乙型肝炎e抗原陰性表面抗原攜帶者的危險因素及預防措施

溫 泉，施揚佳，李加位（廣西壯族自治區欽州市靈山縣：佛子鎮衛生院，廣西靈山5546；衛生監督所，廣西靈山55400；檀圩鎮中心衛生院，廣西靈山554）

·臨床與轉化醫學·

乙型肝炎e抗原陰性表面抗原攜帶者的危險因素及預防措施

溫 泉1，施揚佳2，李加位3（廣西壯族自治區欽州市靈山縣：1佛子鎮衛生院，廣西靈山535426；2衛生監督所，廣西靈山535400；3檀圩鎮中心衛生院，廣西靈山535413）

目的：探討乙型肝炎e抗原（HBeAg）陰性、表面抗原（HBsAg）陽性慢性乙型肝炎患者的危險因素及預防措施．方法：選取廣西壯族自治區欽州市靈山縣佛子鎮衛生院感染性疾病科2013／01－2015／12收治的HBeAg陰、陽性，且HBsAg陽性慢性乙型肝炎共108例患者作為研究對象，對其進行血常規、尿常規、大便常規、生化全套、肝炎全套、梅毒、艾滋、彩超、心電圖、胸片等常規檢查，應用熒光定量聚合酶鏈反應、流式細胞儀進行HBV?DNA、T淋巴細胞亞群檢測．結果：HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者常規檢查出現異常的例數與HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者比較，差異無統計學意義（P＞0．05）．HBeAg陰性、HBsAg陽性患者HBV?DNA水平與CD8＋T淋巴細胞呈正相關（r＝0．686），而與CD4／CD8比值呈負相關（r＝－0．508，P＜0．05）；與總T、CD4＋T細胞無明顯相關性．HBeAg陽性、HBsAg陽性組患者的HBV?DNA水平與總T、CD4＋T、CD8＋T淋巴細胞水平均無明顯相關性．結論：HBeAg陰性、HBsAg陽性患者HBV?DNA水平與機體細胞免疫密切相關，應充分重視此類患者的診斷與治療．

乙型肝炎；慢性；T淋巴細胞亞群；病毒；DNA

0 引言

國內大多數學者曾經認為，對慢性乙型病毒性肝炎患者而言，e抗原（HBeAg）陰轉是病情趨向好轉、穩定或無傳染性的表現之一．但隨后臨床發現，一部分HBeAg轉陰的慢性乙型肝炎患者病情反而加重．近年來，隨著人們對乙型肝炎認識的不斷加深，HBeAg陰性慢性乙型肝炎的特殊性逐漸被重視，遂有學者將其列為慢性乙型肝炎的一個獨立臨床類型，并進行相關研究．然而，迄今為止，對于HBeAg陰性乙肝患者的認識及研究仍然較為薄弱，一些機理、診斷、治療等實際問題未能充分認識并得到滿意解決［1－3］．本研究對HBeAg陰性及HBeAg陽性、HBsAg陽性患者的常規檢查、乙型肝炎病毒DNA（HBV?DNA）水平、細胞免疫狀態進行相關分析，現報道如下．

1 資料和方法

1.1 一般資料選取廣西壯族自治區欽州市靈山縣佛子鎮衛生院感染性疾病科2013／01－2015／12收治的慢性乙型肝炎患者108例，其中HBeAg陰性60例，HBeAg陽性48例；輕度40例，中度32例，重度36例；男88例，女20例；年齡18～68（平均40．5± 5．0）歲．

1.2 診斷標準HBeAg陰性、HBsAg陽性慢性乙型肝炎的診斷均符合中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會、肝病學分會2005年聯合制訂并于2010年修訂的慢性乙型肝炎防治指南［4－5］中的診斷標準．

