YB-1蛋白在宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及臨床意義

廖 雪，任黔川

(西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，四川瀘州 646000)

論著·臨床研究

YB-1蛋白在宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及臨床意義

廖 雪，任黔川△

(西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，四川瀘州 646000)

目的 研究YB-1蛋白在宮頸鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其意義。方法 采用免疫組織化學(xué)檢測(cè)YB-1蛋白在慢性宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)Ⅰ級(jí)、CINⅡ～Ⅲ級(jí)、宮頸鱗狀細(xì)胞癌(SCC)中的表達(dá)情況，分析YB-1蛋白的表達(dá)于SCC各臨床病理因素的相關(guān)性。結(jié)果 免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示YB-1蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞核，部分表達(dá)與細(xì)胞質(zhì)。YB-1蛋白在慢性宮頸炎中無(wú)表達(dá)，在CINⅠ級(jí)、CINⅡ～Ⅲ級(jí)、SCC中表達(dá)逐漸升高。YB-1蛋白在4組宮頸組織中的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中，慢性宮頸炎組、CINⅠ級(jí)組、CINⅡ～Ⅲ級(jí)組分別與SCC組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。YB-1蛋白的表達(dá)與宮頸病變程度之間呈正相關(guān)(P<0.05)。YB-1蛋白的表達(dá)在SCC患者各臨床病理學(xué)特征間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 YB-1蛋白量的變化可能與SCC的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

YB-1蛋白；腫瘤,鱗狀細(xì)胞；宮頸腫瘤；預(yù)后

子宮頸癌是僅次于乳腺癌的婦科最常見的惡性腫瘤，近年來(lái)，我國(guó)醫(yī)療水平逐漸提高，但宮頸癌的發(fā)病率和病死率卻逐年上升[1-2]，且出現(xiàn)年輕化趨勢(shì)。以往研究表明，HPV感染是導(dǎo)致宮頸癌的高危因素，但HPV感染者并不全部發(fā)展為宮頸癌，故宮頸癌的發(fā)生可能還涉及其他原因。

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，Y-盒結(jié)合蛋白1(Y-Box binding protein-1，YB-1)在多種腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，是一種能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖的相關(guān)蛋白。它可以誘導(dǎo)細(xì)胞過(guò)度增殖[3-4]，逃避免疫監(jiān)視[5-6]，抑制細(xì)胞凋亡[7]，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移[8-9]，并且可以直接促進(jìn)耐藥相關(guān)蛋白如P-糖蛋白(P-glycoprotein,p-gp)的生成[10]，抑制腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的敏感性。目前關(guān)于YB-1蛋白在宮頸癌中表達(dá)情況的報(bào)道極少，本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)YB-1在不同宮頸組織中的表達(dá)，探討其是否影響宮頸鱗狀細(xì)胞癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。

1 資料與方法

1.1 一般資料 105例標(biāo)本均來(lái)自本院(原瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院)婦產(chǎn)科2012年1月至2014年12月病理確診病例，所有患者均排除因其他疾病引起的宮頸病變，且術(shù)前未接受任何放化療及藥物治療。其中慢性宮頸炎15例，宮頸輕度非典型增生(CINⅠ級(jí))15例，宮頸中度非典型增生(CINⅡ級(jí))15例，宮頸重度非典型增生(CINⅢ級(jí))15例，宮頸鱗狀細(xì)胞癌(squamous carcinoma,SCC)45例，分期按國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO，2014年)分期標(biāo)準(zhǔn)判定。

1.2 主要試劑 兔抗人YB-1單克隆抗體購(gòu)于美國(guó)Abcam公司，DAB顯色試劑盒購(gòu)于DaKo公司，一抗稀釋液購(gòu)于北京博凌科為生物科技有限公司，其余試劑由西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院病理科提供。

