[11]的研究明確Wnt信號(hào)通路組間蛋白的異常表達(dá)直接促使了胃癌的發(fā)生及發(fā)展；蘇金玲等[12]的研究指出，Wnt信號(hào)通路間接促進(jìn)了酒精性肝纖維化患者的肝星狀細(xì)胞活化。在近期對(duì)肝癌細(xì)胞的研究中也發(fā)現(xiàn)，Wnt信號(hào)通路及其下游基因參與了肝細(xì)胞癌變的過(guò)程。β-catenin、CyclinD1、c-myc和MMP-7均是目前公認(rèn)的Wnt信號(hào)通路下游分子，β-catenin處于該通路的關(guān)鍵部位，其降解異常及積聚可刺激Wnt信號(hào)靶基因CyclinD1、c-myc和MMP-7等轉(zhuǎn)錄，影響腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[13]。有研究發(fā)現(xiàn)β-catenin過(guò)表達(dá)可存在于82.9%左右的原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者中，且其表達(dá)量與下游基因表達(dá)成正相關(guān)[14]。本次研究對(duì)Wnt信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：與對(duì)照組患者相比，觀察組患者的治療后肝癌組織中Wnt通路相關(guān)基因β-catenin、CyclinD1、c-myc和MMP-7 mRNA表達(dá)量均較低，提示LRFA可以抑制Wnt信號(hào)通路表達(dá)，這也是本手術(shù)方法發(fā)揮腫瘤殺滅作用的根本途徑之一。

除了PTEN通路、Wnt通路，血清腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)情況可宏觀反應(yīng)臨床治療效果。AFP是最常見(jiàn)的肝癌腫瘤標(biāo)志物，其含量與肝癌病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。GGT-Ⅱ廣泛分布于機(jī)體各臟器中，是原發(fā)性肝癌診斷的特異性標(biāo)志物，其檢測(cè)的特異性高達(dá)98.0%。戴衛(wèi)鋒[15]的研究指出，肝癌患者的血清GGT-Ⅱ明顯高于非肝癌患者。IGF-2具有促細(xì)胞有絲分裂、抗凋亡等作用，可以上調(diào)周期素D1表達(dá)而促進(jìn)細(xì)胞周期中G1～S期的轉(zhuǎn)化。CA19-9是胃腸道腫瘤診斷標(biāo)志物，可以作為肝癌診斷的輔助標(biāo)志物，與AFP聯(lián)合檢測(cè)可以大幅提升其診斷價(jià)值。本次研究對(duì)上述4種血清腫瘤標(biāo)志物含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示與對(duì)照組患者相比，觀察組患者的血清AFP、GGT-Ⅱ、IGF-2和CA19-9含量均較低，宏觀說(shuō)明在靜脈化療基礎(chǔ)上加入LRFA可以更為有效地遏制腫瘤活性、具有更為理想的整體治療效果。

綜上所述，LRFA聯(lián)合靜脈化療可通過(guò)PTEN通路、Wnt通路抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)，可以作為遠(yuǎn)期中晚期肝癌治療的可靠手段。

[1] YU S J, YOON J H, LEE J M, et al. Percutaneous ethanol injection therapy is comparable to radiofrequency ablation inhepatocellular carcinoma smaller than 1.5 cm: A matched case-control comparative analysis[J]. Medicine (Baltimore), 2016, 95(35): e4551.

[2] 劉光藝, 李洋, 陳振海, 等. DC-CIK細(xì)胞聯(lián)合全身靜脈化療治療晚期結(jié)直腸癌伴彌漫性肝轉(zhuǎn)移臨床療效分析[J]. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2014, 39(3): 368-371.

