視網膜母細胞瘤組織中基質金屬蛋白酶-9、血管內皮生長因子的表達水平及其臨床意義

梁 軍，楊依依

(尉氏縣人民醫院眼科，河南 開封 452170)

視網膜母細胞瘤組織中基質金屬蛋白酶-9、血管內皮生長因子的表達水平及其臨床意義

梁 軍，楊依依

(尉氏縣人民醫院眼科，河南 開封 452170)

目的 探討視網膜母細胞瘤組織中基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)、血管內皮生長因子(VEGF)表達水平及其臨床意義。方法 采用免疫組化S-P法檢測100例視網膜母細胞瘤和30例正常視網膜組織中MMP-9、VEGF的表達水平，并分析兩者與視網膜母細胞瘤臨床病理特征的關系。結果 視網膜母細胞瘤組織中MMP-9的陽性率為65.0%(65/100)，高于正常視網膜組織的6.7%(2/30)(P<0.05)；視網膜母細胞瘤組織中VEGF的陽性率為72.0%(72/100)，高于正常視網膜組織的10.0%(3/30)(P<0.05)。視網膜母細胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達與腫瘤分化程度、臨床分期有關(P<0.05)。視網膜母細胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達呈正相關關系(r=0.570，P<0.05)。結論 視網膜母細胞瘤組織中存在高表達的MMP-9、VEGF，兩者可能協同參與視網膜母細胞瘤的浸潤轉移。

視網膜母細胞瘤；基質金屬蛋白酶-9；血管內皮生長因子

視網膜母細胞瘤的主要致病原因是Rb1基因的缺失，該病的主要危害是導致患兒的視力下降，為進一步探討視網膜母細胞瘤的發病機制，本研究采用免疫組化S-P法檢測視網膜母細胞瘤組織中基質金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表達，并分析兩者之間的相關性，以期對視網膜母細胞瘤的發病機制進一步闡明。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 入組河南省眼科研究所和尉氏縣人民醫院2011年6月至2016年1月收治的經病理學確診的100例視網膜母細胞瘤患者，男66例，女34例；年齡4個月～11歲，中位年齡4.2歲；組織分化程度：分化型55例，未分化型45例；臨床分期：眼內期39例，青光眼期36例，眼外擴展期25例。并選取同期收治的因外傷摘除眼球的正常視網膜患者30例作為對照，其中男21例，女9例，年齡6個月～10歲，中位年齡3.9歲。2組患者的性別、年齡等基線資料具有可比性(P>0.05)。

1.2 試劑 MMP-9、VEGF鼠抗人單克隆抗體等均購自北京中山金橋生物技術有限公司。

1.3 MMP-9、VEGF表達的檢測 對于收集到的100例視網膜母細胞瘤和30例正常視網膜組織標本，均采用免疫組化S-P法檢測其MMP-9、VEGF的表達，以PBS代替一抗作為陰性對照，以已知MMP-9、VEGF陽性切片作為陽性對照。

1.4 結果判定 MMP-9陽性信號主要定位于細胞質或細胞膜，VEGF陽性信號主要定位于細胞質，陽性信號均為棕黃色顆粒以選取至少5個高倍鏡(×400)視野，計數陽性細胞數,并觀察染色強度，進行綜合評估，判斷陽性率[1]。

1.5 統計學處理 采用SPSS 17.0進行統計學處理，MMP-9、VEGF的陽性率比較采用χ2檢驗，MMP-9與VEGF的相關性分析采用Spearmen相關性分析法，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 視網膜母細胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達 視網膜母細胞瘤組織中MMP-9的陽性率為65.0%(65/100)，高于正常視網膜組織的6.7%(2/30)(P<0.05)；視網膜母細胞瘤組織中VEGF的陽性率為72.0%(72/100)，高于正常視網膜組織的10.0%(3/30)(P<0.05)。

2.2 視網膜母細胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達與其臨床病理特征的關系 視網膜母細胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達與腫瘤分化程度、臨床分期有關(P<0.05)。見表1。

2.3 視網膜母細胞瘤組織中MMP-9與VEGF的關系 視網膜母細胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達呈正相關關系(r=0.570，P<0.05)。見表2。

