結腸高分化腺癌中肝細胞生長因子和間質表皮轉化因子表達與增殖指數的關系

毛 東 于江文 陸 航

(錦州醫科大學附屬第一醫院普外科，遼寧 錦州 121001)

結腸高分化腺癌中肝細胞生長因子和間質表皮轉化因子表達與增殖指數的關系

毛 東 于江文 陸 航

(錦州醫科大學附屬第一醫院普外科，遼寧 錦州 121001)

目的 探討結腸高分化腺癌中肝細胞生長因子(HGF)和間質表皮轉化因子(C-met)的表達及其與腫瘤細胞增殖指數的關系。方法 78例結腸高分化腺癌組織作為觀察組，結腸非腫瘤性黏膜組織21例作為對照組，應用免疫組化方法檢測兩組HGF、C-met和Ki67的表達。結果 觀察組HGF、C-met和Ki67表達的陽性率明顯高于對照組，且三者表達均與腫瘤的最大徑、浸潤深度密切相關，HGF和C-met的表達均與腫瘤的淋巴結轉移密切相關。相關分析顯示HGF、C-met和Ki67之間均呈正相關。結論 結腸高分化腺癌中HGF/C-met高表達與腫瘤生長及浸潤有關，二者可以促進腫瘤細胞的增殖作用。

結腸；高分化腺癌；肝細胞生長因子(HGF)；間質表皮轉化因子(C-met)；Ki67

遺傳易感因素、基因和蛋白的表達失調是結腸癌病變的重要促進因素〔1，2〕，結腸腺癌中高分化腺癌多見，其與低分化腺癌相比，細胞異型性小，腺管結構存在，預后相對好。結腸高分化腺癌是高增殖性腫瘤，腫瘤增生活躍。間質表皮轉化因子(C-met)是一種具有酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白，是肝細胞生長因子(HGF)的特異性受體，二者可能具有協同作用，能在多個通路的角度調節腫瘤的發生和進展〔3，4〕。本文對結腸高分化腺癌患者術后腫瘤組織中HGF、C-met和Ki67蛋白的表達進行檢測，探討其臨床意義及相關性。

1 材料和方法

1.1 一般資料 2013年1月至2015年6月我院結腸高分化腺癌的患者78例作為觀察組，留取術后石蠟包埋的組織，其中男41例，女37例，年齡40～84歲，平均57.3歲。均經病理醫師確診，并符合WHO中的診斷標準。選擇上述患者術后標本中距腫物邊緣>3 cm的非腫瘤性結腸黏膜組織21例作為對照組，其中男11例，女10例，年齡42～80歲，平均57.6歲。兩組性別、年齡無明顯差異。

1.2 HGF、C-met和Ki67的檢測方法 兩組術后標本中HGF、C-met和Ki67的檢測均基于石蠟包埋的組織。三種蛋白的檢測均應用免疫組化SP法，二氨基聯苯胺(DAB)顯色，嚴格按說明書手工進行操作，減少誤差。

1.3 HGF、C-met和Ki67的判斷標準 HGF、C-met的表達部位是細胞質和(或)細胞膜，Ki67的表達部位是細胞核，以出現淡黃色-棕褐色顆粒為陽性。選擇上皮細胞集中且染色較為明顯的區域進行觀察，共選擇5個400倍視野的熱點區進行觀察，計算陽性率，取平均值。HGF、C-met以<10%為陰性，≥10%陽性。Ki67以<25%為陰性，≥25%陽性。

1.4 統計學方法 應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2 結 果

2.1 兩組HGF、C-met和Ki67陽性率的比較 兩組HGF、C-met和Ki67的陽性率有統計學差異。見表1。

表1 二組中HGF、C-met和Ki67陽性率的比較〔n(%)〕

2.2 觀察組HGF、C-met和Ki67在不同臨床特征中的比較 觀察組中HGF、C-met和Ki67的表達均與腫瘤的最大徑、浸潤深度密切相關，HGF和C-met的表達均與腫瘤的淋巴結轉移密切相關。見表2。

