壯藥華鳳仙質量標準研究

何春歡 李紅 李嘉 姜平川

【摘要】目的：建立廣西壯藥華鳳仙的質量標準研究。方法：對華鳳仙的顯微鑒別、薄層色譜鑒別、水分、總灰分、浸出物等項目進行系統研究。結果：華鳳仙的薄層色譜鑒別特征明顯，專屬性強，制定了顯微鑒別、水分、總灰分和浸出物的控制指標。結論：華鳳仙建立顯微鑒別與薄層色譜鑒別項，水分不得過150%，總灰分不得過230%，浸出物不得少于85%。這些數據為華鳳仙的質量標準制定提供參考，對于保證其質量和臨床療效具有重要意義。

【關鍵詞】華鳳仙；質量標準；顯微鑒別；薄層鑒別

【中圖分類號】R283【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2017）02-0032-03

Abstract：

Keywords：

華鳳仙，別名水邊指甲花、象鼻花，為鳳仙花科植物華鳳仙Impatiens chinensis Linn 的全草，其味微苦、辛，具有清熱解毒、活血化瘀、消腫拔膿的功效，用于治療發熱、咳嗽、咳痰、肺結核、跌打損傷和瘀血疼痛，外用治蛇頭指瘡、癰瘡腫毒等病癥，為廣西民間常用中草藥[1-3]。據報道華鳳仙含有揮發油和黃酮成分，其中揮發油主要成分為正二十六烷和正十六烷酸乙酯[4-5]。 藥理研究表明，華鳳仙總黃酮提取物對大鼠心肌缺血再灌注損傷有明顯的保護作用[6]。本實驗主要對華鳳仙藥材性狀、顯微鑒別，薄層鑒別、水分、灰分等進行研究，為系統評價廣西華鳳仙質量提供科學依據。

1儀器與試藥

11儀器LY-HPCCD 萬能視頻成像裝置（成都勵揚精密機電有限公司），DFY-500高速萬能粉碎機（溫林市林大機械有限公司），SXz-25-10馬弗爐（沈陽市節能電爐廠），XS-205分析天平（梅特勤托利多儀器有限公司）。

12試藥華鳳仙樣品采自廣西各地（見表1），經本所黃云峰副研究員鑒定為鳳仙花科華鳳仙Impatiens chinensis Linn的全草。對照藥材（自制，編號HFX-1，經廣西中醫藥大學韋松基教授和廣西中醫藥研究院賴茂祥研究員鑒定為鳳仙花科華鳳仙Impatiens chinensis Linn）。所用試劑均為分析純。

2方法與結果

21鑒別

211顯微鑒別根據采集到的藥材樣品，分別制成顯微組織片和粉末片后觀察擬定，顯微組織片的制備以藥材經固定液固定后按石蠟切片法制片染色，粉末片以藥材經粉碎過四號篩后按粉末制片法制片，每個樣品均觀察不同產地不同批號藥材10張片以上。組織結構和粉末圖在顯微鏡下經LY-HPCCD萬能視頻成像裝置拍攝成像（圖1～3）。不同批號的華鳳仙藥材性狀及顯微鑒別結果見表2。

2111莖的橫切面表皮細胞1列，長橢圓形，排列整齊。皮層由數列類圓形薄壁細胞組成，排列疏松，有的細胞含有大量針晶或針晶束。皮層最內1～2層細胞稍小，排列緊密整齊。中柱維管束6個環狀排列，外韌型，多4大2小；韌皮部所占面積較窄，由篩管、韌皮薄壁細胞組成；木質部由導管、木薄壁細胞等組成；髓射線較寬。髓部明顯。見圖1。

2112葉的橫切面上、下表皮細胞各1列，但前者細胞長圓形或類圓形，較大，偶見氣孔與非腺毛，非腺毛細胞3～8個；后者細胞類方形，較小，其上可見氣孔。柵欄組織一列，類長柱形，不通過中脈，含葉綠體。海綿組織細胞排列疏松，內有針晶束。中脈維管束1個，木質部位于上方，由薄壁細胞、導管等組成；韌皮部位于木質部的下方，所占面積較少，細胞小而排列緊密。葉下表皮主脈顯著突起。見圖2。