1.3 免疫組織化學(xué)染色 采用免疫組織化學(xué)Envision法，具體步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作，其中YB-1抗體稀釋比例為1∶100。2名病理醫(yī)師對(duì)所有樣本切片的免疫染色結(jié)果采用雙盲法計(jì)數(shù)。以細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核出現(xiàn)淡黃色至棕褐色顆粒為YB-1蛋白表達(dá)陽(yáng)性。具體判定標(biāo)準(zhǔn)如下：高倍顯微鏡下(×400)，隨機(jī)選擇有病變組織的5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分比和染色強(qiáng)度評(píng)分。0分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比小于10%或無(wú)著色；1分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比10%～40%或淡黃色；2分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比41%～70%或棕黃色；3分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比大于70%或棕褐色。二者分值相乘，5個(gè)視野評(píng)分結(jié)果取均值。0～3分為(-)，4～5分為(+)，6～8分為(++)，9分為(+++)，得到各組的平均分?jǐn)?shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析比較。統(tǒng)計(jì)分析時(shí)(-)記為陰性表達(dá)，(+)～(+++)均記為陽(yáng)性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法用于計(jì)數(shù)資料之間的比較，秩和檢驗(yàn)用于等級(jí)資料之間的比較，Spearman秩相關(guān)用于相關(guān)性分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 YB-1蛋白的表達(dá)情況 YB-1蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞核，部分表達(dá)于細(xì)胞漿。在慢性宮頸炎組織中YB-1蛋白無(wú)表達(dá)(圖1A)，在CINⅠ、CINⅡ中表達(dá)很弱，僅有少數(shù)細(xì)胞呈淡黃色(圖1B、C)，在CINⅢ中表達(dá)稍強(qiáng)，可見部分細(xì)胞呈棕黃色(圖1D)，在SCC中表達(dá)均較強(qiáng)，大部分細(xì)胞呈棕褐色(圖2)。

A：慢性宮頸炎；B：CINⅠ；C：CINⅡ; D:CINⅢ。

圖1 YB-1在慢性宮頸炎、CINⅠ、CINⅡ及CINⅢ中的表達(dá)情況(免疫組織化學(xué)×400)

A：高分化SCC；B：中分化SCC；C：低分化SCC。

圖2 YB-1在宮頸高分化、中分化及低分化SCC中的表達(dá)情況 (免疫組織化學(xué)×400)

2.2 YB-1蛋白表達(dá)的結(jié)果分析 YB-1在慢性宮頸炎組、CINⅠ組、CINⅡ～Ⅲ組、SCC組4組中，陽(yáng)性表達(dá)呈逐漸增高趨勢(shì)。4組宮頸組織中的陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=33.45，P=0.000)。其中慢性宮頸炎組與CINⅡ～Ⅲ級(jí)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.52，P=0.018)；慢性宮頸炎組與SCC組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.71，P=0.000)；CINⅠ級(jí)組與SCC組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.49，P=0.001)；CINⅡ～Ⅲ級(jí)組與SCC級(jí)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.49，P=0.000)。而慢性宮頸炎組與CINⅠ組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.37，P=0.543)；CINⅠ級(jí)組與CINⅡ～Ⅲ級(jí)組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.61，P=0.054)。4組之間通過(guò)Spearman相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)YB-1的表達(dá)與宮頸病變程度之間呈正相關(guān)(rs=0.559，P=0.000)。見表1。

表1 各組織中YB-1的陽(yáng)性表達(dá)情況

2.3 YB-1蛋白表達(dá)結(jié)果與SCC臨床病理學(xué)特征的關(guān)系 YB-1陽(yáng)性表達(dá)與SCC臨床病理學(xué)特征差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但在Ⅱ期的平均秩次(25.27)高于Ⅰ期(18.47)，表明YB-1在Ⅱ期的表達(dá)強(qiáng)于Ⅰ期。在深肌層和全層浸潤(rùn)的平均秩次(19.44)高于淺肌層(14.71)，表明YB-1在深肌層和全層浸潤(rùn)組的表達(dá)強(qiáng)于淺肌層浸潤(rùn)組。見表2。

