安徽省池州市2014-2015年嬰幼兒病毒性腹瀉標本檢測結果及杜寶拉療效觀察

楊曉光，羊禮榮，顧 倩

(安徽省池州市人民醫院兒科 247100)

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安徽省池州市2014-2015年嬰幼兒病毒性腹瀉標本檢測結果及杜寶拉療效觀察

楊曉光，羊禮榮，顧 倩

(安徽省池州市人民醫院兒科 247100)

目的 觀察安徽省池州市2014-2015年嬰幼兒病毒性腹瀉病原體的分布狀況及杜寶拉治療的療效。方法 將該院2014-2015 年收治的病毒性腹瀉嬰幼兒183例作為研究對象，分為觀察組和對照組，對照組采用普通止瀉藥物，觀察組采用杜寶拉，對比兩組治療療效。將183例患兒糞便樣品送市疾病預防控制中心檢測，采用ELISA檢測人輪狀病毒(HRV)抗原，RT-PCR法檢測基因分型。結果 觀察組總有效率為88.04%(81/92)，對照組總有效率64.84%(59/91)，差異有統計學意義(P<0.05)。病毒性腹瀉的主要病原體是人杯狀病毒(HuCV)和HRV，G血清型以G3、G9型為主，P基因型以P8、P4型為主。結論 池州市嬰幼兒病毒性腹瀉的主要病原體是HuCV和HRV，杜寶拉較普通腹瀉藥物療效更好。

病毒性腹瀉；杜寶拉；療效觀察

嬰幼兒腹瀉病是我國最常見的一組由多病原、多因素引起的消化道綜合征，主要臨床表現為大便次數增多、大便性狀發生改變[1]。引起嬰幼兒病毒性腹瀉的主要病原有輪狀病毒、杯狀病毒、星狀病毒和腸道腺病毒[2-5]。本文觀察杜寶拉治療病毒性腹瀉嬰幼兒的療效，并對其糞便標本進行ELISA、RT-PCR檢測[6-7]，觀察病原體的分布狀況，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014-2015年本院收治的病毒性腹瀉嬰幼兒183例為研究對象，患兒均為5 歲以下因腹瀉住院的兒童，將其分為兩組，對照組91例采用普通治療腹瀉用藥，觀察組92例采用杜寶拉。將183例患兒糞便樣品送市疾病預防控制中心檢測，收集并記錄患兒基本信息于腹瀉病例調查表，將腹瀉糞便樣品置于-20 ℃保存備用[8-9]。病毒性腹瀉診斷標準：大便次數增加，每天3 次或者3次以上；大便性狀發生明顯改變。檢測依據、檢測項目及檢測儀器依據《全國病毒性腹瀉監測方案(2007修訂版)》，檢測項目為人輪狀病毒(HRV)核酸、人杯狀病毒(HuCV)核酸、星狀病毒(AstV)核酸、腺病毒(AdV)核酸。

1.2 儀器與試劑 全自動核酸分離純化儀(MagNA Pure 96，瑞士ROCHE)；病毒核酸提取試劑盒(RB050,VR100，Geneaid Biotech)；酶標儀(SM800，美國Thermo公司)；洗板機(Wellwash，美國Thermo公司)；生物安全柜(1374，美國Thermo公司)；熒光定量PCR儀(AriaMx，安捷倫公司)；PCR儀(ProFlex 3 x 32 well PCR system，ABI公司)；臺式高速離心機(5427 R，德國Eppendorf公司)；Taq 酶(Promega M1665S，上海 Promega 公司)；ELISA試劑盒(DAKO，美國Proteintech公司)；引物合成(CX160106298-S，北京華大基因公司)；反轉錄試劑盒(K1622，美國Fermentas公司)；藥物杜寶拉(國藥準字H20050411，四川百利藥業集團)。