1.3 方法

1．3．1 常規檢測 所有患者入院后均行血常規、尿常規、大便常規、生化全套、肝炎全套、梅毒、艾滋、彩超、心電圖、胸片等常規檢查．

1．3．2 HBV?DNA水平、細胞免疫狀態的檢測 患者于入院后第2天清晨抽取空腹靜脈抗凝血5 mL，使用美國Coulter流式細胞分析儀進行T淋巴細胞亞群檢測，每份標本均重復操作2次后取平均值．HBV?DNA的檢測采用聚合酶鏈反應結合熒光探針的體外DNA擴增、檢測技術．PCR診斷試劑盒由中山大學達安基因診斷中心生產，在核酸擴增儀（PE5700，美國）上擴增．分析HBeAg陰性、HBeAg陽性患者的HBV?DNA水平與T淋巴細胞亞群之間的相關情況．

1.4 統計學處理采用SPSS16．0統計學軟件對數據進行分析，將HBV?DNA水平數值進行對數轉換，再采用Spearman法與T淋巴細胞亞群進行相關性分析，P＜0．05表示差異有統計學意義．

2 結果

2．1 HBeAg陰性、HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者常規檢查項目比較HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者常規檢查出現異常的例數與HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者例數比較，差異無統計學意義（P＞0．05，表1）．

表1 HBeAg陰性、HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者常規檢查項目比較

2．2 HBV?DNA水平與T淋巴細胞亞群的相關性分析HBV?DNA水平與總T淋巴細胞、CD4＋／CD8＋比值、CD4＋T、CD8＋T細胞均不存在相關性（P＞0．05，表2）．

表2 HBV?DNA水平與T淋巴細胞亞群的相關性

表2 HBV?DNA水平與T淋巴細胞亞群的相關性

2．3 HBeAg陰性乙肝患者HBV?DNA與T淋巴細胞亞群的相關性分析在60例HBeAg陰性乙肝患者中，HBV?DNA與T細胞中的總T、CD4＋T無相關性，但與CD8＋T呈正相關（P＜0．05）；而與CD4＋／CD8＋呈負相關（P＜0．05，表3）．

表3 HBeAg陰性患者HBV?DNA與T淋巴細胞亞群的相關性

表3 HBeAg陰性患者HBV?DNA與T淋巴細胞亞群的相關性

2．4 HBeAg陽性乙肝患者HBV?DNA與T淋巴細胞亞群的相關性分析在48例HBeAg陽性乙肝患者中，HBV?DNA與T細胞亞群中的總T、CD4＋／CD8＋、CD4＋T、CD8＋T均無相關性（P＞0．05，表4）．

表4 HBeAg陽性患者HBV?DNA與T淋巴細胞亞群的相關性

表4 HBeAg陽性患者HBV?DNA與T淋巴細胞亞群的相關性

3 討論

迄今為止，乙型病毒性肝炎的發病機制尚未完全明確．機體感染HBV后，病情嚴重程度、臨床表現特征等很大程度上取決于HBV病毒誘發的機體免疫反應．以前的大多數觀點認為，HBV在機體內處于持續存在且復制的狀態時，可分泌HBeAg；隨著患者病情的發展、轉歸，HBV停止復制時，抗HBe出現和／或HBeAg轉陰．但是，近年來隨著對HBV及慢性乙型肝炎研究的深入，越來越多的臨床資料［6－7］表明，一部分HBeAg陰性的HBV感染者，不僅HBV?DNA呈高滴度狀態，而且病情進展迅速．臨床與基礎研究［8－9］表明，HBeAg陰性、HBsAg陽性在慢性乙型肝炎患者中所占的比例逐年增高，HBeAg陰性患者在臨床特征、抗病毒治療、預后等諸多方面與HBeAg陽性患者比較，差異具有統計學意義．HBeAg陰性、HBsAg陽性患者HBV存在CP區（基本核心C基因啟動子）變異和／或前C區基因突變，這種形式突變后的基因，盡管對HBV復制沒有任何影響，但是能直接影響HBeAg的合成和分泌，該現象導致的結局是在HBV仍然復制的患者血清中檢測不到HBeAg的存在．

