玉米油與豬油1∶1調和油對小鼠血脂、肝功能及肝臟抗氧化能力的影響

王 吉，嚴思思，謝 文，周慧娟，黃海濱，劉必英，馮春紅，文利新,*

（1.湖南農業大學動物醫學院，湖南 長沙 410128；2.湖南畜禽安全生產協同創新中心，湖南 長沙 410128）

玉米油與豬油1∶1調和油對小鼠血脂、肝功能及肝臟抗氧化能力的影響

王 吉1,2，嚴思思1,2，謝 文1,2，周慧娟1,2，黃海濱1,2，劉必英1,2，馮春紅1，文利新1,2,*

（1.湖南農業大學動物醫學院，湖南 長沙 410128；2.湖南畜禽安全生產協同創新中心，湖南 長沙 410128）

目的：模擬中國人飲食習慣，以小鼠為實驗對象，探討不同玉米油與豬油1∶1調和油（后稱為調和油）攝入量對其血脂含量、肝功能以及肝臟抗氧化能力的影響。方法：將24 只8 周齡雄性昆明小鼠隨機平均分為空白組、推薦攝入量組和實際攝入量組，每組分別在基礎日糧中添加0%、3.8%和6.5%（質量分數）的調和油，飼喂8 周后稱小鼠體質量，解剖，取外周血清檢測血脂和肝功能指標，取完整肝臟測量肝指數、進行組織形態觀測和組織切片鏡檢，對肝臟進行組織勻漿檢測氧化損傷指標。結果：小鼠的肝指數與飼料中所添加的調和油劑量呈正相關，空白組小鼠肝臟堿性磷酸酶、谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性均明顯高于攝入油脂組，推薦攝入量組的小鼠肝臟總抗氧化能力顯著高于空白組和實際攝入量組，空白組的肝臟氧化損傷程度顯著高于推薦攝入量組和實際攝入量組。結論：不食用油脂對小鼠肝功能有一定的影響；推薦攝入量的玉米油與豬油1∶1調和油能提高小鼠肝臟抗氧化能力，降低氧化損傷。

玉米油；豬油；調和油；血脂；肝功能；抗氧化

近年中國肥胖、糖尿病、高血壓等慢病人群數量迅速上升，其主要原因與膳食中油脂攝入過量和攝入不平衡有密切關系。目前，中國人在攝入油脂營養的現狀是多且不平衡，實際油脂平均攝入量達每天41.4 g，超過推薦攝入量的1/3；其中，植物油32.7 g、動物油8.7 g[1]，根據世界衛生組織和中國營養學會的建議，膳食總脂肪供能比例不超過30%（除了食物所含脂肪外，每天攝入的油脂量25～30 g），且飽和脂肪酸（saturated fatty acid，SFA）、單不飽和脂肪酸（monounsaturated fatty acid，MUFA）和多不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid，PUFA）三者構成的最佳質量分數比例為1∶1∶1[2]。但天然的單一油脂不論是植物油還是動物油，都不具有上述完美比例，市場上所售調和油均以多種植物油調和為主，脂肪酸構成也難以達到平衡。中國人傳統飲食習慣是將豬油和植物油搭配食用，不僅口感好，烹飪時少用1/3油，且兩者搭配后，脂肪酸構成趨近1∶1∶1。

國內外對植物油與豬油調和油的相關研究和報道尚不多見，本研究模擬中國人飲食習慣，以小鼠為實驗對象，探討了不同玉米油與豬油的1∶1調和油（后稱調和油）攝入量對其血脂含量、肝功能以及肝臟抗氧化能力的影響，為人們日常便捷地調制健康且口感更佳的食用調和油提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 動物、材料與試劑

