子宮內膜癌中P53、Ki-67和CA125的表達

周競奇

(濟源市人民醫院，河南 濟源 459000)

子宮內膜癌中P53、Ki-67和CA125的表達

周競奇

(濟源市人民醫院，河南 濟源 459000)

目的 探討子宮內膜癌組織中P53、Ki-67和血清中CA125的表達及其臨床意義。方法 采用免疫組化染色檢測35例子宮內膜癌(試驗組)和30例子宮內膜增生(對照組)組織中P53和Ki-67蛋白表達情況，并采用放射免疫法測定2組患者血清中CA125水平。結果 P53蛋白在試驗組有22例呈陽性表達，Ki-67蛋白有24例呈陽性表達，且兩者在對照組均呈陰性表達(P<0.05)。血清CA125水平在試驗組為(32.19±12.35) u·L-1，高于對照組的(8.23±2.58)u·L-1(P<0.05)。結論 P53、Ki-67和CA125在子宮內膜癌的發生、發展中起著重要的作用，三者聯合檢測不但可以指導臨床治療，同時也可用于觀察療效和判斷預后。

子宮內膜癌；P53；CA125；Ki-67；免疫組化染色

子宮內膜癌發病率占女性惡性腫瘤的7%，是常見的婦科腫惡性腫瘤。近年來，全球子宮內膜癌發病率不斷上升，已超過了宮頸癌的發病率，位居婦科惡性腫瘤的第2位，且呈現年輕化趨勢[1]。臨床上多數患者就診時其病變尚局限于子宮內，所以預后尚可，5 a總體生存率較高，約84%，但疾病一旦進展進入晚期，則預后不良，特別是處于Ⅱ～Ⅲ期的患者，5 a生存率顯著下降，約為50%[2]。因子宮內膜癌臨床治愈率改善不明顯，目前仍有約20%的患者復發且預后不良。如何高效選擇典型病例，準確、全面判斷預后，從而盡早制定出有價值的治療方案一直是臨床專家們的研究熱點。腫瘤的發生、發展是多因素、多基因共同作用的復雜過程[3]。p53基因發生突變時，則會演變成為促癌基因，并與腫瘤的遠處轉移有關[4]。Ki-67是一種與細胞增殖密切相關的細胞核抗原，可以反映腫瘤細胞增殖活性的指標[5]。CA125被廣泛應用于人類各種腫瘤的研究中，如子宮內膜癌、乳腺癌等。本研究采用免疫組化檢測子宮內膜癌患者組織中P53、Ki-67的表達情況，用放射免疫法檢測其血清CA125水平，探討三者檢測在子宮內膜癌中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2014年10月至2015年4月在我院接受治療的子宮內膜癌患者35例為試驗組，年齡48～62歲，根據分段診刮病理檢查已確診為子宮內膜癌。另選同期住院的子宮內膜增生患者30例為對照組，年齡42～58歲，且已經分段診刮病理檢查確診。2組患者間年齡、職業、學歷、生活習慣比較差異無統計學意義(P>0.05)。所有患者肝、腎功能正常，無心腦血管疾病、無糖尿病、無煙酒史，且近4個月內未服用過激素類藥物。

1.2 檢測方法 采用免疫組化染色的方法檢測子宮內膜癌組織和子宮內膜增生組織中P53、Ki-67的表達情況。選取2組患者的空腹肘靜脈血3 mL，離心后置于-40 ℃冰箱保存備用，采用放射免疫法測定患者血清CA125水平。

1.3 結果判定 P53、Ki-67陽性染色為棕黃色顆粒，均定位于腫瘤細胞核。將染色強度分為5個等級，(-)：未見陽性染色細胞；(+)：陽性染色細胞<10%或有輕度核淡染；(++)：10%～<30%細胞染色陽性；(+++)：30%～<70%細胞染色陽性；(++++)：70%～100%細胞染色陽性。

2 結果

2.1 2組P53表達比較 試驗組患者P53的陽性表達率為62.9%，共22例染色為陽性，其中5例為(+)、10例為(++)、3例為(+++)、4例為(++++)；對照組陽性表達率為0.0%，未見陽性表達病例，2組比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組P53表達比較 n(%)

