鈣離子系統(tǒng)性負(fù)誤差原因的探究及排除

摘要：目的 探究鈣離子結(jié)果出現(xiàn)系統(tǒng)性負(fù)誤差的原因并加以解決。方法 使用同種校準(zhǔn)物、質(zhì)控物及同廠家試劑，A1、A2組為奧林帕斯AU640全自動(dòng)生化分析儀，B組為貝克曼5800全自動(dòng)生化分析儀，B1、B2分別為系統(tǒng)性負(fù)誤差之前、之后的結(jié)果。結(jié)果 A1組與B1組結(jié)果相差顯著（P<0.05），A2與B2組結(jié)果無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)論 鈣離子結(jié)果出現(xiàn)系統(tǒng)性負(fù)誤差的原因不是由常見的水質(zhì)問題引起，而是由于雙波長中參比波長設(shè)置的缺失造成，參數(shù)設(shè)置的查對(duì)、驗(yàn)證不能是思維的死角。

關(guān)鍵詞：雙波長 ；參比波長 ；水質(zhì) ；系統(tǒng)性負(fù)誤差 ；鈣離子

生化檢測(cè)中鈣離子受水質(zhì)影響較大，常常因去離子交換樹脂和反滲膜等原因造成結(jié)果的誤差[1]。因此在發(fā)現(xiàn)鈣離子質(zhì)控結(jié)果及檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)系統(tǒng)性負(fù)誤差時(shí)，我們?cè)谂懦噭┰颍ㄟ^重復(fù)定標(biāo)、更換質(zhì)控物等方法不能找到原因時(shí)，首先懷疑由水質(zhì)的干擾和影響引起，因此更換離子交換樹脂和反滲膜，故障卻仍未消除，確定并非由水質(zhì)引起。后在重新檢查參數(shù)設(shè)置時(shí)方發(fā)現(xiàn)是由參數(shù)的改動(dòng)，導(dǎo)致雙波長中參比波長設(shè)置的缺失造成，現(xiàn)與各位檢驗(yàn)同仁交流。

1 資料與方法

1.1一般資料 我院2016年1月5日發(fā)現(xiàn)貝克曼5800全自動(dòng)生化分析儀（B組）鈣離子質(zhì)控結(jié)果結(jié)果及檢測(cè)結(jié)果偏低，將34份標(biāo)本在奧林帕斯AU640全自動(dòng)生化分析儀（A1組）比對(duì)，結(jié)果相差較大。2月17日故障原因排除后的41份標(biāo)本，貝克曼5800結(jié)果B2組與奧林帕斯AU640的A2組比對(duì)。

1.2 標(biāo)本及試劑 將我院住院及門診病人血清，分別在倆臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。均使用北京利德曼的單試劑鈣離子檢測(cè)試劑盒，以及廠家配備的校準(zhǔn)品及質(zhì)控品。

1.3判斷標(biāo)準(zhǔn) 質(zhì)控品（2.25±0.27）檢測(cè)結(jié)果是否良好在控為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)量資料采用配對(duì)t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 故障排除前：A1組2.21.1±0.19，B1組1.79±0.23，結(jié)果相差顯著（P<0.05），A1組質(zhì)控結(jié)果2.26，良好在控；B1質(zhì)控結(jié)果1.88，失控。

2.2 故障排除后：A1組2.36±0.24，B1組2.31±0.21，結(jié)果無顯著性差異（P>0.05），A1組質(zhì)控結(jié)果2.29，良好在控；B1質(zhì)控結(jié)果2.21，良好在控。