8 周齡SPF級雄性昆明小鼠，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司。

玉米油購自山東西王食品有限公司；豬油購自湖南煙村生態農牧科技股份有限公司。

堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）檢測試劑盒、谷丙轉氨酶（alanine transaminase，ALT）檢測試劑盒、谷草轉氨酶（aspartate transaminase，AST）檢測試劑盒、直接膽紅素（direct bilirubin，DBIL）檢測試劑盒 深圳邁瑞公司；脂質谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活性試劑盒、脂質過氧化物丙二醛（malonydialdehyde，MDA）試劑盒和總抗氧化能力（total antioxidation， T-A O C）試劑盒 南京建成生物有限公司；無水乙醇（C2H5OH） 中國上海振興化工一廠；伊紅Y（C20H18Br4O5） 上海三愛司試劑公司；蘇木精、二甲苯（C10H10） 中國醫藥集團上海化學試劑公司。

1.2 儀器與設備

BS190生化分析儀 深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司；U410冰箱 Eppendorf中國有限公司；Infinite M200 Pr全波長酶標儀 奧地利帝肯公司。

1.3 方法

1.3.1 動物分組與飼喂

選取8 周齡SPF級雄性昆明小鼠24 只，隨機分為3 組，每組8 只，適應性喂養1 周后，參考GB 14924.3—2010《實驗動物配合飼料營養成分》，按照實驗小鼠營養需求配制基礎日糧，根據我國營養學會推薦成人每日油脂攝入量（25 g）和實際每日油脂攝入量（42 g），運用營養代謝換算公式折算成小鼠日糧中的2 個油脂添加劑量，即3.8%和6.5%。實驗分3 組，分別為空白組、推薦攝入量組和實際攝入量組，分別在基礎日糧中添加劑量為0%、3.8%和6.5%的玉米油與豬油1∶1調和油，實驗分組詳見表1。適宜喂養環境中自由采食及飲水，第56天禁食不禁水12 h，稱體質量，摘除眼球取血，斷頸椎處死，采集肝臟，做組織病理學檢查及血清指標檢測。

表 1 小鼠分組及飼料配方Table 1 Feed ingredients for different groups of mice

1.3.2 指標測定

1.3.2.1 肝指數測定

小鼠解剖前稱體質量，解剖后取完整肝臟并稱肝質量，按照下式計算肝指數。

1.3.2.2 肝臟組織解剖病理學觀察及病理切片制作

取小鼠完整肝臟于自然光下觀察其組織形態并拍照；稱質量后取肝左葉于4%中性甲醛溶液中固定，進行常規石蠟包埋，5 μm切片，依次經脫蠟、染色、脫水、透明、封片后，置光學顯微鏡下進行鏡檢。

1.3.2.3 血脂檢測

采集小鼠血液于4 ℃靜置2 h后，3 000 r/min離心8 min，取血清，采用BS190全自動生化分析儀，檢測血清中高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（lowdensity lipoprotein cholesterol，LDL-C）、總膽固醇（total cholesterol，TC）和甘油三酯（triglyceride，TG）含量。

1.3.2.4 肝功能指標檢測

采用BS190全自動血液生化分析儀檢測小鼠血清中ALP、ALT和AST活性。

1.3.2.5 肝臟抗氧化指標檢測

準確稱取肝組織質量，按m（肝臟）∶V（生理鹽水）=1∶9加入生理鹽水，用勻漿器在冰上研磨，制備成10%的肝組織勻漿，然后2 500～3 000 r/min離心10 min，去上清液后保存到新的離心管中，按試劑盒操作步驟分別檢測肝組織勻漿中MDA含量、GSH-Px活性以及T-AOC。

1.4 數據處理

2 結果與分析

2.1 不同調和油攝入量對小鼠血脂指標的影響

表 2 不同調和油攝入量對小鼠血脂指標的影響Table 2 Effect of dietary oil blend on blood lipids of mice mmol/L

