生活飲用水微生物檢驗方法標準研究

高宏軍

摘要：隨著社會經濟的高速發展以及工業化、城市化進程的推進，水資源污染問題越來越嚴重，與此同時，人們對于生活飲用水的水質要求也越來越高。目前，我國的飲用水中存在大量的微生物，其中，部分微生物對人們的身體健康有一定的威脅，因此，飲用水必須嚴格地進行消毒殺菌處理，并應經過嚴格的微生物檢測，檢測達標后方可輸配給終端用戶。

關鍵詞：生活飲用水、微生物檢驗

生活飲用水微生物實驗室檢驗對人們的飲水安全有著極為重要的作用，通過科學、有效的微生物實驗室檢驗方法，可保證水源的水質合格、水處理達標。但是，在生活飲用水微生物實驗室檢驗過程中，若存在不合理之處，則會一定程度地影響微生物實驗質量，進而也容易造成實驗結果誤差，無法給生活飲用水的安全提供有力的保障。

一、生活飲用水微生物檢驗的闡述

生活飲用水微生物實驗室檢驗主要是指為了保證人們的飲水安全，對經過沉淀、過濾、加氯消毒等一系列處理后的飲用水進行的一項微生物檢驗方法。根據我國生活飲用水水質標準（GB5749-85）中的規定，其飲用水中的微生物含量不得超過如下數字：總大腸菌群≤3個/L，細菌總數≤100個/mL，糞大腸菌群于100mL水樣中不得檢出等等。目前常見的生活飲用水微生物實驗室檢驗方法包括有：濾膜法、酶底物法、多管發酵法、平皿計數法等，在實際的生活飲用水微生物檢驗中，檢驗人員根據微生物類型的不同，所選擇的實驗室檢驗方法也會有所不同。 而生活飲用水微生物的實驗室檢驗步驟大多如下。1.樣本采集。具有代表性的采集需要檢驗的生活飲用水水樣，采集過程中必需注意無菌操作，且要保證采集的水樣能夠在采集后的 4 h 之內進行檢驗，以免其因置放時間過長而發生變化或污染。2.實驗室檢驗。根據所要檢驗的水中微生物類型的不同，選擇最適宜、最準確、最科學的實驗室檢驗方法。3.結果分析。通過對生活飲用水中各種微生物及時、有效的實驗室檢驗結果分析，便可得知飲用水中微生物的實際情況，這對早期處理或控制微生物超標或含有致病性微生物的生活飲用水帶來的十分積極的作用。

