高效液相色譜分類及工作原理

張旦亞 楊吉興(浙江龍盛化工研究有限公司，浙江紹興312300)

高效液相色譜分類及工作原理

張旦亞 楊吉興(浙江龍盛化工研究有限公司，浙江紹興312300)

隨著我國科學技術(shù)的快速發(fā)展，我國高效液相色譜也隨之得到了一定的發(fā)展。色譜法就是利用混合物中的各組分在流動相與固定相中分配系數(shù)的不同，進行連續(xù)反復多次的分配，從而形成差速運動，達到分離的效果。高效液相色譜法是一種新型的分離分析技術(shù)。文本主要介紹了高效液相色譜法的分類及工作原理。

高效液相色譜；分類；工作原理；分配色譜法

高效液相色譜法是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，通過高壓輸液系統(tǒng)，把不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。高效液相色譜已經(jīng)有將近三十的發(fā)展歷史，在色譜原理研究、儀器水平、離子分離分析方面有了很大的進步。文本主要介紹了高效液相色譜分類及工作原理。

1 高效液相色譜概念界定及分類

1.1 高效液相色譜概念界定

高效液相色譜——高效液相色法，它是一種與經(jīng)典液相色譜完全不同的，一種基于儀器方法的高效能的分離方法。高效液相色譜十一局氣相色譜理論發(fā)展起來的新技術(shù)。它被廣泛應用于醫(yī)學藥物、環(huán)境保護、食品加工、農(nóng)業(yè)種植等方面。但是，由于高效液相色譜法是一種新型的高效能分離技術(shù)，在應用上還不是很成熟，仍然處于發(fā)展階段。高效液相色譜的儀器配置包括：色譜泵及控制器、色譜柱、檢測器、進樣器、數(shù)據(jù)處理及控制。它采用高壓輸液泵，高效微粒固定相和高靈敏度檢測器進行分析。它的主要特點是：快速、高效、靈敏度強、樣品回收利用比較簡單。

1.2 高效液相色譜分類

高效液相色譜主要分為以下幾類，第一類，液-液分配色譜法，在液-液分配色譜中，流動相與固定相都是液體，它可以適用于所有保養(yǎng)品的分離分析；第二類，液-固吸附色譜，它把固體吸附劑作為固定相。液-固吸附色譜的本質(zhì)就是依據(jù)所測樣品在固定固定相上的吸附作用的不同進行分離；第三類，離子交換色譜法，通過離子交換原理和液相色譜相結(jié)合對溶液中的陽離子和陰離子進行測定；第四類，離子對色譜，它被廣泛應用于強極性有機堿和有機酸的分離分析；第五類，離子色譜法；第六類，空間排阻色譜法，它主要適用于比較大的分子的分離。文本主要對幾種常見的常見高效液相色譜進行全面分析介紹，常見的常見高效液相色譜有分配色譜法、吸附色譜法、離子交換色譜法和凝膠色譜法。

2 幾種比較常見的高效液相色譜工作原理

2.1 分配色譜法

分配色譜法是常見高效液相色譜種應用最為廣泛的一種分離分析方法。它的工作原理是，通過兩種完全不相溶的液相，也就是使固定相與流動相按照它們各自的溶解度進行分配。分配色譜法又分為液-液色譜與鍵合相色譜。液-液色譜通過物理吸附的原理把液相固定相涂抹于所測物品表面。而鍵合相色譜則是根據(jù)化學反應使有機分子鍵合在所測物品或者是硅膠表面上。在分配色譜中，需要依據(jù)溶質(zhì)、固定相和流動相之間分子的分離作用力對流動相和固定相進行選擇。

2.2 吸附色譜法

吸附色譜法又叫液固色譜，顧名思義也就是把固體吸附劑作為固定相。這類固體吸附劑大部分都是一些孔比較多的固體顆粒物，由于這些固體顆粒物表面有很多小孔，所以便于吸附。吸附色譜的工作原理是依據(jù)所測物品在固定相上的作用不同進行分離分析。一般會選用氧化鋁、聚酰胺、硅膠等具有吸附活性的化學物品作為固體吸附劑。吸附色譜的顯著特點就是操作簡單，比較適用于分離一些溶解在非極性溶劑中并且具有中等相對分子質(zhì)量是非離子性的物品分離，比如幾何異構(gòu)體。

2.3 離子交換色譜法

離子交換色譜就是通過被分離物質(zhì)在離子交換樹脂上的離子交換勢不相同導致組分分離。比較常見的離子交換劑有，纖維素、合成樹脂及硅膠。硅膠不但可以適用于分配色譜，還可以使用離子交換色譜。離子交換色譜工作原理是通過分離離子化合物、有機堿和有機酸等可以電離的化合物和離子基團容易相互作用的化合物，進行分離。

2.4 凝膠色譜法

凝膠色譜法還可以稱為尺寸排斥色譜，其工作原理是根據(jù)所測物品分子尺寸大小和形狀的不同進行分離。凝膠色譜之所以又叫尺寸排斥色譜，是因為凝膠空穴的大小是與所測物品被分離分子的大小大致相吻合的。如果分子太大就會被阻擋在空穴外面，被排斥在外面。而小分子就會進入空穴。一般我們會選用瓊脂糖凝膠作為填充材料。同時，流動相也有選擇功能，它可以根據(jù)載體和所測物品的本質(zhì)特點決定是選用水或者有機溶劑。除此之外，凝膠色譜的分辨力很高，一般情況下不會發(fā)生變性，所以一般會被用來分離分子量比較高的化合物。

3 結(jié)語

高效液相色譜雖然幾經(jīng)有了三十年的發(fā)展歷史，但是在發(fā)展的還不算完善，在一定程度上仍然存在一定的缺陷。本文詳細分析介紹了高效液相色譜的分類以及工作原理，希望可以加深人們對高效液相色譜的人是與理解，讓高效液相色譜更好的為人類服務。高效液相色譜的發(fā)展任重而道遠，我們必須不斷的實踐，在實踐中總結(jié)經(jīng)驗教訓，不斷優(yōu)化改造高效液相色譜法。讓科學技術(shù)帶動我國的經(jīng)濟發(fā)展。所以，對高效液相色譜的分析與研究對我國各方面的發(fā)展都有積極的意義。

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