3 討論

生化檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性很大程度上依靠質(zhì)控品的監(jiān)測(cè)，從溯源性上講，應(yīng)盡量使用同廠家的基質(zhì)相近的校準(zhǔn)品及質(zhì)控品，即AAA模式 [2-4]。而事實(shí)上，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室采用AAB甚至ABC模式。因多種因素，有些檢驗(yàn)部門往往不注重質(zhì)控品結(jié)果的即時(shí)查看，總在部分項(xiàng)目檢驗(yàn)結(jié)果明顯出現(xiàn)異常時(shí)，才回過來看質(zhì)控結(jié)果，這是絕對(duì)不可取的。當(dāng)首次發(fā)現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果出現(xiàn)異常時(shí)，因AU640質(zhì)控結(jié)果的良好在控，考慮到鈣離子檢測(cè)原理及堿性試劑的特點(diǎn)，我們首先更換同批號(hào)試劑，誤差仍然存在，重新定標(biāo)結(jié)果仍未改善。在同試劑、同校準(zhǔn)品及同質(zhì)控品的情況下，AU640結(jié)果的良好在控。倆臺(tái)生化儀唯一不同的是并未使用同臺(tái)水機(jī)，這讓我們懷疑結(jié)果的誤差由水質(zhì)引起。因此更換離子交換樹脂和反滲膜，故障卻仍未消除，找不到故障原因，無奈中再次查看參數(shù)設(shè)置，才發(fā)現(xiàn)參數(shù)已有改動(dòng)，只設(shè)了分析波長600nm，而參比波長700nm設(shè)置缺失。

雙波長分光光度法能消除干擾或共處組分的干擾以及背景吸收的影響。在單位時(shí)間內(nèi)使兩條波長不同的光束λ1和λ2交替照射同一個(gè)溶液，由檢測(cè)器測(cè)出的吸收度是這兩個(gè)波長下吸收度的差值△A，△A與被測(cè)定物質(zhì)的濃度成正比。雙波長分光光度法的關(guān)鍵是正確選擇兩波長λ1、λ2，要求被測(cè)組分D在兩波長處的△A足夠大，而干擾組分G和背景在兩波長應(yīng)有相同的吸光度（△A=0）。為滿足上述要求，一般是將λ2選在待測(cè)組分的最大吸收波長，λ1是選在干擾組分等吸收波長。基于此原理，參比波長的設(shè)置缺失造成了待測(cè)組分的最大吸收波長的缺失，不能消除干擾組分及背景的影響，造成了結(jié)果的誤差。鈣試劑為紫色的耦合試劑，更需要雙波長分光光度法來消除修正這種背景影響，參比波長的設(shè)置缺失就造成了誤差的存在。

因離子測(cè)定受水質(zhì)影響和干擾巨大，但結(jié)果出現(xiàn)問題時(shí)，很容易忽略其他因素。盲目的更換制水設(shè)施，不僅增加了科室的支出，加大檢驗(yàn)成本，而且不能解決誤差的原因。而當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)異常時(shí)，我們通常最不會(huì)考慮的就是參數(shù)設(shè)置的因素。但工作人員無意的點(diǎn)擊和疏忽使得這一現(xiàn)象并不可避免，我們也并不是首次遇到。剛開始使用貝克曼5800分析儀時(shí)，所做項(xiàng)目LDH結(jié)果總是偏低，廠家周末過來調(diào)試，結(jié)果周一所有LDH全是負(fù)值，更換試劑重新定標(biāo)未果，最后發(fā)現(xiàn)工程師本意將K值9964改為11025誤改成1025，改后理所當(dāng)然的認(rèn)為結(jié)果變好，甚至沒做質(zhì)控品監(jiān)控，也未做標(biāo)本驗(yàn)證。由于疏忽、經(jīng)驗(yàn)之談及責(zé)任心不夠等問題是檢驗(yàn)分析中誤差的主要原因[5]。因此參數(shù)設(shè)置問題不應(yīng)該是我們思維的死角，當(dāng)生化結(jié)果發(fā)生異常時(shí)，參數(shù)的查看、驗(yàn)證是很有必要的。

參考文獻(xiàn)：

[1]謝祖榮，等.20人份鈣磷鎂系統(tǒng)性負(fù)誤差的分析及消除[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2012，18（5）：68-69.

[2]張瑞，李金明.如何正確使用臨床檢驗(yàn)校準(zhǔn)物質(zhì)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志.2009，32（1）：10-14

[3]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版，南京：東南大學(xué)出版社，2006：75-85，552-555

[4]謝祖榮.408次腦脊液氯離子結(jié)果及校準(zhǔn)物的探討[J].中國實(shí)用醫(yī)藥，2013，8（3）：125-126

[5]熊立凡，劉成玉.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：1-4