二、檢驗總大腸菌群的方法

首先，多管發酵法：測定總大腸菌群的多管發酵法最為適合居民日常生活飲用水以及水源的檢測。測試的儀器以及檢驗步驟如下：1.多管發酵法應用的儀器：多管發酵法中需要使用的儀器包含了：天平、分度吸管、培養箱、錐形瓶、小倒管、冰箱、顯微鏡、平皿、試管、載玻片。2.檢驗步驟：（1）取出10ml的水樣放到10ml的雙料乳糖蛋白胨的培養液里面，然后取出1ml的水樣放到10ml的單料乳糖蛋白胨培養液里面，再取出1ml的水樣放到9ml的滅菌生理鹽水里面，均勻混合后吸取出1ml（也就是0.1ml的水樣）加入到10ml的單料乳糖蛋白胨培養液里面，每一種稀釋度都要接種5管。把已經處理好的飲用水，還要經常的做出檢驗，每天都定時檢驗一次，還可以直接接種5份的10ml的水樣進行雙料培養基，每種10ml。（2）水源如果檢驗出污染嚴重，就需要加大稀釋度，每種標準稀釋度都要接種5管，總共接種水樣為15管。接種不足1ml的水樣時，就需要10倍的稀釋，取其中的1ml進行接種，然后逐次增稀，換用帶有滅菌刻度的吸管。（3）將接種好的試管放置在恒溫的培養箱中，經過24個小時的培養，如果沒有產生出氣產酸，就說明沒有總大腸菌群，但是如果產出了酸產氣，就可以繼續的進行檢測。（4）對產出的酸產氣試管中，轉種到伊紅美藍瓊脂板上，在恒溫培養箱中進行24小時的培養，查看菌落形態，將其中具有特征的菌落作革蘭氏染色、證實試驗以及鏡檢。（5）經過了染色鏡確定了是革蘭氏陰性無芽孢桿菌，然后接種乳糖蛋白胨進行培養，防止恒溫箱中培養24個小時，產出了酸氣者，就肯定是有總大腸菌群。其次，濾膜法：總大腸菌群檢測的濾膜法一般都是用微孔徑的濾膜進行水樣的過濾，把過濾膜貼附在乳糖上進行恒溫的24小時培養，將形成的菌落中的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌然后對飲用水中的總大腸菌群做出檢測。1.培養基與試劑：濾膜法選用培養基與試劑主要是品紅亞硫酸鈉培養基以及乳糖蛋白胨的培養液。2.濾膜法使用的試驗儀器：濾器、濾膜（孔徑0.45微米）、抽濾設備、天平、分度吸管、培養箱、錐形瓶、小倒管、冰箱、顯微鏡、平皿、試管、載玻片、無齒鑷子。3.試驗步驟：（1）滅菌。主要是分為濾膜濾器兩種滅菌方法。（2）過濾水樣。使用無菌鑷子將滅菌濾膜的邊緣部分夾取起來把粗糙的表面朝上，然后放在滅菌好的濾床之上，將濾器固定好，往濾器中加入100ml的水樣，將濾器的閥門打開進行抽濾。（3）培養。過濾完水樣之后抽氣5秒后，將濾器閥門關上，使用滅菌鑷子移放到品紅亞硫酸鈉培養基之上，濾膜截留好的細菌面要朝上，相互緊貼不可以存有氣泡，倒置平皿放入恒溫箱中進行24小時的培養。

三、多管發酵法與濾膜法的對比

多管發酵法是采用MPN進行實驗結果的表示，這是以統計學中的理論對水體中的大腸桿菌密度以及衛生質量的評估標準的方法一樣，但是可以進行反復的檢測，能夠發現結果要比實際的數值大，但是反復的實施檢測，那差異會因此而變小，其中細菌的含量值估算，絕大部分是因為稀釋度又顯示著陽性也會顯示著陰性，所以實驗設計時，一定要根據水樣檢驗的實際需求來制定重復的數量，應該根據數據要求的準確度來制定。多管發酵法更實用于多種類型的樣品當然也包括了底泥，可惜操作的步驟卻又繁瑣，使用的時間又過于的長；濾膜法就比較適用于那些包含著少量雜質的水樣，可是操作的方法卻相對的簡單快捷，所以多管發酵法就可以被廣泛的使用，并且是采用最多的方法，并且數據準確度又特別高。多管發酵法相對于濾膜法的數據結果實施統計學的比較，濾膜法的結果就比較的精密，兩種的測試方法得到的結果能夠提供出水質的基本情況，但是檢驗數值卻不同，所以進行水源的水質做出檢測過程中，就應該預期到大部分的濾膜數據都會遺落在多管發酵法的試驗的界限內。

總之，相關的實驗室檢驗人員，應該加強對我國當下生活飲用水微生物實驗中容易出現的質量問題進行詳細分析，并采取積極、科學、有效的措施控制微生物實驗質量，以保證質量的穩定性與良好性，進而為我國生活飲用水的檢測與正常、安全使用奠基堅實地基礎。

參考文獻：

[1]馮錫凱，馮智勤.加強生活飲用水檢驗的必要性與迫切性[J]中國科技縱橫，2010，（24）：239

[2]湯云木，常育，石晶等.淺析水中微生物對水質的影響及防治對策[J]科技風，2010，（20）：257

[3]祝美云，李厚強.純凈水中微生物的控制[J].食品科技，2007，32（5）：218-220