鈣離子系統性負誤差原因的探究及排除

摘要：目的 探究鈣離子結果出現系統性負誤差的原因并加以解決。方法 使用同種校準物、質控物及同廠家試劑，A1、A2組為奧林帕斯AU640全自動生化分析儀，B組為貝克曼5800全自動生化分析儀，B1、B2分別為系統性負誤差之前、之后的結果。結果 A1組與B1組結果相差顯著（P<0.05），A2與B2組結果無顯著性差異（P>0.05）。結論 鈣離子結果出現系統性負誤差的原因不是由常見的水質問題引起，而是由于雙波長中參比波長設置的缺失造成，參數設置的查對、驗證不能是思維的死角。

關鍵詞：雙波長 ；參比波長 ；水質； 系統性負誤差；鈣離子

生化檢測中鈣離子受水質影響較大，常常因去離子交換樹脂和反滲膜等原因造成結果的誤差[1]。因此在發現鈣離子質控結果及檢測結果出現系統性負誤差時，我們在排除試劑原因，通過重復定標、更換質控物等方法不能找到原因時，首先懷疑由水質的干擾和影響引起，因此更換離子交換樹脂和反滲膜，故障卻仍未消除，確定并非由水質引起。后在重新檢查參數設置時方發現是由參數的改動，導致雙波長中參比波長設置的缺失造成，現與各位檢驗同仁交流。

1 資料與方法

1.1一般資料 我院2016年1月5日發現貝克曼5800全自動生化分析儀（B組）鈣離子質控結果結果及檢測結果偏低，將34份標本在奧林帕斯AU640全自動生化分析儀（A1組）比對，結果相差較大。2月17日故障原因排除后的41份標本，貝克曼5800結果B2組與奧林帕斯AU640的A2組比對。

1.2 標本及試劑 將我院住院及門診病人血清，分別在倆臺全自動生化分析儀檢測。均使用北京利德曼的單試劑鈣離子檢測試劑盒，以及廠家配備的校準品及質控品。

1.3判斷標準 質控品（2.25±0.27）檢測結果是否良好在控為判斷標準。

1.4統計學方法 所有數據采用SPSS 17.0統計學軟件進行處理，數據用均數±標準差表示，計量資料采用配對t檢驗，以P<0.05為差異有顯著性。

2 結果

2.1 故障排除前：A1組2.21.1±0.19，B1組1.79±0.23，結果相差顯著（P<0.05），A1組質控結果2.26，良好在控；B1質控結果1.88，失控。

2.2 故障排除后：A1組2.36±0.24，B1組2.31±0.21，結果無顯著性差異（P>0.05），A1組質控結果2.29，良好在控；B1質控結果2.21，良好在控。

3 討論

生化檢驗結果的準確性很大程度上依靠質控品的監測，從溯源性上講，應盡量使用同廠家的基質相近的校準品及質控品，即AAA模式 [2-4]。而事實上，多數實驗室采用AAB甚至ABC模式。因多種因素，有些檢驗部門往往不注重質控品結果的即時查看，總在部分項目檢驗結果明顯出現異常時，才回過來看質控結果，這是絕對不可取的。當首次發現質控結果出現異常時，因AU640質控結果的良好在控，考慮到鈣離子檢測原理及堿性試劑的特點，我們首先更換同批號試劑，誤差仍然存在，重新定標結果仍未改善。在同試劑、同校準品及同質控品的情況下，AU640結果的良好在控。倆臺生化儀唯一不同的是并未使用同臺水機，這讓我們懷疑結果的誤差由水質引起。因此更換離子交換樹脂和反滲膜，故障卻仍未消除，找不到故障原因，無奈中再次查看參數設置，才發現參數已有改動，只設了分析波長600nm，而參比波長700nm設置缺失。

雙波長分光光度法能消除干擾或共處組分的干擾以及背景吸收的影響。在單位時間內使兩條波長不同的光束λ1和λ2交替照射同一個溶液，由檢測器測出的吸收度是這兩個波長下吸收度的差值△A，△A與被測定物質的濃度成正比。雙波長分光光度法的關鍵是正確選擇兩波長λ1、λ2，要求被測組分D在兩波長處的△A足夠大，而干擾組分G和背景在兩波長應有相同的吸光度（△A=0）。為滿足上述要求，一般是將λ2選在待測組分的最大吸收波長，λ1是選在干擾組分等吸收波長。基于此原理，參比波長的設置缺失造成了待測組分的最大吸收波長的缺失，不能消除干擾組分及背景的影響，造成了結果的誤差。鈣試劑為紫色的耦合試劑，更需要雙波長分光光度法來消除修正這種背景影響，參比波長的設置缺失就造成了誤差的存在。

因離子測定受水質影響和干擾巨大，但結果出現問題時，很容易忽略其他因素。盲目的更換制水設施，不僅增加了科室的支出，加大檢驗成本，而且不能解決誤差的原因。而當檢驗結果出現異常時，我們通常最不會考慮的就是參數設置的因素。但工作人員無意的點擊和疏忽使得這一現象并不可避免，我們也并不是首次遇到。剛開始使用貝克曼5800分析儀時，所做項目LDH結果總是偏低，廠家周末過來調試，結果周一所有LDH全是負值，更換試劑重新定標未果，最后發現工程師本意將K值9964改為11025誤改成1025，改后理所當然的認為結果變好，甚至沒做質控品監控，也未做標本驗證。由于疏忽、經驗之談及責任心不夠等問題是檢驗分析中誤差的主要原因[5]。因此參數設置問題不應該是我們思維的死角，當生化結果發生異常時，參數的查看、驗證是很有必要的。

參考文獻：

[1]謝祖榮，等.20人份鈣磷鎂系統性負誤差的分析及消除[J].當代醫學，2012，18（5）：68-69.

[2]張瑞，李金明.如何正確使用臨床檢驗校準物質[J].中華檢驗醫學雜志.2009，32（1）：10-14

[3]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版，南京：東南大學出版社，2006：75-85，552-555

[4]謝祖榮.408次腦脊液氯離子結果及校準物的探討[J].中國實用醫藥，2013，8（3）：125-126

[5]熊立凡，劉成玉.臨床檢驗基礎[M].第4版.北京：人民衛生出版社，2007：1-4