2.2 2組Ki-67表達比較 試驗組患者Ki-67的陽性表達率為68.6%，共24例染色為陽性，其中6例為(+)、12例為(++)、3例為(+++)、3例為(++++)；對照組陽性表達率為0.0%，未見陽性表達病例，2組比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組Ki-67表達比較 n(%)

2.3 2組CA125水平比較 血清CA125水平在試驗組為(32.19±12.35)u·L-1，對照組為(8.23±2.58)u·L-1，比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組CA125水平比較 u·L-1

3 討論

3.1 P53蛋白在子宮內膜癌組織中的表達及其意義 1979年Linzer等[6]在研究DNA病毒SV40轉染的哺乳動物細胞時，發現了一種抑癌基因P53，其與SV40大T抗原結合。由于新發現的蛋白相對分子質量為53 000，因此命名為P53。在人體內P53基因全長20 kb，包含10個內含子和11個外顯子，位于17p13，可轉錄2.2～2.5 kb的mRNA[7]。P53分為野生和突變型，正常生理情況下，P53以野生型存在，是細胞生長的“監控器”，可以防止細胞發生癌變，維持低水平狀態，不發揮作用。多數情況下P53基因突變后會演變成為促癌基因，失去正常抑癌基因的生物學功能，喪失了抑癌活性，其突變發生部位為中央核心區域的突變熱點處[8]。研究發現在多數Ⅱ型子宮內膜癌中，P53出現過量表達，因此，可以將P53作為Ⅱ型子宮內膜癌的標志物[9]。但在Ⅰ型子宮內膜癌中，也出現了P53的陽性表達。有研究顯示，Ⅲ級Ⅰ型子宮內膜癌患者P53的陽性表達率25%～69%，而低級別Ⅰ型子宮內膜癌患P53的陽性表達率為14%～25%[10]。P53蛋白可以抑制惡性腫瘤的發生、發展，因此P53蛋白失活在惡性腫瘤的發生、發展過程中起著重要的作用。約50%的人類腫瘤中，存在有P53基因的突變，P53突變會造成嚴重的后果，引起細胞無限性增殖，當細胞暴露于不利環境條件下時，包括DNA損傷，P53能通過2條途徑發揮腫瘤抑制作用：誘導細胞的衰老凋亡和導致細胞周期阻滯[11]。另外P53可調控細胞的黏著、細胞活動性、失巢凋亡等有關的基因的轉錄，發揮其抑制腫瘤轉移的作用，因此，P53在腫瘤的轉移中也發揮著關鍵性的作用[12]。在子宮內膜癌患者中，P53基因的過度表達和突變是患者預后不良的最重要因素，且與患者的生存期長短有直接關系[13]。本研究中，對照組中未檢測到P53蛋白，說明良性增生組織中不存在P53基因突變，而試驗組P53陽性表達率為62.9%，其中7例強陽性染色標本中有5例為子宮內膜癌Ⅲ期或以上，說明P53蛋白的陽性表達與腫瘤預后有密切關系。

3.2 Ki-67蛋白在子宮內膜癌組織中的表達及其意義 1983年Gerdes等[14]在研究霍奇金淋巴瘤細胞系L428細胞的粗核成分免疫鼠時，首次成功研制出該抗體，由并命名為Ki-67。Ki-67抗體屬IgG家族，是一種單克隆抗體。體內Ki-67的過量表達與多種惡性腫瘤的生物學行為有著密切的相關性。目前關于子宮內膜癌病理特征與Ki-67的相關性的研究較多，但是缺乏統一性，多數研究顯示Ki-67和子宮內膜癌的分期、組織類型、分級及浸潤程度、預后有關[15]。但也有部分研究顯示Ki-67與子宮內膜癌的分期、浸潤深度、轉移、組織分級及復發沒有確切的相關性[16]。在細胞周期中，Ki-67的表達不斷發生變化，因此，Ki-67的表達是一個復雜的調節過程。Ki-67只表達于增生細胞中，而在靜止細胞中是不表達的[17]。在G0和G1早期細胞不表達Ki-67，最早表達于G1中晚期，發展至S期和G2期時，逐漸增高。由于半衰期短，因此有絲分裂結束后Ki-67開始降解[18]。據報道，由于Ki-67與人體多種惡性腫瘤的發生、發展、轉移及預后有著很大的相關性，因此，Ki-67陽性表達率的高低不僅可以用來鑒別腫瘤的良惡性，還可以用來判斷腫瘤的侵襲力強弱[19]。Ki-67因其半衰期短，且能夠準確反映細胞的增殖活性，故目前被廣泛用于腫瘤的生物學行為研究中。Ki-67在分泌期子宮內膜、子宮內膜單純增生、非典型增生、子宮內膜癌組織中陽性表達率呈現逐漸增加的趨勢，分別為2.6%、17%、42%和60%[20]。目前，WHO已經將Ki-67指數作為各種惡性腫瘤的輔助檢查手段，但是由于免疫組化中沒有統一標準計數Ki-67，因此，用免疫組化的方法檢測Ki-67來診斷不同子宮內膜病變，雖然能夠有效提高診斷準確率，但是，仍需后期的不斷實驗性研究和臨床大樣本試驗證實。本研究中，對照組中未檢測到Ki-67蛋白，說明良性增生組織中不存在Ki-67蛋白，而試驗組Ki-67蛋白陽性表達率為68.6%，說明Ki-67蛋白的陽性表達與腫瘤預后有密切關系。

