鹽酸氟桂利嗪片含量的HPLC測定分析

王玥

哈藥集團(tuán)制藥六廠 150000

鹽酸氟桂利嗪片含量的HPLC測定分析

王玥

哈藥集團(tuán)制藥六廠 150000

目的：通過科學(xué)的方式制定鹽酸氟桂利嗪藥物口腔崩解片相應(yīng)的HPLC類型含量測定方法。方法：使用色譜分析技術(shù)，以甲醇和磷酸二氫鉀為主要物質(zhì)的流動相，將試驗中流動相流速設(shè)定為每分鐘一毫升；色譜檢測波長設(shè)定為二百五十四納米；實驗柱溫設(shè)定為三十?dāng)z氏度；鹽酸氟桂利嗪這一藥物的濃度設(shè)定為四點八到五十七點六毫克每毫升，在這一標(biāo)準(zhǔn)下，數(shù)據(jù)顯示有良好的線性關(guān)系；結(jié)論：這種方法在實驗過程中表現(xiàn)出了操作流程簡便、檢測靈敏度較高、重現(xiàn)性好的特點，通過這種檢測方式的使用能有效的保證鹽酸氟桂利嗪藥物口腔崩解片在含量測量方面的檢測效果。

鹽酸氟桂利嗪；醫(yī)療藥物；液相色譜法

鹽酸氟桂利嗪藥物口腔崩解片在對患者的治療階段有著突出的作用，這種藥物在治療的過程中主要通過阻斷鈣通道而達(dá)到治療效果。此藥物的主要成分為鹽酸氟桂利嗪，這一藥物能在腦梗塞病癥、腦血栓病癥、腦動脈硬化病癥的治療過程中發(fā)揮突出的效果，同時在腦出血病癥的恢復(fù)期或者是對于腦外傷相應(yīng)的后遺癥治療都有突出的效果。也正因為這種藥物治療對于各種病癥都有良好的治療效果，所以藥物在生產(chǎn)過程中也出現(xiàn)了較多的形式，在這種情況下為了保證藥物的檢測具有良好的效果，也就需要技術(shù)人員根據(jù)實際的情況選擇最為合適的檢測方式，在現(xiàn)階段經(jīng)常會使用到的藥物檢測方式包括：電位滴定類型的檢測方法、紫外分光類型的檢測方法、色譜分析類型的檢測方法。在本次研究過程中主要針對于HPLC檢測方法進(jìn)行了全面的研究，且最終的研究結(jié)果也表明這種分析技術(shù)具有良好的準(zhǔn)確效果。

1.實驗所用的儀器以及試藥

1.1 主要儀器設(shè)備

FA-2104B電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司），UV-6100S紫外分光光度計（上海普美達(dá)儀器有限公司），島津SPD-10A高壓液相色譜儀（日本島津株式會社）；

1.2 主要實驗用藥

鹽酸氟桂利嗪對照品，鹽酸氟桂利嗪口腔崩解片（實驗室制備，規(guī)格5 mg），甲醇為色譜純，其他試劑為分析純，水為高純水。

2 實驗方法以及相應(yīng)結(jié)果

2.1 實驗過程中的色譜條件

色譜柱：shimadzu ODS C18柱（150.0 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-磷酸二氫鉀（0.01 mol/L，pH=3.5）（68∶32）；流速：1.0 ml/min；檢測波長：254 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20 μl。

2.2 實驗所用溶液配制的關(guān)鍵

2.2.1 對于溶液的配制，對照品溶液需要選用高精度的儀器進(jìn)行稱取。鹽酸對照品也需要放置于105℃的環(huán)境下進(jìn)行干燥.對于藥品稱量的數(shù)量，研究人員需要選用60mg的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，放置到50ml的容量瓶中，此時需要加入乙醇10毫升，并進(jìn)行溶解。為了讓藥品可以完全稀釋，研究人員還需要加入一些鹽酸溶液。選用的鹽酸質(zhì)量為24ml，再加入水到1000ml的刻度，做搖勻處理，作為對照品儲備液進(jìn)行歸置。此時研究人員需要對儲備液進(jìn)行精密吸取，劑量為一毫升，放置到一百毫升的容量瓶中。加入流動相稀釋到刻度，搖勻，此時就可以得到得濃度為12 μg/ml對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液在與鹽酸氟桂利嗪口腔崩解片進(jìn)行配置時，需要選取藥品的質(zhì)量是20片，使用精密的儀器進(jìn)行測定，為了保障結(jié)果的準(zhǔn)確性，實驗人員還需要將藥品進(jìn)行研碎處理，研細(xì)，使用藥品取用器皿對這些細(xì)粉進(jìn)行取用，放置到一個100ml的容量瓶中，此時同樣需要向藥品的量取瓶中加入10ml的乙醇溶液。然后再加入鹽酸溶液進(jìn)行稀釋到標(biāo)準(zhǔn)刻度，此時，就可以進(jìn)行搖勻處理，使用過濾膜對這些溶液進(jìn)行過濾。再采用精密量取容器將這些過濾后的溶液進(jìn)行量取，量取5ml質(zhì)量的續(xù)濾液，放置到五十毫升的容量瓶中，加流動相稀釋到刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 線性關(guān)系考察精密吸取對照品儲備液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml分別置于25 ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻；依“2.1”項下色譜條件，各取20 μl進(jìn)樣；以峰面積（A）和濃度（C）進(jìn)行回歸分析，得回歸方程 A=31250.67C-1547.37，相關(guān)系數(shù)為r=0.9999；表明鹽酸氟桂利嗪濃度為4.8～57.6 μg/ml呈線性關(guān)系。

