蜂膠手工皂的制作工藝研究

林曉云　公維潔　李結超　陳秋好

【摘 要】以蘆丁為標準對照品，使用超聲波處理提取法提取蜂膠手工皂中的黃酮，再用紫外分光光度法測定黃酮含量。結果表明，蘆丁濃度與吸光度回歸方程為 Y=0.0989X-0.0094，相關系數 R2= 0.9992，具有良好線性關系。通過精密度實驗，計算RSD得值為0.3016%，說明儀器穩定性良好。通過重復性實驗，計算得到1g、2g、3g、4g、5g不同含量的蜂膠手工皂的RSD分別為5.502%、1.861%、1.407%、0.8491%、0.4425%，說明數據準確性良好。最佳計算結果顯示當蜂膠的添加量為3g，黃酮含量為108.6081mg/g，蜂膠手工皂達到最佳效果。

【關鍵詞】蜂膠手工皂；紫外分光光度法；黃酮含量

手工皂是采用傳統工藝純手工制作的肥皂，它可以代替化學制成品用于清潔護理。手工皂在制作過程中，通常使用的是天然植物性油脂，不放任何化學添加劑，可以說是100%天然材料制成。在皂化過程中還會產生天然甘油，使其在皮膚上形成一層天然保護膜，對皮膚產生超凡的保濕效果。更為可貴的是，可在制作過程中添加各種活性成分如：各類精油、草本植物精華，以提高手工皂的功效，低溫冷制工藝，能夠保留這些天然材料中的營養成分，從而賦予手工皂更豐富的內涵[1-4]。此外，更重要的一點是手工皂是環保產品，使用后生成的脂肪酸鈉易降解，不會對環境造成污染[5]。

蜂膠，擁有“紫色黃金”的美譽，營養成分豐富，被廣泛用于日用化工產品中。具有抗菌、抗病毒、抗氧化和清除自由基、增強免疫力、抗腫瘤、降血糖與降血脂、抗輻射、止癢、排毒、遮光、護膚、促進組織再生和增強SOD活性等藥理作用，蜂膠的化工產品可以改善皮膚的質量，使皮膚變得細膩光滑富有彈性[6]。在手工皂中添加蜂膠制成蜂膠手工皂，其目的是在使用過程中，具有去污效果的同時，還能達到蜂膠藥理的功效。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

1.1.1 主要儀器

DHG-9245A型電熱溫鼓風干燥箱、HWS-26型超級恒溫水浴槽、ES.1200-4型分析天平、TU-1901型雙光束紫外可見分光光度計、X85-2S型恒溫磁力攪拌器、Ju-6224型調節型超聲波發生器。

1.1.2 主要試劑

橄欖油、椰子油、棕櫚油、康富麗牌蜂膠軟膠囊、氫氧化鈉、無水乙醇、蘆丁、硝酸鋁、結晶氯化鋁、亞硝酸鈉。

1.2 實驗步驟

1.2.1 手工皂的制作

本實驗制作的手工皂為50克，油脂的比例為：橄欖油20%，椰子油20%，棕櫚油60%。配方如表1所示：

稱取氫氧化鈉7.4g，加入17.4g蒸餾水，攪拌溶解。稱取橄欖油10g、椰子油10g、棕櫚油30g，放入恒溫水浴槽中加熱并攪拌，溫度設定為42℃。待氫氧化鈉溶液降到42℃時，緩慢加入到油脂中。攪拌至粘稠狀，加入蜂膠1g，混勻后，將皂液倒入模具，用保鮮膜封好，放進保溫箱，皂化36個小時，待手工皂變硬后，脫模。

