金黃色葡萄球菌腸毒素研究進(jìn)展

劉保光?宋博利?李進(jìn)福

金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一種革蘭陽(yáng)性菌，廣泛分布于自然界，寄生于人類(lèi)和畜禽動(dòng)物，是一種常見(jiàn)的條件致病菌，能引起包括食物中毒、非感染性疾病和中毒性休克綜合征等嚴(yán)重疾病。截止目前，已發(fā)現(xiàn)的超過(guò)20種金黃色葡萄球菌腸毒素，本文就腸毒素的特性、致病性及其檢測(cè)方法等方面進(jìn)行了闡述，旨在為臨床治療和食品監(jiān)控提供一定的指導(dǎo)意義。

一、腸毒素的特性

金黃色葡萄球菌可以產(chǎn)生多種類(lèi)型葡萄球菌腸毒素（SEs），根據(jù)發(fā)現(xiàn)時(shí)間先后順序按照英文字母進(jìn)行區(qū)分，目前已發(fā)現(xiàn)20多種腸毒素（SEA～SElX）。通常把這些腸毒素分為傳統(tǒng)腸毒素（SEA～SEE）和新型腸毒素（SEG～SElX）。根據(jù)這些腸毒素是否具有嘔吐活性對(duì)金黃色葡萄球菌腸毒素做了新的分類(lèi)：其中SEA、B、C、D、E、G、H、I、R、S、T這11 種腸毒素已被證明具有催吐活性，稱(chēng)為腸毒素SEs。而那些在靈長(zhǎng)目動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有表現(xiàn)出催吐活性（如SElL和SElQ），或是還沒(méi)有被證實(shí)是否具有催吐活性的腸毒素，如SElJ、SElK、SElM、SElN、SElO、SElP、SElU、SElU2、SElV、SElX稱(chēng)為金黃色葡萄球菌類(lèi)腸毒素蛋白（staphylococcal enterotoxin-like proteins，SEls）。另外根據(jù)血清型分類(lèi)SEs已知有 A、B、C1、C2、C3、D、E、G、H和 I等 10種血清型。所有SEs的氨基酸組成都已測(cè)定，分子中賴(lài)氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和酪氨酸等較集中。除 TSST外，所有 SEs含有2個(gè)半胱氨酸殘形成的大約有20個(gè)氨基酸的胱氨酸環(huán)，在這個(gè)區(qū)域靠分子羧基端 SEA、SEB和 SEC1有明顯的相似性。由此推測(cè)此區(qū)域含有催吐部位。TSST在化學(xué)上完全不同于其他腸毒素，它不含半胱氨酸，氨基酸排列順序與其他腸毒素不完全一致，它含有188個(gè)氨基酸殘基，末端氨基酸為絲氨酸。

二、腸毒素致病性

金黃色葡萄球菌腸毒素可引起食物中毒，根據(jù)食物中毒的原因分析，2014年微生物性食物中毒人數(shù)最多，占總中毒人數(shù)的52.1%，其中沙門(mén)氏菌、致瀉性大腸埃希氏菌、肉毒毒素、蠟樣芽孢桿菌、葡萄球菌腸毒素等引起的細(xì)菌性食物中毒。其中葡萄球菌腸毒素為最主要的污染源，約1μg /kg的毒素量即可刺激嘔吐中樞而導(dǎo)致以嘔吐，人在吃了被金黃色葡萄球菌腸毒素污染的食物后，會(huì)出現(xiàn)惡心、劇烈嘔吐（多呈噴射狀）等相關(guān)癥狀 2016年7月，黃埔檢驗(yàn)檢疫局從一批幾內(nèi)亞海域捕撈的進(jìn)口凍馬面鲀中檢出金黃色葡萄球菌。這是黃埔局口岸首次從自捕食用水生動(dòng)物中檢出該病菌。金黃色葡萄球菌污染產(chǎn)生的腸毒素是個(gè)世界性衛(wèi)生難題，2000年，日本雪印乳業(yè)事件中，1.45萬(wàn)多人感染；2008年廣東某品牌高鈣牛奶也因污染此菌導(dǎo)致過(guò)百名幼兒發(fā)病，金黃色葡萄球菌引起的食物中毒占細(xì)菌性食品中毒比重大，僅次于大腸桿菌，對(duì)腸道破壞性極大，常引起金黃色葡萄球菌腸炎，發(fā)病急，臨床癥狀表現(xiàn)為嘔吐、發(fā)熱、腹瀉，導(dǎo)致脫水、電解質(zhì)紊亂和酸中毒，甚至發(fā)生休克等癥狀，所以?xún)?chǔ)存食物應(yīng)保存在4 ℃，以防止微生物大量繁殖，繼而產(chǎn)生大量的毒素引發(fā)食物中毒。

三、腸毒素檢測(cè)方法

按檢測(cè)原理的不同，SEs的檢測(cè)方法可分為5大類(lèi)：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)法、免疫血清學(xué)方法、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)、生物傳感技術(shù)及超抗原技術(shù)等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)法，是對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物喂食腸毒素，后觀察其可能出現(xiàn)的各種異常的形態(tài)或生理變化，但其方法不能定量，重復(fù)性差，靈敏度低，另外成本較高。免疫血清學(xué)方法，酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA） 測(cè)定效果良好、穩(wěn)定性強(qiáng)、簡(jiǎn)便快速、成本相對(duì)較低。聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)，聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）方法可以直接檢測(cè)出SEs產(chǎn)毒基因。該法用單一引物更具特異性、可靠性和有效性。PCR方法敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好，可及時(shí)提供快速、準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷，但易出現(xiàn)污染而得到假陽(yáng)性。

四、展望或小結(jié)

金黃色葡萄球菌腸毒素能夠引起食物中毒，對(duì)人類(lèi)健康和食品安全造成極大威脅。由于金黃色葡萄球菌腸毒素種類(lèi)繁多，同一菌株可同時(shí)攜帶多種腸毒素基因，并且腸毒素作用元件的移動(dòng)和重組中不斷產(chǎn)生新的腸毒素基因，綜上所述，擺在我們面前的任務(wù)是要廣泛深入的研究金黃色葡萄球菌腸毒素的致病機(jī)理，另外要找到更加快速經(jīng)濟(jì)適用的檢測(cè)。

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作者簡(jiǎn)介：劉保光（1983-），男，河南民權(quán)人，在讀博士，講師，主要從事獸醫(yī)藥理學(xué)及細(xì)菌耐藥機(jī)制研究。

基金項(xiàng)目：西藏自治區(qū)自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2016ZR-15-62）