2.3.2 空白試驗另取按處方量配制的空白輔料適量，照“2.2.2”項配制成空白溶液，進(jìn)樣測定，結(jié)果在對照品主吸收峰處無干擾；取供試品溶液同法測定，主吸收峰保留時間與對照品一致，無雜峰，記錄色譜圖，鹽酸氟桂利嗪HPLC色譜圖（HPLC chromatogram of Flunarizine Hydrochloride）。

2.3.3 精密度試驗取“2.2.1”項下高、中、低（38.40、28.80、19.23 μg/ml 3個濃度的溶液，在1 d內(nèi)不同時間測定5次，計算日內(nèi)精密度分別為0.85%、0.93%、1.06%；每天測定1次，連續(xù)測定5 d，計算日間精密度分別為1.21%、1.35%、1.59%。結(jié)果表明，方法精密度較好。

2.3.4 重現(xiàn)性試驗精密稱取同一批鹽酸氟桂利嗪口腔崩解片樣品約0.24 g，共6份，照“2.2.2”項分別配制供試品溶液，測定峰面積，計算鹽酸氟桂利嗪平均含量為 49.48 mg/g，RSD為0.59%。

2.3.5 穩(wěn)定性試驗取同一批樣品，按“2.2.2”項下配制供試品溶液，置室溫自然放置，分別于0、1、2、4、8、12、24 h取樣測定，考察其穩(wěn)定性，鹽酸氟桂利嗪的平均峰面積為 2.596× 106，RSD為0.92%。

2.3.6 回收率試驗精密稱取鹽酸氟桂利嗪對照品約4、5、6 mg各3份，按處方量加入相應(yīng)的輔料，分別按“2.2.2”項下配制高、中、低3個濃度的溶液，分別測定，計算回收率分別為99.26%、100.28%、101.27%，RSD分別為0.97%、1.26%、1.49%。其平均回收率為100.27%，RSD為1.00%（n=9）。

2.3.7 靈敏度試驗精密吸取對照品溶液1 ml，置于25 ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，取適量注入高效液相色譜儀，調(diào)節(jié)進(jìn)樣量。結(jié)果表明：當(dāng)進(jìn)樣量為2.6 μl時，信噪比（S/N）=3.1，確定最低檢測限為 1.25 ng，當(dāng)進(jìn)樣量為 11.2 μl時，S/N=10.5，確定最低定量限為5.38 ng。

2.4 樣品測定

取樣品3批，分別按“2.2.2”項下配制供試品溶液，精密吸取 20 μl注入高壓液相色譜儀，記錄峰面積；另取對照品溶液同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算鹽酸氟桂利嗪的含量。

3 討論

3.1 檢測波長的選擇

取照品溶液，在200～400 nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描；另取空白溶液，同法測定，鹽酸氟桂利嗪在253.6 nm處有最大吸收，輔料的吸收度僅為0.0029，干擾較小，故檢測波長選擇為254 nm。

3.2 流動相的選擇

調(diào)整流動相組分甲醇和磷酸鹽緩沖溶液的比例，當(dāng)甲醇-磷酸二氫鉀（0.01 mol/L，pH=3.5）（68∶32）時，色譜峰峰形最好，不拖尾，保留時間適當(dāng)，與雜質(zhì)峰的分離度高；同時進(jìn)行了甲醇、甲醇-乙腈等為流動相時的試驗，結(jié)果均不理想。

4.實驗結(jié)果討論

采用 HPLC法，考察了供試品溶液穩(wěn)定性、線性關(guān)系、回收率，并進(jìn)行了重復(fù)性試驗，結(jié)果表明本法適用于鹽酸氟桂利嗪片的含量測定。在此次試驗后又對市售的其他廠家相同規(guī)格樣品進(jìn)行了同法測定，結(jié)果良好。本藥品對 Ca2+引起的心肌慢動作電位、對血管自發(fā)的肌原性收縮活動無影響，對血管自發(fā)的肌原性收縮活動及周圍血管床的靜息血流量無影響。但對內(nèi)源性去甲腎上腺素、5 羥色胺及前列腺物質(zhì)與實驗性 K+引起的血管收縮則有明顯舒張作用，故臨床上多用氟桂利嗪治療腦血管功能障礙及旋暈、耳鳴、頭痛等中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，也用于由前庭功能紊亂引起的眩暈的對癥治療。

[1]郝紅芬.RP-HPLC-FLD法測定鹽酸氟桂利嗪片中鹽酸氟桂利嗪的含量及含量均勻度[J].海峽藥學(xué).2013(12)

[2]郝紅芬.RP-HPLC-FLD法測定鹽酸氟桂利嗪片中鹽酸氟桂利嗪的含量及含量均勻度[J].藥品評價.2013(20)

R 473.5

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1672-5018（2017）03-027-01