免疫組化檢查在病理診斷中的應用及其意義

熱米拉·阿不都克力木，葛春鳴

（新疆伊犁州新華醫院病理科，新疆 伊犁 835000）

免疫組化檢查在病理診斷中的應用及其意義

熱米拉·阿不都克力木，葛春鳴

（新疆伊犁州新華醫院病理科，新疆 伊犁 835000）

目的 探討免疫組化檢查在病理診斷中的應用及其臨床意義。方法 選取2015年7月～2016年9月間我院門診收入的59例淋巴腫瘤患者的病例檔案，患者均采用免疫組化技術進行病理檢測。結果 59例患者經免疫組化檢查確診結果顯示出有57例患者檢測成功，成功率為96.61%（57/59），其中淋巴腫瘤轉移者45例，原發性淋巴腫瘤者12例；其余2例為檢測失敗，需進一步進行全面診斷。結論 本研究探討了免疫組化在病理診斷中的應用情況，該技術可有效提升轉移性腫瘤檢測率及腫瘤確診情況，為臨床的治療惡性腫瘤提供了可靠的病理學理論參考，具有重要的臨床應用價值。

免疫組化檢查；病理診斷；應用

免疫組化是應用免疫基本原理[1]，通過化學反應促使熒光素、酶、金屬離子或同位素等顯色劑將標記抗體顯色而確定組織細胞內抗原，進而對組織來源進行定位、定性和定量等精確分析[2]。現本文報告如下：

1 資料及方法

1.1 臨床資料

選取2015年7月～2016年9月間我院門診收入的59例淋巴腫瘤患者的病例檔案，其中男性34例，女性25例；年齡36-69歲，年齡均值（42.34±3.21）歲。59例患者均因頸部淋巴結腫大且無痛性、食欲減退、發熱、盜汗及易疲勞等癥狀到院進行診治。

1.2 方法

本組59例患者均采用免疫組化技術進行病理檢測。結合其具體病癥表現及各種體征決定對其實施免疫組化技術，以進行病理檢測。免疫組化技術的具體部操作為：石蠟切片常規脫蠟至水；給予緩沖液洗3 min*2次；為降低因內源性過氧化物酶而造成非特異性的背景染色，應將切片放3%H2O2室溫中進行5～15 min的孵育；給予緩沖液洗5 min*2次；滴入Ultra V Block后[3]，于室溫下行5 min的孵育，目的是封閉非特異性背景染色（注：孵育時間應小于10 min，以免降低特異性染色效果）滴入增強子，給予20 min室溫下孵育；給予緩沖液洗5 min*2次；滴入酶標二抗，行30 min的室溫孵育（其對光較敏感，盡量避免使其受到不必要的光暴露，應儲存于不透明瓶內）；給予緩沖液洗5 min*2次；應用顯色劑進行顯色，了先向1 ml AEC Plus Substrate中滴1～2滴的AEC Plus Chromogen，待混勻后再滴到切片上，孵育3～15 min（具體時間可由染色的深淺程度決定）；用自來水進行充分沖洗切片，再復染-脫水-透明-封片。

1.3 特點及應用

1.3.1 特點

1）特異性強

免疫學基本原理決定了抗原和抗體間結合會具有高度的特異性，因此，免疫組化是特定顯示出組織細胞中的抗原。當組織細胞中存有交叉抗原，會出現特定的交叉反應。

2）敏感性高

由于ABC法、SP三步法的創新出現，抗體可稀釋至千倍甚至億倍，且仍可與抗原結合反應，愈加方便應用于常規病理診斷。

1.3.2 應用范圍

目前，免疫組織檢查可應用于惡性腫瘤診斷及鑒別診斷；定位轉移性惡性腫瘤；進一步對腫瘤病理分型；多種標志物鑒別診斷軟組織腫瘤；及時檢測出微小轉移灶，指導確定治療方案及包括手術范圍。

1.4 陽性判定標準

陽性免疫特征：弱（+）、中（++）、強（+++）三級。免疫熒光法則出現淺綠色、顯綠色和耀眼亮綠色的熒光；而免疫酶標記則為淡黃色細顆粒、棕黃色顆粒和褐黃色粗顆粒，后者耀眼易見。

陽性細胞學特征：胞膜型、胞核型、胞質型、微絨毛型、復合型五種。

陽性組織學特征：局灶型、彌漫型、片塊型、網狀型、腺管型、腔緣型、菊團型等。

陽性強度特征：依照抗原含量分為1分弱陽性（+）、2分中等陽性（++）；3分強陽性（+++）；依照陽性細胞數量分為弱陽性（+，總數≤25%）；中等陽性（++，總數25%-49%）；強陽性（+++，總數≥50%）。

2 結 果

依據上述判定標準，本組59例疑似為患淋巴腫瘤患者均給予免疫組化檢查的結果如表1所示。

表1 免疫組化檢查結果情況（n，%）

57例患者檢測成功：其中淋巴腫瘤轉移者45例（其中21例中等陽性（++）、微絨毛型、片塊型；24例強陽性（+++）、復合型、彌漫型及網狀型），原發性淋巴腫瘤者12例（均為弱（+）、局灶型、局灶型）；其余2例為檢測失敗，需進一步進行全面診斷。

3 討 論

由于淋巴瘤最難進行病理診斷及明確分型，所以在應用免疫組化方案進行病理診斷淋巴瘤時，必須用2種及以上的標記物抗體，才能精確反應出患者體內淋巴瘤的各種亞型信息。此技術在生物學領域，尤其在醫學基礎和臨床研究上可發揮重要的影響作用。免疫組化技術最大優勢是定位及定性分析，其可通過抗原抗體結合反應和呈色反應，可被熒光素精準定位，進而可定性觀察其形態與功能，以對病理學檢查行定量分析。因此，免疫組織化檢查可對惡性腫瘤疾病做到早發現、早確診及早鑒別，通過確定轉移性惡性腫瘤的原發位，以進一步對病理進行分型；還可及時發現微小型轉移灶，是爭取最佳治療時間及提高療效的關鍵，因此，對其診斷價值至關重要。

[1] 楊 勇.免疫組化技術在病理診斷中的應用[J].《心血管病防治知識》,2016(7):5-7.

[2] 李春飛.淺談免疫組化技術在病理診斷中的應用價值[J].《醫學信息》,2014(39):514-514.

本文編輯：吳 衛

R730.4

B

ISSN.2095-8242.2017.05.909.02