[2] LIU G Y, LI Y, CHEN Z H, et al. Clinica therapeutic effects of DCCIK cells immunotherapy with FOLFOX regimen on advanced colorectal cancer with diffusely hepatic metastasis[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2014, 39(3): 368-371. Chinese

[3] NISKA J R, KEANE F K, WOLFGANG J A, et al. Impact of intravenous contrast enhancement phase on target definition for hepatocellular carcinoma (HCC) and intrahepatic cholangiocarcinoma (IHC): Observations from patients enrolled on a prospective phase 2 trial[J]. Pract Radiat Oncol, 2016, 6(1): e9-e16.

[4] 張前進(jìn), 胡伯年, 裴俊烽, 等. 腹腔鏡下射頻消融術(shù)在肝癌患者中的臨床應(yīng)用價(jià)值及其對(duì)血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和基質(zhì)金屬蛋白酶-2的影響[J]. 中國(guó)內(nèi)鏡雜志, 2016, 22(9): 10-13.

[4] ZHANG Q J, HU B N, PEI J F, et al. Clinical values of laparoscopic radiofrequency ablation in liver cancer and its impacts on serumal VEGF and MMP-2[J]. China Journal of Endoscopy, 2016, 22(9): 10-13. Chinese

[5] SUCANDY I, CHEEK S, GOLAS B J, et al. Longterm survival outcomes of patients undergoing treatment with radiofrequency ablation forhepatocellular carcinoma and metastatic colorectal cancer liver tumors[J]. HPB (Oxford), 2016, 18(9): 756-763.

[6] GUO Y, WANG J, ZHANG L, et al. Theranostical nanosystemmediated identi fi cation of an oncogene and highly effective therapy inhepatocellular carcinoma[J]. Hepatology, 2016, 63(4): 1240-1255.

[7] 王加佳, 夏中元, 趙博, 等. DJ-1/PTEN通路在糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注期間對(duì)心肌損傷的影響[J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 23(23): 37-40.

[7] WANG J J, XIA Z Y, ZHAO B, et al. Effects of DJ-1/PTEN signal pathway in myocardial ischemia reperfusion on diabetes rats[J]. China Journal of Modern Medicine, 2013, 23(23): 37-40. Chinese

[8] 朱明月, 符史干, 李孟森, 等. 甲胎蛋白抑制PTEN活性導(dǎo)致肝癌細(xì)胞耐受ATRA誘導(dǎo)的凋亡[J]. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展, 2011, 38(3): 228-231.

[8] ZHU M Y, FU S G, LI M S, et al. Alpha fetoprotein inhibited PTEN activity and caused tolerance to ATRA induced apoptosis in hepatocellular carcinoma cells[J]. Progress in Biochemistry and Biophysics, 2011, 38(3): 228-231. Chinese

[9] HANG X, ZHU S, DI H, et al. Nedd4 depletion inhibits hepatocellular carcinoma growth via targeting PTEN[J]. Cell Physiol Biochem, 2016, 39(2): 768-779.

[10] RAKSHIT N, YANG S, ZHOU W, et al. Adenovirus-mediated co-expression of ING4 and PTEN cooperatively enhances their antitumor activity in human hepatocellular carcinoma cells[J]. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai), 2016, 48(8): 704-713.

[11] 潘理會(huì), 李春輝, 佟曉波, 等. Wnt信號(hào)通路的組件蛋白DKK-1、β-catenin及CyclinD1在胃癌中的表達(dá)與相互關(guān)系[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2013,29(15):2517-2519.

[11] PAN L H, LI C H, TONG X B, et al. Expression of Wnt signaling pathway component protein DKK-1、β-catenin、CyclinD1 in gastric cancer and the relationship between them[J]. Journal of Practical Medicine, 2013, 29(15): 2517-2519. Chinese

[12] 蘇金玲, 姜希娟, 郭茂娟, 等. Wnt信號(hào)通路對(duì)酒精性肝纖維化中肝星狀細(xì)胞活化的影響以及整合素連接激酶的調(diào)節(jié)作用[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 29(5): 718-720.