表2 YB-1蛋白表達(dá)與宮頸鱗狀細(xì)胞癌臨床病理學(xué) 特征的關(guān)系

等級(jí)資料的秩和檢驗(yàn)。

3 討 論

YB-1蛋白是一種冷休克蛋白[11]，其主要在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平控制基因的表達(dá)[12]。它在多種惡性腫瘤中存在高表達(dá)，且研究發(fā)現(xiàn)[13-14]，YB-1蛋白還可以與抑癌基因P53蛋白結(jié)合，抑制P53啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄，從而降低P53活性，因此被認(rèn)為是一種原癌基因。

本研究結(jié)果顯示：YB-1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)主要集中在細(xì)胞核。在慢性宮頸炎組織中無(wú)表達(dá)，在CINⅠ級(jí)組、 CINⅡ～Ⅲ級(jí)組、SCC組中陽(yáng)性表達(dá)呈逐漸增高趨勢(shì)，而SCC組中YB-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)明顯高于慢性宮頸炎組、CINⅠ級(jí)組、 CINⅡ～Ⅲ級(jí)組(P<0.05)，說(shuō)明YB-1蛋白在癌組織中高表達(dá)，而在非癌組織中低表達(dá)，這與其他學(xué)者的報(bào)道類似[15]，表明YB-1蛋白的表達(dá)隨宮頸病變程度加重而增加。探討其原因，可能與其激活信號(hào)傳導(dǎo)通路，促進(jìn)細(xì)胞增殖，影響細(xì)胞凋亡有關(guān)。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，YB-1陽(yáng)性表達(dá)與SCC臨床病理學(xué)特征差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，雖在Ⅱ期的表達(dá)強(qiáng)于Ⅰ期，在深肌層和全層浸潤(rùn)組的表達(dá)強(qiáng)于淺肌層浸潤(rùn)，但差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，這與劉小滿等[15]的研究結(jié)果不盡一致，原因可能在于：(1)腫瘤組織的特異性；(2)樣本量的限制。因此尚不能認(rèn)為YB-1在SCC中的表達(dá)與上述病理因素?zé)o關(guān)，具體原因可待進(jìn)一步的研究后再明確。

綜上所述，YB-1蛋白在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有一定的促進(jìn)作用，可能作為一種新的評(píng)估癌癥的生物標(biāo)記物。但能否通過(guò)對(duì)YB-1蛋白的檢測(cè)，推測(cè)宮頸癌患者的預(yù)后，有待進(jìn)一步研究。

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The expression and significance of YB-1 in cervical squamous carcinoma

LiaoXue，RenQianchuan△

(DepartmentofObstetricsandGynecology,theAffiliatedHospitalofXinanMedicalUniversity,Luzhou,Sichuan646000,China)

Objective To detect the expression of YB-1 and to research the relationship in the occurrence and development in the cervical squamous carcinoma(SCC) tissues.Methods Immunohistochemistry(IHC) envision was used to detect the expression of chronic cervicitis,CINⅠ,CINⅡ-Ⅲ and SCC.The relationship of YB-1 in the clinical pathological parameters of SCC were analyzed.Results YB-1 was mainly located in the nucleus in squamous cell,sometimes in the cytoplasm.The YB-1 protein did not expression in chronic cervicitis.In CINⅠ,CINⅡ-Ⅲ and SCC,the positive expression had a gradual increasing trend.The expression of YB-1 was satistically significant in four groups(P<0.05).The chronic cervicitis group,CINⅠgroup CINⅡ-Ⅲ group compared with the SCC group restivelly,the difference was statistically significant(P<0.05).From spearman rank correlation analysis:the expression of YB-1 was positively correlated with the degree of cervical lesions(P<0.05).In the cervical squamous carcinoma group,the expression of YB-1 was not associated with clinical pathological index of SCC patients(P>0.05).Conclusion The change of the quantity of YB-1 protein is closely related to cervical squamous cell carcinoma.

Y-box binding protein-l;neoplasms,squamous cell;uterine cervical neoplasms;prognosis

廖雪(1986-)，主治醫(yī)師，碩士，主要從事婦科腫瘤研究?！?/p>

，E-mail:gianchuanren@yeah.net。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.06.018

R737.33

A

1671-8348(2017)06-0777-03

2016-10-26

2016-11-28)