表1 視網膜母細胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達與其臨床病理特征的關系

表2 視網膜母細胞瘤組織中MMP-9與VEGF的關系

注：r=0.570，P<0.05

3 討論

視網膜母細胞瘤是嬰幼兒高發的眼部原發性惡性腫瘤，可導致患兒的視力下降，嚴唐者可危及患兒生命[2-3]。視網膜母細胞瘤的發生發展與大多數實體瘤一樣，離不開體內癌基因與抑癌基因平衡的打破，而腫瘤發生后如果繼續進展則需要腫瘤細胞穿透基底膜而向外浸潤或通過血管、淋巴管向遠處轉移；腫瘤的生長也需要新生血管形成來為其提供一定的營養物質[2-4]。MMPs是一類能夠降解細胞外基質，從而破壞基底膜的酶類，這對腫瘤的浸潤轉移十分重要。研究證實，MMP-9在大多數實體瘤中存在高表達[5]。VEGF則是目前已知功能最強的促血管生成因子，是腫瘤血管新生的主要促進因子，在腫瘤血管新生過程中發揮了十分重要的作用，是很多實體瘤發生、發展的關鍵因子[6]。本研究結果顯示，視網膜母細胞瘤組織中MMP-9的陽性率為65.0%(65/100)，高于正常視網膜組織的6.7%(2/30)(P<0.05)；視網膜母細胞瘤組織中VEGF的陽性率為72.0%(72/100)，高于正常視網膜組織的10.0%(3/30)(P<0.05)。視網膜母細胞瘤組織中MMP-9、VEGF的表達與腫瘤分化程度、臨床分期有關(P<0.05)。視網膜母細胞瘤組織

中MMP-9、VEGF的表達呈正相關關系(r=0.570，P<0.05)。這與有關文獻[1]報道結果相近。總之，視網膜母細胞瘤組織存在MMP-9、VEGF的異常表達，這與視網膜母細胞瘤的浸潤、轉移等有關。

[1]劉月君.基質金屬蛋白酶-9、基質金屬蛋白酶組織抑制劑-1 和血管內皮生長因子在視網膜母細胞瘤組織中的表達[J].新鄉醫學院學報,2014,31(12):1015-1016.

[2]秦靜，段大鵬，車選義,等.視網膜母細胞瘤中SHH與PTCH的表達及其意義[J].中華實用診斷與治療雜志,2015,29(6):559-561.

[3]程育宏,申家泉,唐俠.基質金屬蛋白酶-14 和細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子在視網膜母細胞瘤中的表達及意義[J].山東大學學報(醫學版),2008,46(4):411-414,419.

[4]楊依依.視網膜母細胞瘤組織中Survivin、P53的表達及其意義[J].腫瘤基礎與臨床,2016,29(6):473-475.

[5]吳子旭,王炳彥,姚宏.基質金屬蛋白酶-9和Ki-67在視網膜母細胞瘤中的表達和意義[J].山西醫藥雜志,2011,40(12):1195-1196.

[6]袁思奇,宋華.基質金屬蛋白酶-1、血管內皮生長因子在視網膜母細胞瘤中的表達及意義[J].眼科學報,2010,25(1):48-51.

Expressions of Matrix Metalloproteinase-9 and Vascular Endothelial Growth Factor in the Retinoblastoma

LIANG Jun，YANG Yiyi

(DepartmentofOphthalmology,thePeople’sHospitalofWeishiCounty,Kaifeng452170,China)

Objective To investigate the expressions and clinical significance of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the retinoblastoma.Methods Immunohistochemical S-P method was used to detect the expressions of MMP-9 and VEGF in the 100 patients with retinoblastoma and the 30 patients with normal retina tissues,their relationship with clinicopathological parameters were analyzed.Results The positive rate of MMP-9 [65.0%(65/100)] in the retinoblastoma was higher than that [6.7%(2/30)] in the normal retina tissues (P<0.05).The positive rate of VEGF [72.0%(72/100)] in the retinoblastoma was higher than that [10.0%(3/30)] in the normal retina tissues (P<0.05).The expressions of MMP-9 and VEGF in the retinoblastoma were related with cell differentiation degree and clinical stage (P<0.05).In the retinoblastoma,the expression of MMP-9 was positively related with VEGF (r=0.570,P<0.05).Conclusion High expressions of MMP-9 and VEGF may be related to the infiltration and metastasis of retinoblastoma.

retinoblastoma; matrix metalloproteinase-9; vascular endothelial growth factor

梁軍(1972-),女,主治醫師,主要從事眼科疾病相關臨床工作。

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.01.007

R739.7；R730.23

A

1673-5412(2017)01-0027-03

2016-08-13)