1.3 方法

1.3.1 用藥治療 兩組臨床治療中均給予靜脈補液糾正脫水及退熱等治療[10]。觀察組患兒服用杜拉寶，每次1袋，1日3次；對照組選用普通止瀉藥物。

1.3.2 病毒核酸的提取 加入適量磷酸鹽緩沖液(PBS)于183份糞便標本，用臺式離速離心機離心，制備出10% 的大便標本懸液上清備用。取 400 μL前期處理好的大便標本上清液，使用病毒核酸提取試劑盒和全自動核酸分離純化儀進行核酸提取，按說明書進行操作[11]。

1.3.3 病毒檢測 首先ELISA檢測HRV，結果為陽性的標本進行RT-PCR基因分型，然后用RT-PCR檢測糞便標本的HuCV、AstV，PCR檢測AdV。

1.3.4 瓊脂糖凝膠電泳 取10 μL產物在EB膠上進行電泳，依據有無目的條帶判斷結果是否為陽性，以及判別病毒株類型。

1.3.5 療效標準 根據1998年全國腹瀉病防治學術研討會通過的急性腹瀉病的療效標準判定療效[12]。治療后3 d內患兒糞便性狀及次數恢復正常，全身癥狀消失為顯效；3 d時糞便性狀及次數明顯好轉，全身癥狀改善為有效；糞便性狀、次數及全身癥狀均無好轉甚至惡化為無效。

1.4 統計學處理 采用SPSS21.0軟件進行統計分析，兩組療效比較采用非參數/t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組療效比較 觀察組總有效為88.04% (81/92)，對照組總有效率64.84%(59/91)，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組療效比較

2.2 患兒糞便病毒檢測情況 見表2。

2.3 HRV G分型分布 183份標本中G血清型以G3(43.17%)、G9(33.88%)型為優勢株。見表3。

2.4 HRV P 分型分布 183份標本中P基因型以 P8(54.1%)、P4 (18.03%)型為優勢株。見表4。

表2 患兒糞便病毒檢測情況

表3 HRV G分型分布

表4 HRV P分型分布

3 討 論

病毒性腹瀉是嬰幼兒時期的常見病和多發病， 在我國是危害兒童健康的主要疾病[13-14]。導致嬰幼兒病毒性腹瀉的主要病原體有HRV、HuCV包括諾如病毒、沙波病毒，HRV與HuCV組成病毒性腹瀉主要的病原體，此外還有AstV、AdV等。這些病毒在不同的地區、不同時期、不同人群中分布不同，且病毒性腹瀉的病原體構成存在差異[15-16]。

為了探討安徽省池州市嬰幼兒病毒性腹瀉的病原體分布狀況，本研究對本院2014-2015年收治的病毒性腹瀉嬰幼兒的糞便標本進行檢測，結果顯示主要病原體是HRV和HuCV，且HRV所占比例最大，與其他地區檢測結果相一致[17-18]。通過對所測病毒進行分型，結果顯示G型的病毒株以G3(43.17%)、G9(33.88%)型為優勢株，P型的病毒株以P8(54.1%)、P4(18.03%)型為優勢株，血清型分布情況與文獻[19]報道的亞洲地區HRV的主要分型相一致。

本研究結果顯示，杜拉寶的有效率大于普通止瀉藥物，差異有統計學意義(P<0.05)。且臨床反饋顯示，患兒對杜拉寶的耐受性要比普通止瀉藥好，無明顯不良反應，該藥物臨床上對癥治療嬰幼兒腹瀉安全有效。

本研究由于條件限制，沒有對本地區其他醫院在2014-2015年嬰幼兒病毒性腹瀉的檢測和治療資料進行收集，所選樣本僅局限在本院，因此所得結論還需要進一步論證。

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楊曉光(1979-)，主治醫師，本科，主要從事兒科重癥患兒的診治工作。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.11.035

R720.597

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1671-8348(2017)11-1542-03

2016-10-24

2017-01-27)