[12] SU J L, JIANG X J, GUO M J, et al. The role of Wnt signaling pathway in the activation of hepatic stellate cells in alcoholic liver fi brosis and the regulation of integrin linked kinase[J]. Journal of Practical Medicine, 2013, 29(5): 718-720. Chinese

[13] LIU L J, XIE S X, CHEN Y T, et al. Aberrant regulation of Wnt signaling in hepatocellular carcinoma[J]. World J Gastroenterol, 2016, 22(33): 7486-7499.

[14] 張志成, 肖影群, 章萍, 等. Wnt信號(hào)通路下游靶基因在HBV相關(guān)肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[J]. 廣東醫(yī)學(xué), 2013, 34(1): 75-77.

[14] ZHANG Z C, XIAO Y Q, ZHANG P, et al. Expression and significance of downstream target genes of Wnt signaling pathway in HBV associated hepatocellular carcinoma[J]. Guangdong Medicine, 2013, 34(1): 75-77. Chinese

[15] 戴衛(wèi)鋒. 血清胰島素樣生長(zhǎng)因子-2甲胎蛋白-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶同工酶Ⅱ及異常凝血酶原聯(lián)合檢測(cè)在肝癌診斷中的價(jià)值[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2015, 25(15): 34-37.

[15] DAI W F. Clinical value of insulin-like growth factor-2 combinded with alpha-fetoprotein, -glutamyl transferase isoenzymeⅡ and abnormal prothrombin in diagnosis of hepatocellular carcinoma[J]. China Journal of Modern Medicine, 2015, 25(15): 34-37. Chinese

（吳靜 編輯）

In fl uence of laparoscopic radiofrequency ablation combined with intravenous chemotherapy on hepatoma cell growth mediated by PTEN and Wnt pathway

Hang-yuan Wu1, Wei Chen2, Ming-yu Wu3
(1.Department of Hepatology; 2.Department of Oncology, the Fifth People's Hospital, Wuxi, Jiangsu 214005, China; 3.Department of Hepatobiliary Surgery, Wuxi People's Hospital, Wuxi, Jiangsu 214021, China)

ObjectiveTo study the influence of laparoscopic radiofrequency ablation combined with intravenous chemotherapy on hepatoma cell growth mediated by PTEN and Wnt pathway.Methods90 cases of hepatocellular carcinoma patients from May 2013 to June 2016 were chosen as study subjects, all patients were divided into observation group (n= 45), control group (n= 45) randomly. Patients in observation group received laparoscopic radiofrequency ablation combined with intravenous chemotherapy, while those in control group received intravenous chemotherapy only. One week after treatment, two groups patients’ liver lesion tissue PTEN signaling pathway, Wnt signaling pathway related gene mRNA expression were detected by RT-PCR method; serum contents of tumor markers were tested by Radioimmunoassay.ResultsOne week after treatment, liver lesion tissue PTENmRNA expression was higher in observation group than that in control group, HIF-1, VEGF mRNA expression were lower in observation group than those in control group, the difference was statistically signi fi cant (P＜ 0.05); liver lesion tissue Wnt pathway related genes mRNA expression such as β-catenin, CyclinD1, c-myc, MMP-7 were lower in observation group than those in control group, the difference was statistically signi fi cant (P＜ 0.05); serum contents of tumor markers such as AFP, GGT-II, IGF-2, CA19-9 were lower in observation group than those in control group, the difference was statistically signi fi cant (P＜ 0.05).ConclusionLaparoscopic radiofrequency ablation combined with intravenous chemotherapy can inhibit the growth of HCC cells through the PTEN and Wnt pathway, which has positive clinical signi fi cance.

hepatocellular carcinoma; laparoscopic radiofrequency ablation; intravenous chemotherapy; PTEN pathway; Wnt pathway

R735.7

A

10.3969/j.issn.1007-1989.2017.04.012

1007-1989（2017）04-0067-05

2016-12-24