按照以上步驟，分別制得0g、1g、2g、3g、4g、5g不同蜂膠含量的蜂膠手工皂。

1.2.2 對照品溶液制備

準確稱取干燥恒重的蘆丁對照品10mg，用無水乙醇溶解并定容至50mL，得到0.2mg/mL對照品溶液，冷藏備用。

1.2.3 硝酸鋁-亞硝酸鈉-氫氧化鈉顯色劑溶液的配制

1）10%Al（NO3）3溶液：稱取10.0062g硝酸鋁，取90mL去離子水，攪拌溶解，備用；

2）5%NaNO2溶液：稱取5.0051g亞硝酸鈉，取95mL去離子水，攪拌溶解，備用；

3）10%NaOH溶液：稱取10.0038g氫氧化鈉，取90mL去離子水，攪拌溶解，備用。

1.2.4 原材料處理

分別準確稱取蜂膠手工皂2克，加入30mL無水乙醇溶液，進行超聲波處理。處理后的液體放入冰水冷卻后進行擠壓渣滓，過濾，除去殘余皂基，保留乙醇相。余渣另加10mL無水乙醇，再次進行超聲波處理、擠壓渣滓、過濾，反復2～3次，直至濾渣皂基基本發白，合并濾液，用無水乙醇定容至50mL，此為蜂膠手工皂樣品待測試液。

1.2.5 最大吸收波長的研究

準確吸取1mL 0.2mg/mL的蘆丁標準溶液于25mL容量瓶中，加入5%NaNO2溶液1mL，搖勻，靜置6min，然后加入10% Al（NO3）3溶液1mL，搖勻，靜置6min，再加入10%NaOH溶液10mL，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置15min。以不加蘆丁標準液的空白試劑為參比，在400-700nm波長范圍進行波長掃描，得最大吸收波長。

1.2.6 蜂膠手工皂中黃酮含量的測定實驗

1）蘆丁標準曲線

準確吸取蘆丁標準溶液0.00mL，1.00mL，2.00mL，3.00mL，4.00mL，5.00mL，6.00mL，分別置于25mL容量瓶中，分別加5%NaNO2溶液1mL，搖勻，靜置6min，然后加入10%Al（NO3）3溶液1mL，搖勻，靜置6min，再加入10%NaOH溶液10mL，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置15min。以不加蘆丁標準液的空白試劑為參比，在508nm波長處測定吸光度。

以蘆丁濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程。

2）蜂膠手工皂皂基干擾實驗

分別準確移取不同含量的手工皂樣品溶液10mL各1份，分別置于50mL容量瓶中，分別加5%NaNO2溶液1mL，搖勻，靜置6min，然后加入10%Al（NO3）3溶液1mL，搖勻，靜置6min ，再加入10%NaOH溶液10mL，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置15min。以不加蘆丁標準液的空白試劑為參比，在508nm波長處測定吸光度。

3）蜂膠手工皂中黃酮含量的測定

分別準確移取不同含量的蜂膠手工皂樣品溶液10mL各1份，分別置于50mL容量瓶中，分別加5%NaNO2溶液1mL，放置6min，然后加入10%Al（NO3）3溶液1mL，放置6min，再加入10%NaOH溶液10mL，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，放置15min。以什么試劑都不加，只加樣品溶液為參比，在508nm波長處測定吸光度。代入回歸方程求出對應蘆丁含量的濃度，計算出黃酮含量。

4）精密度試驗

準確移取2mL 0.2mg/mL蘆丁供試品溶液置于25mL容量瓶中，加5%NaNO2溶液1mL，搖勻，靜置6min，然后加入10%Al（NO3）3溶液1mL，搖勻，靜置6min ，再加入10%NaOH溶液10mL，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置15min。以空白試液為參比，在波長508nm處測定吸光度，平行測定5次。

5）重復性實驗

準確稱取蜂膠加入量為1g的蜂膠手工皂2g，平行稱取5次，并標號1、2、3、4、5，按照1.2.4原材料的處理方法進行處理，得到處理后的樣品溶液，然后分別準確移取1號至5號的樣品液10mL，置于50mL容量瓶中，分別加5%NaNO2溶液1mL，搖勻，靜置6min，然后加入10%Al（NO3）3溶液1mL，搖勻，靜置6min，再加入10%NaOH溶液10mL，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置15min。以什么試劑都不加，只加樣品溶液為參比，在508nm波長處測定吸光度。