表2 觀察組HGF、C-met和Ki67在不同臨床 特征中比較〔n(%)〕

2.3 觀察組中HGF、C-met和Ki67的相關性 HGF和C-met(r=0.54，P=0.012 3)、HGF和Ki67(r=0.49，P=0.034 1)、C-met和Ki67(r=0.51，P=0.026 1)表達具有正相關性。

3 討 論

結腸腺癌中最常見的是高分化腺癌，雖然分化好作為腫瘤預后好的標志，但是臨床中并不全是這樣，腫瘤的其他生物學行為如侵襲、轉移等因素可能對判斷臨床狀態更有價值〔5，6〕。在病變進展中，蛋白表達可以出現明顯異常。Ki67的表達可以標記腫瘤的增殖狀態，即Ki67高表達的腫瘤增殖活性高，細胞生長快。HGF位于人類第7號染色體長臂(7q21.1)，大小約70 kb，包括18個外顯子和17個內含子，其前體部分是由728個氨基酸殘基組成的單鏈，HGF的活性形式主要是與蛋白酶的水解有關〔7，8〕。C-met屬于受體酪氨酸激酶超家族的成員，為原癌基因MET編碼的一類具有自主磷酸化活性的跨膜受體，其編碼基因位于7號染色體q31區，大小約110 kb，包括21個外顯子。目前C-met是HGF的特異性受體，因此二者可能有一定的協同作用〔9，10〕。在正常生理條件下，HGF和C-met形成有效的結合后，可以使上皮細胞間的連接松散，尤其是腫瘤細胞的黏附性下降，而易于離開原發灶，此時細胞的運動性增強，細胞易于遷移，轉移潛能升高〔11，12〕。張瑞濤等〔13〕觀察HGF、C-met在卵巢上皮性癌中的表達，發現二者在腫瘤中高表達，認為HGF、C-met高表達可能協同參與卵巢上皮性癌的惡性進展。劉崇梅等〔14〕通過在鼻咽癌中觀察HGF、C-met的表達與細胞增殖的關系，發現HGF、C-met與增殖細胞核抗原的表達呈正相關，認為HGF、C-met可以促進腫瘤細胞的增殖。

本實驗結果提示HGF、C-met和Ki67在腫瘤形成過程中有重要促進作用。HGF和C-met可以促進腫瘤細胞增殖，使腫瘤細胞體積增大，腫瘤生長活躍，腫瘤細胞增生明顯，腫瘤侵襲性增強〔15，16〕。本文結果提示HGF、C-met高表達是腫瘤進展的重要促進因素。HGF、C-met與轉移的關系提示二者高表達時腫瘤處于高轉移狀態，此時在臨床及病理診斷中對淋巴結及遠隔器官進行檢查是必要的。也有研究認為二者促進腫瘤轉移的作用是通過調節其他轉移相關蛋白實現的〔12〕。研究顯示HGF/C-met信號轉導通路可以下調E-cadherin蛋白的表達，對腫瘤的黏附作用進行調控〔17〕。HGF/C-met可以激活蛋白激酶結構域中酪氨酸激酶(PTK)，使絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化，使尿激酶纖溶酶原表達上調，促進細胞分泌基質金屬蛋白酶，使細胞外基質降解，對腫瘤的侵襲和轉移起促進作用〔18〕。也有研究認為二者可以促進間質的血管內皮細胞增生，使間質的血供豐富，為腫瘤組織生長提供必要的營養〔19〕。

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14 劉崇梅，于惠芝，林明暉，等.HGF/C-met系統在鼻咽癌中的表達及其與增殖細胞核抗原的關系〔J〕.現代腫瘤醫學，2009；17(11)：2087-9.

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〔2015-06-07修回〕

(編輯 杜 娟)

陸 航(1975-)，男，博士，副主任醫師，主要從事普外科疾病研究。

毛 東(1982-)，男，碩士，主治醫師，主要從事普外科疾病研究。

R737

A

1005-9202(2017)04-0918-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.060