右江流域壯族人群酒精依賴程度與ADH和ALDH基因多態性的關聯性研究

李克明++唐漢慶++趙玉峰++趙秋華++鄭建宙++朱曉瑩++竇錫彬

【摘要】目的研究右江流域壯族人群乙醇脫氫酶（ADH）和乙醛脫氫酶（ALDH）基因多態性的分布，為篩選壯族酒精高易感性人群提供參考。

方法通過問卷進行流行病學調查，明確右江流域壯族人群飲酒狀況；采用聚合酶鏈式反應限制性片段長度多態性（PCRRFLP）技術，在分子生物學層面，檢測對照組（100例）和酗酒組（90例）ADH和ALDH基因型并明確其在樣本中的分布。

結果問卷調查結果顯示，嚴重依賴酒精的占17.8%，月均飲酒量3000 ml以上的占16.7%；對照組ADH2基因型中異常純合型（異純型）32例，占32.0%，酗酒組ADH2基因型中異純型6例，占6.7%，與對照組比較差異有統計學意義（P<0.001）。對照組ALDH2基因型中純合型20例，占20.0%，酗酒組ALDH2基因型中純合型62例，占68.9%，與對照組比較差異有統計學意義（P<0.001）。

結論低異純型ADH2基因頻數和高純合型ALDH2基因頻數在壯族酗酒人群中具有特征性，可供篩選壯族酒精高易感性人群參考。

[HJ1*3][HJ]【關鍵詞】壯族；乙醇脫氫酶；乙醛脫氫酶；基因多態性

中圖分類號：R345.41；R394.2文獻標識碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2017.01.007

[HJ1*3][HJ]

A study on relationship between alcohol dependence and gene polymorphisms of ADH and ALDH in Zhuang population in Youjiang Basin

[HJ1*3][HJ]

LI Keming，TANG Hanqing▲，ZHAO Yufeng，ZHAO Qiuhua，ZHENG Jianzhou，ZHU Xiaoying，DOU Xibin

（Key Laboratory of Ethnic Minorities of Guangxi Universities，Youjiang Medical University for Nationalities，Baise 533000，China）

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【Abstract】ObjectiveTo explore the distribution of gene polymorphisms of alcohol dehydrogenase（ADH） and acetaldehyde dehydrogenase（ALDH） in Zhuang nationality in Youjiang Basin and provide reference to filter high alcohol sensitive Zhuang nationality people.

Methods Epidemiological investigation was conducted to determine drinking status of Zhuang people in Youjiang Basin.Polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism（PCRRFLP） technique was used to detect ADH and ALDH genotypes of control group（100 cases） and excessive drinking group（90 cases） in molecular biology，and distributions of them in the sample were defined.

ResultsQuestionnaire results showed that patients who heavily depended on alcohol accounted for 17.8%，and monthly average alcohol consumption over 3000 ml accounted for more than 16.7%.In the control group，there were 32 cases of ADH2 abnormal homozygotic genetype，accounting for 32.0%，while there were 6 cases of ADH2 abnormal homozygotic genetype in the excessive drinking group，accounting for 6.7%，difference was statistically significant（P<0.001）.In the control group，there were 20 cases of ALDH2 homozygous genetype，accounting for 20.0%，while there were 62 cases of ALDH2 homozygous genetype，accounting for 68.9%，difference was statistically significant（P<0.001）.

ConclusionFrequency of low ADH2 abnormal homozygotic genetype and frequency of high ALDH2 homozygous genetype has characteristics in Zhuang people with excessive drinking，which might provide reference for filtering out the high alcohol sensitive Zhuang nationality people.