由表2可知，同空白組相比，推薦攝入量組的HDL-C、LDL-C、TC含量，以及實際攝入量組的HDL-C、LDL-C含量均極顯著上升（P＜0.01），實際攝入量組TC含量相對空白組顯著上升（P＜0.05）；實際攝入量與推薦攝入量相比，LDL-C含量極顯著上升（P＜0.01）；各組間TG含量無顯著性差異。表明推薦攝入量和實際攝入量的調和油均能明顯升高小鼠血清中HDL-C、LDL-C和TC的含量，且LDL-C含量隨調和油的攝入量增加而顯著上升。

2.2 不同調和油攝入量對小鼠體質量及肝指數的影響

表 3 不同調和油攝入量對小鼠體質量和肝指數的影響Table 3 Effect of dietary oil blend on body weight and liver index of mice

由表3可知，不同調和油攝入量對小鼠體質量無明顯影響；推薦攝入量組的肝指數相對空白組顯著上升（P＜0.05），實際攝入量組的肝指數相對空白組極顯著上升（P＜0.01）；實際攝入量組與推薦攝入量組比較，無顯著差異。由此可見小鼠的肝指數與其調和油攝入量呈正相關。

2.3 小鼠肝臟解剖學和組織病理學觀察結果

解剖取完整肝臟眼觀可見各組小鼠肝臟均色澤紅潤（圖中未顯示），大小適中，外形整齊，分頁清晰，邊緣銳利，未見腫大、淤血、褐斑等實質性損傷或病變（圖1）。

圖 1 小鼠肝臟組織解剖學觀察Fig. 1 Histological examination of liver tissues in mice from different groups

肝組織切片染色鏡檢可見各組小鼠肝臟病理切片中肝小葉完整、分界清晰，肝索清楚易辨，細胞形態正常、間隙適中，均未出現明顯脂肪空泡、淤血等病理變化（圖2）。

圖 2 小鼠肝臟組織病理學觀察Fig. 2 Histopathological examination of liver tissues in mice from different groups

2.4 不同調和油攝入量對小鼠肝功能的影響

如表4所示，推薦攝入量組的ALT和AST活性相對空白組均顯著下降（P＜0.05）；實際攝入量組的ALP和ALT活性相對空白組均極顯著下降（P＜0.01），AST活性相對空白組顯著下降（P＜0.05）；實際攝入量組的ALP和ALT活性相對推薦攝入量組均極顯著下降（P＜0.01）。各組間DBIL含量無顯著性差異?？梢姴皇秤糜椭男∈蟾闻KALP、ALT和AST活性均明顯升高。

表 4 不同調和油攝入量對小鼠肝功能的影響Table 4 Effect of dietary oil blend on liver function of mice

2.5 不同調和油攝入量對小鼠肝臟抗氧化能力的影響

表 5 不同調和油攝入量對小鼠肝臟抗氧化的影響Table 5 Effect of dietary oil blend on antioxidant capacity of liver tissues in mice

由表5可知，推薦攝入量組的T-AOC相對空白組極顯著上升（P＜0.01）；實際攝入量組的MDA含量相對推薦攝入量組呈顯著上升（P＜0.05），T-AOC極顯著下降（P＜0.01），各組間GSH-Px活力的比較無顯著性差異。由此可見，飼料中添加推薦劑量的調和油能有效提高小鼠肝臟的總抗氧化能力，降低肝臟的氧化損傷。