對HBeAg陰性、HBsAg陽性乙肝患者而言，大量研究［10－11］表明，HBV?DNA水平與機體肝臟炎癥、病理損害程度呈正相關，同時變異后HBV的大量復制與肝臟病理損害存在著密切的相關性．但尚未明確機體肝臟這種病理損害是變異的HBV對肝細胞的直接損害，還是該變異的HBV通過誘導機體一系列的異常免疫應答而致的免疫病理損傷？本研究結果顯示，HBeAg陰性、HBsAg陽性慢性乙型肝炎患者的HBV?DNA滴度與CD8＋T淋巴細胞呈正相關，而與CD4＋／CD8＋比值呈負相關．該結果提示，HBV病毒的增殖與活化能夠充分激活機體的細胞免疫，這體現在CD8＋T淋巴細胞活性的增高，活化后的CD8＋T可攻擊攜帶有HBV的肝細胞，進而通過此途徑導致機體肝細胞的免疫病理損傷．然而，對于HBeAg陽性、HBsAg陽性慢性乙型肝炎患者，本研究顯示，HBV?DNA滴度與機體細胞免疫水平不存在任何相關性，此結果與文獻報道［1－2，12－13］中的相關結論一致．有學者認為，導致該結果的原因可能與機體內HBeAg的持續存在相關，機體內HBeAg呈持續存在狀態時，其對HBV病毒產生某種特殊耐受性，此種耐受能降低宿主對HBV病毒的抗感染免疫應答［14］．

綜上所述，HBeAg陰性、HBsAg陽性的慢性乙型肝炎患者，其肝臟的免疫病理損害程度與HBV?DNA滴度密切相關，其HBV?DNA水平不僅影響著患者的診斷與治療，而且左右著疾病的發展與預后［15］，因此，HBeAg陰性乙肝患者的抗病毒、免疫調節治療等相關措施應引起臨床醫生的足夠重視．

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The risk factors and preventive measures of HBsAg carriers of HBeAg?negative hepatitis B

WEN Quan1，SHI Yang?Jia2，LI Jia?Wei3

1Fozi Township Hospital，lingshan 535426；2Health supervision Institute，Lingshan 535400；3Tanxu Central Health Hospital，Lingshan 535413，China

AIM：To investigate the risk factors and preventive measures of HBsAg carriers of HBeAg?negative hepatitis B．METHODS：A total of 108 cases of patients with HBeAg?nega?tive，HBeAg?positive and HBsAg?positive chronic hepatitis B admitted into Prevention and Care Group of Fozi Township Hospital from January 2013 to December 2015 were selected as the objects of study．All the patients was given routine examinations such as blood routine，urine routine，routine stool，a full set of biochemistry examination，a full set of hepatitis examination，syphilis，HIV，color doppler ultrasound，electrocardiogram，chest radiograph and so on．HBV?DNA level was tested by fluorescent quantity PCR，and T lymphocyte subsets were examined by flow cytometry．RESULTS：There's no significant statistical difference on abnormal cases number bewtween patients with HBeAg?negative chronic hepatitis B and patients with HBeAg?positive chronic hepatitis B（P＞0．05）．The HBV?DNA level in patients with HBeAg?nega?tive，HBsAg?positive chronic hepatitis B had a postive correlation with the CD8＋T lymphocyte（r＝0．686，P＜0．05），a negative correlation with the ratio of CD4＋／CD8＋T lymphocyte（r＝－0．508，P＜0．05），and no remarkable correlation with the total T cells and CD4＋T lymphocyte．However，for patients with HBeAg?positive，HBsAg?positive chronic hepatitis B，there was no correlation betweenthe HBV?DNA level and the total T cells，CD4＋T lympho?cyte，CD8＋T lymphocyte．CONCLUSION：HBV?DNA level is closely correlated with the cellular immune status in the patients with HBeAg?negative，HBsAg?positive chronic hepatitis B，it is necessary to pay attention to the diagnosis and treatment of these patients．

hepatitis B；chronic；T lymphocyte subsets；virus；DNA

R512．6＋2；Q523

A

2095?6894（2017）03?53?03

2016－09－25；接受日期：2016－10－13

溫 泉．E?mail：wagfsx＠163．com