【Key words】Zhuang nationality；ADH； ALDH；gene polymorphism

酗酒對人體健康危害甚大，不但是一個衛生健康問題，而且還是一個社會問題，成為現代社會面臨的現實問題。如何篩選“酒精高易感性”或稱“酒精高暴露”人群具有研究意義，國外許多國家都已開展酒精依賴的相關研究，證明酒精依賴與遺傳、地域環境、種族、民族、文化傳統等均有關系。在我國，2002年全國營養與健康狀況調查顯示我國居民中過量飲酒比例為4.7%，其中男性為8.4%，女性為0.8%。過量飲酒的健康危害主要由酒精及其中間代謝產物乙醛引起，對肝、腎均有損害[1]，涉及乙醇脫氫酶（ADH）和乙醛脫氫酶（ALDH）2個關鍵酶，其中ADH2和ALDH2兩個亞型起主要作用，各自又分為野生型（ADH21和ALDH21）和突變型（ADH22和ALDH22）。ADH2基因和ALDH2基因在不同民族具有多態性，已有對我國漢族、回族、蒙古族、維吾爾族、白族進行了ADH2基因和ALDH2基因多態性分布比較的研究[2]。右江流域是廣西壯族人群的主要聚居地，壯族嗜好飲酒，有盛酒待客的傳統習俗。對于壯族人群ADH和ALDH基因多態性的分布研究，尚未見報道。本研究通過問卷調查右江流域壯族人群飲酒狀況和抽樣檢測酗酒人群ADH和ALDH基因多態性并明確其分布特點，為本地篩選酒精高易感性人群并采取有效的保護和干預措施提供參考。

1對象與方法

1.1研究對象

選擇右江流域90例壯族個體作為酗酒組，男72例，女18例，年齡35～63歲，平均（48.2±4.6）歲。根據酗酒的納入標準，純酒精攝入量≥125 ml/d且持續6年及以上[3]。另外選取無酗酒史壯族個體100例為對照組，男60例，女40例，年齡35～65歲，平均（48.9±5.2）歲，納入標準為每月飲酒量少于50 ml純酒精。

1.2方法

1.2.1問卷調查

參考世界衛生組織的問卷調查而設定問卷調查表，一般內容包括年齡、性別、經濟狀況、對飲酒的態度，主要內容包括是否能戒酒、最近一個月的飲酒情況、是否因飲酒而出現醫療問題、月/日飲酒量、飲酒持續時間。

1.2.2聚合酶鏈式反應限制性片段長度多態性（PCRRFLP）檢測ADH2和ALDH2基因型

采集外周靜脈血4 ml，EDTA抗凝，DNA純化試劑盒提取模板DNA，紫外分光光度計測定模板DNA含量，凍存備檢。擴增ADH2基因的引物序列：5GCATTACAGGGTCAACTTGCATG3和5CACTACACTCAGCACAGTTCTCACT3；擴增ALDH2基因的引物序列：5CAGTTAGCAAGCTACAGGGTCAAC3和5ATTGCCGATTACGTCAATTGCTCAAT3。ADH2基因擴增反應參數：95℃預變性2 min→95℃變性45 s→60℃退火40 s→72℃延伸45 s，共35個循環，最后72℃延伸7 min。ALDH2基因擴增反應參數：94℃預變性3 min→94℃變性2 min→55℃退火50 s→70℃延伸50 s，共30個循環，最后70℃延伸5 min。以限制性內切酶MboⅡ酶切后經8%聚丙烯酰胺凝膠電泳后銀染染色確定基因型。

1.3統計學方法

采用 SPSS 13.0軟件進行數據處理和統計，計數資料以百分率表示，采用χ2檢驗，檢驗水準：α=0.05。

2結果

2.1問卷調查結果

共發放問卷調查表90份，由受調查者進行現場答題，答題完畢立即回收，回收率為100%。問卷調查結果顯示嚴重依賴酒精的有16例占17.8%，對酒精存在不同程度依賴的70例占77.8%，曾經因為飲酒而住院的30例占33.3%。有23例（25.5%）覺得自己戒不了酒，飲酒史5年以下20例占22.2%，5～10年29例占32.2%，11～20年22例占24.4%，20年以上20例占22.2%。月均飲酒量的調查中500 ml以下32例占35.5%，500～1000 ml 30例占33.3%，1001～3000 ml 13例占14.4%，3000 ml以上的15例占16.7%。

2.2各組ADH2和ALDH2基因型分布比較

對照組ADH2基因型中異常純合型（異純型）32例，占32.0%，酗酒組ADH2基因型中異純型6例，占6.7%，與對照組比較，差異有統計學意義（χ2=19.000，P<0.001）。對照組ALDH2基因型中純合型20例，占20.0%，酗酒組ALDH2基因型中純合型62例，占68.9%，與對照組比較，差異有統計學意義（χ2=46.151，P<0.001）。見表1。

表1各組ADH2基因和ALDH2基因多態性分布比較表[n（%）]