3 討論與結論

根據《中國食物成分表2002》中的數據[3]，豬油和玉米油為1∶1的調和油中，SFA、MUFA和PUFA的比例為0.76∶1∶0.87，趨近1∶1∶1完美比例。富含中MUFA的膳食能增強血清中LDL的抗氧化能力、升高HDL水平、降低TC和TG水平的能力[4-6]。PUFA具有降低血脂和減少肝臟內源性膽固醇合成等功效[7-8]。但過多攝入SFA且PUFA的攝入量不足，會引起血清的HDL含量降低，LDL、TC和TG的含量則升高[9]。玉米油中富含多種活性成分，其中共軛亞油酸的含量約占UFA的60%以上[10]。其非皂化部分還含有大量的β-谷甾醇等植物甾醇類物質，是一種具有降低膽固醇、降血脂、防治心血管疾病等供能的活性物質[11]。而豬油中雖然含有較高的SFA，但其中MUFA的含量也達到45.6%[3]，有研究顯示，富含MUFA的花生油可以降低血液中的LDL含量，升高HDL含量[12]，且MUFA含量越高，LDL的氧化敏感性會隨MUFA含量的升高而降低[13-14]，這些都可降低心血管疾病的發病危險性。HDL能夠將其他組織內的膽固醇轉運至肝臟組織內，血清中HDL-C含量越高，冠狀動脈疾病的發病危險性越低[15]，而LDL-C則與之相反，血清中LDL-C的含量則與動脈粥樣硬化等心血管疾病的發病呈正相關[16]。本研究中，日糧中添加不同比例的調和油能明顯升高小鼠血清中HDL-C、LDL-C和TC的含量，LDL-C含量隨調和油的攝入量增加而顯著上升。因此，適當減少膳食中油脂的攝入，可降低血清LDL-C含量，一定程度上能減少心腦血管疾病的患病危險。

本實驗結果表明，小鼠的肝指數與其所攝入的調和油劑量呈正相關，這可能與脂質作為肝細胞的結構物質相關，結合各組小鼠的肝臟組織大體肉眼觀察和切片蘇木精-伊紅染色鏡檢均無明顯病理變化，可見短期內攝入不同水平的油脂會一定程度上升高肝指數，但并不會對機體肝臟造成實質性損傷，其中的具體機制有待進一步研究。血清中ALT和AST的水平反映了肝臟是否受到了損傷，是損傷程度的重要測量指標，ALT主要存在于肝細胞的細胞漿質中，AST主要存在于肝細胞線粒體和細胞漿中，當肝細胞損傷時，細胞膜破裂甚至線粒體破損，ALT和AST就會從肝細胞中進入血液，引起血清ALT和AST水平大幅提高[17-18]。本實驗中，不食用油脂的小鼠肝臟ALP、ALT和AST活性均明顯升高，且與8 周齡以上的昆明小鼠正常值相比[19-20]，空白組小鼠血清ALT和AST活力已超出正常值上限，可見不食用油脂對小鼠肝功能造成了較為嚴重的影響。實驗中各組小鼠的最終體質量無顯著差異。當前由于肥胖、高血脂等代謝性疾病人群的增多，及一些錯誤的膳食建議引導，越來越多的人在日常膳食中選擇不食用油脂，以期達到減肥或降血脂等目的。實驗結果表明，完全去除飲食中的油脂，并不能起到預期的減肥效果，反而會對肝臟有一定的損害作用。

當膳食中攝入過多的脂肪酸時，會促使機體分泌膽汁，血液中的膽固醇迅速升高，造成血脂異常，加重新陳代謝的負擔，使自由基產生與清除的平衡被打破，產生大量自由基及脂質過氧化產物MDA。因此肝臟中MDA的水平是脂質氧化的體現之一，間接反映了肝臟所受自由基攻擊的程度[21]。在一定程度上，不飽和脂肪酸可以與膽汁所分泌的載脂蛋白結合形成HDL-C，并在肝臟內形成膽酸，能夠降低血脂，減輕新陳代謝的負擔，從而減少自由基的產生[22]。據齊小龍[23]研究報道，日糧中添加不同濃度共軛亞油酸（conjugated linoleic acid，CLA）可顯著提高總超氧化物歧化酶和GSH-Px的活性，同時MDA的含量降低，這與Zuo Rantao等[24]的研究結果相類似，飼料中添加CLA可顯著提高肝臟T-AOC和CAT活性，顯著降低肝臟中MDA含量。本實驗中攝入推薦劑量組小鼠肝臟的GSH-Px活性無顯著差異，T-AOC顯著高于空白組和實際攝入量組，MDA含量顯著低于實際攝入量組，結果提示可能其他抗氧化酶如SOD或CAT等發揮了更大的作用。而攝入高劑量的油脂同樣導致抗氧化能力下降，氧化損傷加重，這與Haslam等[25]的研究相類似，膽固醇過高和油脂攝入過低，均可使血清MDA含量升高，自由基增加，造成肝臟的氧化損傷。綜上所述，日糧中不攝入油脂會在降低血脂的同時對肝功能和肝臟抗氧化能力造成不利影響；相對于不攝入油脂和攝入高劑量油脂，膳食中攝入推薦劑量水平的玉米油與豬油1∶1調和油能有效地降低肝指數、改善肝功能和提高肝臟抗氧化能力。

