氣相色譜法測定蔬菜、水果中的除草醚

秦安麗++樂淵++黎書懷++吳南村

摘要：建立了氣相色譜法測定蔬菜、水果中的除草醚。樣品用乙腈提取，經(jīng)GC-e/NH2小柱凈化，以乙腈+甲苯（體積比3∶1）溶液洗脫，采用氣相色譜ECD檢測器檢測，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，回收率為85%～110%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.7%～16.7%，定量限為0.001 mg/kg。該法準(zhǔn)確可靠、前處理簡便，適用于批量樣品的檢測。

關(guān)鍵詞：蔬菜；水果；除草醚；殘留量；氣相色譜

中圖分類號：TQ457.2+5 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2017）03-0551-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.03.041

Method for Determination of Nitrofen in Fruits and Vegetables by Gas Chromatography

QIN An-li， LE Yuan， LI Shu-huai， WU Nan-cun

（Analysis and Testing Center，Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Hainan Provincial Key Laboratory of Quality and Safety for Fruits and Vegetables，Haikou 571101，China）

Abstract： The method for determination of nitrofen in fruits and vegetables was established by gas chromatography. Samples were extracted with acetonitrile， purified by GC-e/NH2 small column， and eluted with acetonitrile and toluene（volume ratio 3∶1），then the extracted solution was analyzed by gas chromatography ECD detector and quantified by external standard method. The results showed that the recovery was between 85%～110%，the relative standard deviation was 5.7%～16.7%，the limit of quantitation was 0.001 mg/kg. The method was proved to be accurate， reliable and convenient in pretreatment，suitable for the determination of batch sample.

Key words： fruits； vegetables； nitrofen； residual； gas chromatography

除草醚[2，4-dichloro-1-（4-nitrophenoxy）benzene]，主要防治某些一年生闊葉及禾本科雜草，可用于白菜、甘藍、蘿卜、油菜、芥菜、水蘿卜、莖蘭、菜花、芹菜、胡蘿卜、香菜、茵香、葛筍、閣篙、菠菜等以及某些豆科蔬菜等菜田。除草醚作為醚類選擇性觸殺型除草劑，多數(shù)國家已禁止生產(chǎn)和使用。歐盟規(guī)定除草醚在柑橘中的最大殘留量為0.01 mg/kg[1]，中國已經(jīng)禁止使用，不得檢出。目前，國外檢測除草醚有氣相色譜法、高效液相色譜法和氣相色譜質(zhì)譜法等分析方法[2-14]，檢測的基體主要是稻米、水、原藥。目前國內(nèi)對其在蔬菜、水果的檢測很少報道。

GC-ECD檢測方法預(yù)處理簡單，回收率高，出結(jié)果快，效率高。本研究擬利用GC-ECD檢測蔬菜、水果中除草醚的殘留。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器設(shè)備 氣相色譜儀：Agilent 7890A GC-ECD；色譜柱：DM-1（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；勻漿機、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

1.1.2 試劑 乙腈、甲苯、正己烷、除草醚標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確吸取除草醚標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥95%）于10 mL容量瓶中，用正己烷溶解并定容至刻度，存放于冰箱 （-18 ℃），依所需濃度準(zhǔn)確吸取適量體積注入容量瓶中，以正己烷定容，配制工作液。

1.2 方法

1.2.1 樣品的制備 芒果、西瓜、草莓、結(jié)球甘藍、豇豆和蘿卜等樣品取可食部分，經(jīng)縮分后，將其切碎，充分混勻，制成待測樣。

1.2.2 樣品的提取 準(zhǔn)確稱取25.00 g試樣放入燒杯中，加入50 mL乙腈，高速勻漿（18 000 r/min） 2 min后用濾紙過濾，濾液收集到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈振蕩2 min，室溫下靜置30 min。

1.2.3 樣品的凈化 從具塞量筒中吸取10.00 mL乙腈溶液，放到50 mL圓底燒瓶中旋轉(zhuǎn)蒸干。然后過Wondasep GC-e/NH2小柱。柱子使用前用5 mL乙腈+甲苯（體積比3∶1）混合液活化，然后用6 mL乙腈+甲苯（體積比3∶1）混合液分3次溶解圓底燒瓶中的殘渣，倒到預(yù)淋洗好的柱子，待柱子的樣品快滴完時加入19 mL乙腈+甲苯混合液洗脫，收集洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸干，定容至5 mL，裝樣品瓶待測。