3.3 血清CA125水平在子宮內膜癌中的表達及其意義 CA125分布廣泛，正常情況下，在子宮內膜、輸卵管、腹膜及其良性病變和惡性腫瘤中均有微量表達，CA125含有N-乙酰氨基葡萄糖、半乳糖及N-乙酰氨基半乳糖鏈[21]。CA125是一組高分子糖蛋白，胚胎發育中主要存在于體腔上皮細胞中，成體其表達于體腔上皮分化而來的各種組織器官中，如子宮、腹膜及蛻膜組織等[22]。目前關于子宮內膜癌組織中CA125的表達及其臨床意義研究報道甚少。曾有相關研究指出，子宮內膜癌患者的血清CA125水平與其臨床分期、病理類型及其轉移有關，如果血清CA125水平<32 IU·mL-1，90%的患者可判定為臨床早期，此時可考慮手術治療；但是如血清CA125水平>100 IU·mL-1，則表明89%的患者已經出現宮外轉移[23]。本研究中，血清CA125水平在對照組為(8.23±2.58)u·L-1，而試驗組則顯著升高，為(32.19±12.35)u·L-1，比較差異有統計學意義(P<0.05)。因此，CA125與子宮內膜癌發生、發展、轉移、臨床分期等有密切相關性，對估計預后也有一定的臨床借鑒價值。

在子宮內膜癌發生的早期，用免疫組化檢測P53蛋白有利于鑒別子宮內膜癌類型，有助于判斷子宮內膜的病變程度。Ki-67可以反映細胞的增殖能力及活性，其表達與子宮內膜組織分化程度等相關。血清CA125水平可以有效判斷子宮內膜癌的預后，在子宮內膜癌病變早期，聯合檢測組織P53、Ki-67及其血清CA125水平能夠判斷腫瘤的分化程度和腫瘤的侵襲力等生物學行為，同時為估計預后提供一定的借鑒價值。

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Expressions of P53,Ki-67 in the Tissues and CA125 in the Serum of Patients with Endometrial Carcinoma

ZHOU Jingqi

(JiyuanCityPeople’sHospital,Jiyuan459000,China)

Objective To investigate the expressions of P53,Ki-67 in the tissues and CA125 in the serum of patients with endometrial carcinoma and the clinical significance.Methods Immumohistochemical staining was used to detect P53 and Ki-67 protein in the 35 patients with endometrial cancer (the experimental group) and 30 patients with endometrial hyperplasia (the control group),the serum CA125 levels were detected by radioimmunoassay in the two groups.Results In the experimental group,P53 protein was positive of 22 patients,Ki-67 protein was positive of 24 patients,and both showed negative in the control group (P<0.05).Serum CA125 levels in the experimental group was (32.19±12.35) u·L-1,and was (8.23±2.58) u·L-1in the control group (P<0.05).Conclusion P53,Ki-67 and CA125 play an important role in the development of endometrial carcinoma,their combination detection not only guides the clinical comprehensive treatment,but also becomes the effective efficacy and prognostic indicator.

endometrial carcinoma;P53;CA125; Ki-67;immumohistochemical staining

周競奇(1975-)，女，副主任醫師，主要從事病理診斷工作。E-mail:zjq8308@126.com

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.01.006

R737.33；R730.23

A

1673-5412(2017)01-0023-04

2016-05-12)