膳食中攝入一定量脂肪有益于健康，不食用油脂會影響肝功能和降低肝臟抗氧化能力；每天攝入玉米油與豬油1∶1的調和油25 g，能極顯著提高肝臟抗氧化能力，降低氧化損傷；而攝入過多油脂（42 g）亦會影響肝功能和肝臟抗氧化能力。

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Effect of Dietary Blend of Corn Oil and Lard at a Ratio of 1:1 on Blood Lipid, Liver Function and Liver Antioxidant Capacity in Mice

WANG Ji1,2, YAN Sisi1,2, XIE Wen1,2, ZHOU Huijuan1,2, HUANG Haibin1,2, LIU Biying1,2, FENG Chunhong1, WEN Lixin1,2,*
(1. College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2. Hunan Synthetic Innovation Center for Livestock Production Safety, Changsha 410128, China)

Objective: To explore the effect of dietary blend of corn oil and lard at a ratio of 1:1 on blood lipid, liver function and liver antioxidant capacity in mice by simulating Chinese dietary habits. Methods: A total of 24 eight-week male SPF Kunming mice were randomly divided into blank, recommended intake and actual intake groups, which were fed a basal diet supplemented with 0%, 3.8%, and 6.5% of the oil blend, respectively. After 8 weeks, body weight was measured, and peripheral blood was collected for determining serum lipids and liver function indices. The intact liver tissue was collected for the calculation of liver index and morphological and histological examination under microscope. Moreover, liver homogenate was prepared for evaluation of oxidative stress. Results: The liver index in mice was positively correlated with the dietary amount of the oil bend. Alanine transaminase (ALT), aspartate transaminase (AST) and alkaline phosphatase (ALP) activities in mice from the blank group were signif i cantly higher than those in mice from the recommended intake and actual intake groups. However, total antioxidant capacity in the liver of mice from the recommended intake group was signif i cantly higher than in mice from the blank and actual intake groups. Oxidative liver injury in mice from the blank group was signif i cantly greater than in mice from the two other groups. Conclusion: Insuff i cient dietary oil has a negative effect on liver function in mice. The recommended intake of corn oil/lard blend at 1:1 can enhance liver antioxidant capacity in mice and reduce oxidative damage.

corn oil; lard; oil blend; blood lipid; liver function; antioxidant

10.7506/spkx1002-6630-201705042

S879.6

A

1002-6630（2017）05-0257-05

王吉, 嚴思思, 謝文, 等. 玉米油與豬油1:1調和油對小鼠血脂、肝功能及肝臟抗氧化能力的影響[J]. 食品科學, 2017, 38(5): 257-261. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201705042. http://www.spkx.net.cn

WANG Ji, YAN Sisi, XIE Wen, et al. Effect of dietary blend of corn oil and lard at a ratio of 1:1 on blood lipid, liver function and liver antioxidant capacity in mice[J]. Food Science, 2017, 38(5): 257-261. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201705042. http://www.spkx.net.cn

2016-03-02

王吉（1990—），男，碩士研究生，研究方向為營養代謝和動物保健。E-mail：653861001@qq.com

*通信作者：文利新（1968—），男，教授，博士，研究方向為營養代謝和動物保健。E-mail：sfwlx8015@sina.com