組別n

ADH2基因型純合型雜合型異純型

ALDH2基因型純合型雜合型異純型

對照組10032（32.0）36（36.0）32（32.0）20（20.0）48（48.0）32（32.0）

酗酒組9058（64.4）26（28.9）6（6.7）a62（68.9）a18（2.0）10（11.1）

注：與對照組比較，aP<0.001。

3討論

酗酒不但損害身體健康也造成許多社會問題，如能篩選酒精高易感性人群并采取有效的保護和干預措施將可減少酗酒行為的發生，有利于人口素質提高和社會穩定。酒精在體內的轉化主要依靠ADH和ALDH 兩個關鍵酶，前者將酒精轉化為乙醛，后者將乙醛轉化為對人體無害的乙酸。

ADH和ALDH分為多個亞型，其中，起主要作用的是ADH2和ALDH2 兩個亞型。ADH2和ALDH2 兩個亞型各自又分為野生型ADH21和突變型ADH22以及野生型ALDH21和突變型ALDH22。ADH2基因和ALDH2基因在不同民族和個體中具有多態性，國外研究證實，就酒精轉化能力強弱而言，異純型ADH2>雜合型ADH2>純合型ADH2；乙醛轉化能力比較，純合型ALDH2>雜合型ALDH2>異純型ALDH2[4]。國內學者對漢族、回族、蒙古族、維吾爾族、白族、黎族等進行了ADH2基因和ALDH2基因多態性以及酗酒流行病學的研究[2，5]，對蒙古族、漢族、朝鮮族和鄂倫春族人群ADH基因分布情況的研究[6]表明，蒙古族ADH1B*2等位基因頻率顯著低于漢族，鄂倫春族ADH1B*1等位基因頻率要高于朝鮮族，說明不同民族間ADH基因多態位點的分布有著顯著的差異。有學者[7]對我國十個少數民族ALDH基因多態性進行了分析，表明不同民族間存在ALDH基因的多態性，但關于這兩個基因多態性在壯族群體分布規律與其他民族分布是否有差異，目前尚未有相關報道。

壯族受民族傳統文化影響，嗜好飲酒。本研究問卷調查結果顯示，嚴重依賴酒精的占17.8%，對酒精存在不同程度依賴的占77.8%，提示對嗜酒問題需要引起重視。此外，本研究表明，酗酒組異純型ADH2基因所占頻數較低、純合型ALDH2基因型所占頻數較高，與對照組比較有統計學意義，提示低異純型ADH2基因頻數和高純合型ALDH2基因頻數在酗酒人群中比較具有特征性，推測這可能與異純型ADH2將酒精轉化為乙醛能力較強以及純合型ALDH2將乙醛轉化為乙酸能力較強有關，因為具有此特征的酗酒人群，異純型ADH2將酒精轉化為乙醛能力有限，而這少量的乙醛卻可被純合型ALDH2很快轉化為乙酸，從而減少乙醛積累，由于乙醛對心血管系統和神經系統具有刺激作用[8]，能抑制人體繼續攝入酒精，客觀上起到“戒酒”作用。因此，對于此特征的酗酒人群，一方面，酒精不能很快轉化為乙醛，造成酒精蓄積；另一方面，缺乏乙醛及其所起到的抑制飲酒作用，此種狀況若延續，會由于酒精蓄積刺激而對健康造成極大損害，這部分酗酒人群應是重點關注對象。

將ADH2基因和ALDH2基因多態性用于篩選酒精高易感性人群并采取有效的保護和干預措施，減少酗酒行為，對于移風易俗、養成健康生活方式、提高健康水平具有現實意義。本研究僅從酒精依賴程度與ADH和ALDH基因多態性的關聯性進行，沒有涉及相關肝功能指標的檢測，因此，肝功能指標和基因型指標的相關性研究，需要在擴大樣本量基礎上作進一步研究。

參考文獻

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[3]姜佐寧，萬文鵬.藥物濫用[M].北京：科學出版社，1992：72.

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[5]竇慧馨，張得鈞.酒精性肝病分子發病機制研究進展[J].基因組學與應用生物學，2016，35（7）：16431647.

[6]曾芳芳，劉盛元，王濱有.乙醇脫氫酶基因多態性與飲酒行為及所致相關疾病的研究進展[J].疾病控制雜志，2008，12（2）：164167.

[7]徐玖瑾，陳良忠，金鋒，等. 十個少數民族中乙醛脫氫酶的遺傳多態性[J].人類學學報，1987，6（3）：196202.

[8]趙麗娟.酒精代謝相關基因多態性與酒依賴綜合征的關聯性研究[D].昆明：昆明醫科大學，2013.

（收稿日期：2016-11-14修回日期：2017-01-03）

（編輯：潘明志）