2113粉末粉末黃綠色。纖維單個散在或成束，長梭形，先端鈍或平截，細胞壁多光滑，直徑18～25μm 。可見一些呈長方形、排列整齊的細胞，有的其中含有針晶束。草酸鈣針晶、柱晶多見，大小不一，散在或存在薄壁細胞內。非腺毛多散在，稍彎曲或平直，竹節或牛角狀，由 2～8個細胞組成，直徑21～32μm，長62 ～133μm。葉上表皮細胞不規則多邊形，垂周壁稍平直。下表皮細胞多邊形，垂周壁多深波狀彎曲，氣孔較多，多為不定式 。導管多為梯紋、螺紋導管。見圖3。

212薄層層析鑒別取本品粉末1g，加95%乙醇10mL，超聲提取20min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取華鳳仙對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2015年版四部通則0502薄層色譜法）試驗，吸取上述二種溶液各5～10μL，分別點于同一羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G板上，以環己烷-丙酮（4∶[KG-*3/5]3）為展開劑，展開，取出，晾干，在365nm熒光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。見圖4。

22檢查在制定本品檢查指標限度時，筆者根據本品的特點，主要考察每種方法對所測本品的適用性，重點考察了水分、總灰分和浸出物三項指標。

221水分照水分測定法（《中國藥典》2015年版四部通則0832水分測定法 第四法（甲苯法））測定。共考察測定了7批樣品的水分含量，測定兩次取平均值。7批華鳳仙藥材水分含量試驗結果，最高水分含量為142%，最低水分含量為93%，因此，水分含量擬定不超過150%。測定結果見表3。

222總灰分照灰分測定法（《中國藥典》2015年版四部通則2302灰分測定法）測定，共考察測定了7批華鳳仙藥材樣品的總灰分含量。7批華鳳仙樣品總灰分含量試驗結果為：最高總灰分為218%，最低總灰分含量為145%，因此，將本品總灰分擬定為不得超過230%。測定結果見表4。

223浸出物照醇溶性浸出物測定法（《中國藥典》2015年版四部通則2201浸出物測定法）項下的熱浸法，共測定了7批華鳳仙藥材樣品的浸出物含量。最高含量為173%，最低含量為91%，故擬定華鳳仙藥材醇溶性浸出物含量不得少于85%。實驗結果見表5。

3討論

研究表明華鳳仙在性狀和顯微方面有明顯的特征，性狀方面如葉對生，邊緣有稀疏的鈍鋸齒；花腋生，萼片向內彎曲成鉤狀；旗瓣圓形，翼瓣半邊倒卵形，基部一側有耳。顯微鑒別方面莖橫切面中柱維管束6個環狀排列，多4大2小，髓部明顯；粉末中纖維細胞壁光滑，非腺毛竹節或牛角狀，葉下表皮細胞垂周壁多深波狀彎曲。

筆者分別用乙酸乙酯、丙酮、95%乙醇、甲醇、水等溶劑對華鳳仙藥材進行超聲提取，過濾，濃縮后得到樣品液。點板后比較發現，95%乙醇提取物斑點信息較多，斑點清晰，故采用了乙醇作為溶劑；以不同比例的石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮、氯仿-甲醇、甲苯-丙酮、環己烷-丙酮等多種展開劑進行展開，結果以環己烷-丙酮（4∶3）為展開劑分離效果較好；顯色方面，在365nm熒光下檢視效果較好。本文采用的TLC鑒別法色譜清晰，分離度好，可作為華鳳仙藥材質量控制的方法。

華鳳仙中的主要化學成分有揮發油和黃酮類等化合物，多為醇溶性成分，綜合考慮后選用醇浸出物作為指標。

參考文獻

[1]江蘇新醫學院 中藥大辭典（上冊） [M]. 上海：上海科學技術出版社， 1985： 917-918.

[2]中國科學院中國植物志編輯委員會（主編）. 中國植物志第47卷（2） [M]. 北京： 科學出版社， 2002： 28-29.

[3]梁啟成， 鐘鳴 中國壯藥學[M].南寧： 廣西民族出版社， 2005： 390

[4]宋偉峰， 羅淑媛， 鐘鳴 超臨界CO2流體萃取華鳳仙揮發油成分分析研究[J]. 中國醫藥導報， 2012， 9（17）： 142-143.

[5]彭定基， 李兵， 陳曉麗 華鳳仙總黃酮的含量測定[J]. 廣西中醫學院學報， 2010， 13（1）： 54-55

[6]宋飛， 曾瑜 華鳳仙總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用及其機制探討[J]中國醫院藥學雜志， 2014， 34（7）： 515-520

（編輯：陶希睿）