按照以上方法，分別測定蜂膠加入量為2g、3g、4g、5g的蜂膠手工皂的吸光度值。

1.2.7 黃酮含量的對比

根據所得實驗數據，以蜂膠添加量為橫坐標，黃酮含量為縱坐標，繪制圖形。

2 結果與分析

2.1 蜂膠手工皂的制備

產品外形光滑整齊， 色澤均勻，恒重數據見表2。

2.2 最大吸收波長的確定

如圖1所示，在508nm處有最大吸光度，所以選擇波長在508nm測定。

2.3 蘆丁標準曲線的繪制

由所測實驗數據，得到回歸方程Y=0.0989X-0.0094，r2=0.9992。實驗表明，蘆丁含量在0.0～1.2mg/mL與吸光度呈現良好的線性關系。

2.4 皂基干擾實驗

由表3可知：沒有加蜂膠的樣品液也有吸光度，主要是受皂基的影響，顯現出皂基的顏色。所以本實驗用的參比溶液選擇什么試劑都不加，只加樣品溶液。

2.5 蜂膠手工皂中黃酮含量的測定

將實驗所測吸光度帶入標準曲線回歸方程Y=0.0989X-0.0094，求出對應蘆丁含量的濃度，再代入公式：

得出不同含量的蜂膠手工皂中總黃酮的含量如表4所示：

2.6 精密度實驗

由表5中實驗測數據可見， RSD值為0.3016%，說明儀器的穩定性良好。

2.7 重復性實驗

由表6可知，1g、2g、3g、4g、5g不同含量的蜂膠手工皂的RSD分別為5.502%、1.861%、1.407%、0.8491%、0.4425%，說明數據的準確性良好。

2.8 黃酮含量的對比

根據所得實驗數據，以蜂膠添加量為橫坐標，黃酮含量為縱坐標，繪制圖形。系列1表示手工皂中黃酮含量隨蜂膠添加量的變化曲線，系列2表示理論黃酮含量隨蜂膠添加量的變化曲線。如圖所示，黃酮含量隨著蜂膠添加量的增加呈比例上升，表現出相應的線性關系。將所測值和理論值進行比較，實驗數據相差不大。說明在手工皂制作過程中，蜂膠有效成分的損失較小。

2.9 最佳含量的確定

在使用蜂膠手工皂過程中，若想體現蜂膠的最大功效，必須找出一個蜂膠手工皂中黃酮含量的最佳值。由文獻知化工產品中加入1-5%的蜂膠，才能達到保護皮膚、清除體表污垢、預防外在感染以及其它醫療保健功效[7]。根據所測得的數據，當蜂膠的添加量為3g，黃酮含量為108.6081mg/g時，蜂膠手工皂的效果達到最佳，結果見表7：

3 結論

本文采用紫外分光光度法，以蘆丁標準試液為對照品，以亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉為緩沖溶液的顯色體系，分別于508nm處分別測定蜂膠手工皂中的黃酮含量，建立了黃酮濃度吸光度關系的回歸方程Y=0.0989X-0.0094（R2=0.9992）。

測得1g至5g不同含量的蜂膠手工皂中黃酮含量分別為31.1719mg/g、68.3090mg/g、108.6081mg/g、147.2818mg/g、186.5615mg/g；與理論值40mg/g、80mg/g、120mg/g、160mg/g、200mg/g對比相差不大，其原因在于進行超聲波處理后，過濾時有少量的黃酮存在皂基中，沒有過濾出來。精密度實驗的RSD為0.3016%，1g-5g不同含量的蜂膠手工皂的重復性實驗的RSD分別為5.502%、1.861%、1.407%、0.8491%、0.4425%，實驗數據表明精密度及重復性的效果良好。結合文獻及實驗結果得出：蜂膠的添加量為3g，黃酮含量為108.6081mg/g時，蜂膠手工皂的效果達到最佳。本文對蜂膠手工皂的制作及工藝進行研究，數據可靠，為以后蜂膠手工皂的開發和評價提供科學的參考依據。

【參考文獻】

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[責任編輯：朱麗娜]