HPLC法測定達沙替尼的含量

張萌 孫品 魏衍綱(辰欣藥業股份有限公司，山東 濟寧 272031)

HPLC法測定達沙替尼的含量

張萌 孫品 魏衍綱(辰欣藥業股份有限公司，山東 濟寧 272031)

目的建立達沙替尼的含量測定方法，為其質量標準提供依據。方法：色譜柱：島津Wondasil C18（5μm，4.6× 250mm）；柱溫：30℃；流動相：以0.05mol/L醋酸銨（pH5.5± 0.05）為流動相A；乙腈為流動相B，梯度洗脫；流速：1 mL/min；檢測波長：320nm。結果在該色譜條件下，達沙替尼在0.09～0.21mg/ml范圍內線性關系良好，相關系數為0.9999，達沙替尼供試品溶液的穩定性以及所建立定量方法的專屬性、重現性、精密度、加樣回收率均符合要求。結論所建立的測定方法簡便、穩定、專屬性強、可重復性好，可以用于達沙替尼的質量控制。

高效液相色譜法；達沙替尼；含量測定；

達沙替尼[1]是多靶點受體酪氨酸激酶受體抑制劑，臨床用于對既往治療失敗或不耐受的慢性髓系白血病（CML）的所有病期患者,同時還用于治療對其他療法耐藥或不耐受的費城染色體陽性的急性淋巴細胞白血病（ALL）成人患者。該藥由美國Bristol Myers Squibb公司研發，2006年6月由美國FDA批準上市,商品名為SPRYCEL[2]。該藥也被證明可治療許多其他類型的癌癥，包括加速期的前列腺癌.

本研究采用高效液相色譜（HPLC）技術建立達沙替尼的質量控制研究提供參考。

1 儀器與試藥

島津LC-20AT高效液相色譜儀；SPD-20AVP紫外-可見光檢測器，HW2000色譜工作站；十萬分之一電子分析天平（梅特勒公司）。

達沙替尼（辰欣藥業股份有限公司；批號：160924301，160924302，160924303）。

達沙替尼對照品（辰欣藥業股份有限公司，含量：99.20%）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：島津Wondasil C18（5μm，4.6×250mm）；以0.05mol/ L醋酸銨（pH5.5±0.05）為流動相A；乙腈為流動相B，梯度洗脫；流速：1 mL/min；檢測波長：320nm,進樣量10μl，空白溶劑不出峰，空白溶劑及混合溶液中各雜質均不干擾本品測定；供試品主峰理論板數為69257，拖尾因子為1.05，說明本法系統適用性良好。

2.2 供試品溶液

取達沙替尼約15mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加稀釋液[0.1mol/L鹽酸-乙腈（50:50）]適量，超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.3 線性關系考察

精密稱取達沙替尼對照品15.12mg，置25ml量瓶中，用稀釋液適量超聲使溶解，放冷，加稀釋液稀釋至刻度，搖勻，作為線性試驗儲備液。分別精密量取儲備液1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml、3.5ml置于10ml容量瓶中，用稀釋液稀釋至刻度，搖勻，即得線性0.09、0.12、0.15、0.18、0.21mg/ml溶液；分別取上述溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以達沙替尼濃度和相對應的峰面積做線性回歸，以峰面積（A)對濃度C（mg/mL)進行線性回歸：A=5E+07X-8566.2 R=0.9999,在該色譜條件下，本品在0.09mg/ml～0.21mg/ml，其峰面積與濃度呈良好線性關系。

2.4 溶液穩定性

取同一批次的達沙替尼樣品（批號:160924301），按照“2.2”項下方法制備成供試品溶液，置于室溫下，于0h、2h、4h，精密量取20μl注入液相色譜儀，測定達沙替尼峰面積值并計算RSD值為0.65%，表明供試品溶液在室溫放置的4h內是穩定的。

2.5 精密度

稱取達沙替尼7.50mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加稀釋液適量，超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，取10μl連續6次注入液相色譜儀，記錄色譜圖，連續進樣6次的峰面積RSD值為0.19%。

2.6 重復性

分別稱取達沙替尼6.0mg、7.5mg、9.0mg各三份，置50ml量瓶中，加稀釋液適量，超聲使溶解，放冷，加稀釋液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另稱取達沙替尼對照品7.5mg，置50ml量瓶中，加稀釋液適量，超聲使溶解，放冷，加稀釋液稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液；按“2.1”項下色譜條件進行平行測定，進樣量10μl，測定達沙替尼峰面積積分值并計算RSD值為0.36%，表示本方法的重復性良好。

2.7 檢測結果

取3批樣品（批號：160924301，160924302，160924303），按2.1項方法制備供試品溶液及對照品溶液，分別精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算含量。3批樣品的含量分別為99.27%，99.15%，99.26%。

3 結語

通過查閱參考文獻，并經過嚴格的實驗驗證，采用HPLC法測定達沙替尼的含量的方法，能夠有效分離、檢驗達沙替尼的含量，專屬性強、準確度高，操作簡便、準確，可用于該品種的質量控制。

[1]Mcintyre JA，Castaner J，Bayes M.Dasatinib：treatment of leukemia treatment of solid tumors Bcr-Abl and Src kinase inhibi?tor[J].Drugs of the Future，2006，31（4）：291.

[2]徐漫漫，李俊東，肖娟，等.達沙替尼聯合卡鉑對卵巢癌細胞株OVCAR3抑制作用的研究〔J〕.藥物研究，2012，07-0061-02.