1.2.4 樣品的測定 進樣口溫度為250 ℃，進樣量為1 μL，色譜柱型號為DM-1（30 m×0.32 mm×0.25 μm），柱溫箱初始溫度為120 ℃，保持時間為1 min，速率為10 ℃/min，最終溫度為280 ℃，保持3 min，氮氣流量為1.0 mL/min，恒流模式，檢測器（u-ECD）305 ℃，尾吹流量為30 mL/min，在此條件下，以峰面積作為定量指標(biāo)，除草醚保留時間為14.017 min，標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜見圖1。

1.2.5 線性范圍及定量限的測定 取0.008、0.020、0.040 μg/mL的除草醚標(biāo)準(zhǔn)工作液，在“1.2.4”色譜條件下進行色譜分析，以峰面積（A）為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度（C）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到相關(guān)系數(shù)和線性范圍。

1.2.6 準(zhǔn)確度與精密度的測定 在芒果、西瓜、草莓、甘藍、豇豆和蘿卜空白樣品中分別加入0.20、0.50、1.00 μg/kg除草醚標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個樣品做5個平行樣品。加標(biāo)后渦旋混勻，靜置1 h，按“1.2.4”進行檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品前處理

根據(jù)除草醚性質(zhì)及相關(guān)文獻，比較了多種有機溶劑的提取效果，包括乙腈、丙酮、二氯甲烷、正己烷，乙腈較后3種溶劑回收率高，且干擾小。故后續(xù)試驗均選擇乙腈。

2.2 凈化條件的選擇

蔬菜、水果含的色素較多。先后用弗羅里硅土柱和GC-e/NH2小柱，用丙酮+正己烷（體積比1∶9）和乙腈+甲苯（體積比3∶1）洗脫凈化，并對其效果進行比較，發(fā)現(xiàn)GC-e/NH2小柱和乙腈+甲苯（體積比3∶1）凈化效果要好。

2.3 洗脫液體積的確定

用乙腈+甲苯（3∶1）對吸附了飽和量除草醚的GC-e/NH2小柱進行洗脫，每次5 mL 并分別收集洗脫液，經(jīng)氣相色譜檢測，第25 mL中均能檢測到除草醚，第30 mL洗脫液中檢測不到除草醚，因此選用25 mL乙腈+甲苯（3∶1）作為洗脫液。

2.4 測定條件的選擇

2.4.1 色譜柱的選擇 選擇了GC-ECD應(yīng)用最為廣泛的DM-1型色譜柱，并得到了比較好的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖。經(jīng)過優(yōu)化，在DM-1色譜柱除草醚的保留時間約為14.017 min。

2.4.2 升溫程序的優(yōu)化 按照以下升溫程序嘗試了對除草醚的色譜分離效果。①柱溫箱初始溫度為120 ℃，保持時間為1 min，速率為20 ℃/min，最終溫度為280 ℃，保持3 min，氮氣流量為1.0 mL/min，恒流，檢測器（u-ECD）305 ℃，尾吹流量為30 mL/min。②柱溫箱初始溫度為120 ℃，保持時間為1 min，速率為10 ℃/min，最終溫度為280 ℃，保持3 min，氮氣流量為1.0 mL/min，恒流，檢測器（u-ECD）305 ℃，尾吹流量為30 mL/min。通過分析比較，確定溫度程序為②，基質(zhì)干擾峰與目標(biāo)峰分離效果最好。

2.5 線性范圍、檢出限及回收率

曲線方程為y=323 750x-382.2，相關(guān)系數(shù)為0.999 9，除草醚在0.008～0.04 μg/mL的線性較好。在本方法測定條件下，方法的定量限為0.001 mg/kg。

加標(biāo)回收率如表1所示，回收率在85%～110%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在5.7%～16.7%。加標(biāo)色譜情況見圖2。

3 小結(jié)

本方法適合大批量蔬菜水果中除草醚殘留量的檢測，能使目標(biāo)物在色譜圖上有合適的保留時間、目標(biāo)峰和雜質(zhì)峰完全分離。其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于20%。該方法前處理操作便捷、耗時短、回收率高，符合蔬菜水果除草醚殘留量的檢測要求。

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