IL-4-590C/T基因多態性與兒童支氣管哮喘關系的Meta分析*

任 俠，王莎莎，王 珊，成芳娟，馬程遠，關 鍵

(石河子大學醫學院第一附屬醫院呼吸二科，石河子 832008)

IL-4-590C/T基因多態性與兒童支氣管哮喘關系的Meta分析*

任 俠，王莎莎，王 珊，成芳娟，馬程遠，關 鍵△

(石河子大學醫學院第一附屬醫院呼吸二科，石河子 832008)

目的 探討白細胞介素4(IL-4)基因-590C/T(rs2243250)多態性與兒童支氣管哮喘(簡稱哮喘)發病風險的相關性。方法 計算機檢索CNKI期刊全文數據庫、萬方醫學期刊數據庫、維普醫藥信息資源系統、Pubmed、百度學術、谷歌學術有關IL-4基因-590C/T多態性與兒童哮喘發病風險的病例-對照研究，檢索時限均為從建庫至2016年1月。采用RevMan 5.2軟件和Stata12.0軟件進行Meta分析，計算合并OR值以及 95%可信區間(CI)。結果 最終納入7個病例對照研究，共計哮喘患者1 167例為病例組和1 101例健康者為對照組。Meta分析結果顯示，5種遺傳基因型CT+CC和TT，CC和CT+TT，CC和TT，CC和CT，C和T都可增加兒童支氣管哮喘發病風險，5種基因型的OR(95%CI)分別為0.7(0.57～0.85)，0.56(0.43～0.72)，0.46(0.33～0.64)，0.64(0.48～0.85)，0.45(0.27～0.77)；人種亞組分析結果顯示，在亞洲人群中基因型CC和CT+TT，CC和TT，CT和TT，C和T與兒童支氣管哮喘發病風險存在相關性，OR(95%CI)分別為0.50(0.35～0.72)，0.50(0.27～0.95)，0.61(0.41～0.92)，0.47(0.23～0.95)，P值分別為0.01、0.04、0.02、0.03，在非亞洲人群中基因型CC和CT+TT，CC和TT，CC和CT與兒童支氣管哮喘發病相關OR(95%CI)分別為0.63(0.44～0.90)，0.49(0.25～0.96)，0.67(0.45～0.98)，P值分別為0.01、0.04、0.04。結論 IL-4基因-590C/T多態性與兒童支氣管哮喘易感性相關。

哮喘；白細胞介素4；Meta分析；多態性；-590C/T

支氣管哮喘(簡稱哮喘)是一種以氣道高反應導致氣道堵塞為特征的氣道慢性炎癥性疾病，由多種細胞和細胞因子共同參與，與Th2免疫應答有關[1]。在哮喘的發生發展中，Th1/Th2失衡是過敏性哮喘發病的一個重要機制[2]。Th0細胞在正常機體中往往會按特殊比例分化為Th1和Th2細胞，然而在哮喘患兒體內Th1類細胞功能不足，Th2細胞分泌增多[3-4]，從而誘導氣道高反應及炎癥的發生[5]。白細胞介素4(IL-4)是誘導Th2細胞分化的關鍵因子[6-7]，在兒童哮喘中發揮正性促炎作用[8]。研究表明，人IL-4基因長度約為10 kb，包括4個外顯子和3個內含子，定位于5號染色體的q31-q33區[9]。IL-4也是調節IgE合成的重要基因，該基因變異可導致相關蛋白產生的失衡[10]。多項研究結果提示IL-4-590C/T基因高表達可能是誘發支氣管哮喘發病的重要原因之一[11-12]。IL-4基因多態性與支氣管哮喘及呼吸道高反應性密切相關[13]，但目前的研究結論存在一定的差異[14]，且各研究的樣本量較小。為進一步明確IL-4-590C/T基因多態性與兒童支氣管哮喘的關系，本研究進行Meta分析，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 納入標準 病例對照研究；根據相關指南明確診斷為哮喘的患者；IL-4-590C/T基因突變；同一團隊的研究結果重復發表的以影響力高的為準；標本為血液；結局指標為兒童哮喘的發病風險；文種限中、英文。

1.2 排除標準 重復研究，研究對象不是人類，會議摘要，檢測方法、手段描述不準確，不能提取數據的研究，文獻內容未涉及IL-4-590C/T，對照組基因型不符合Hardy-Weinberg(H-W)遺傳平衡定律，非中、英文文獻，STREGA評分低于3分。

1.3 檢索策略 計算機檢索CNKI期刊全文數據庫、萬方醫學期刊數據庫、維普醫藥信息資源系統、 Pubmed數據、百度學術、谷歌學術搜索，納入關于IL-4基因-590C/T多態性與兒童發病風險相關性的研究，檢索時限均為建庫至2016年1月。文種限中、英文。英文檢索詞：主題詞“asthma”，聯合自由詞“interleukin-4”“IL-4”“polymorphism”“variant”“mutation”；中文檢索詞：主題詞“哮喘”，關鍵詞“白細胞介素-4”“多態性”“突變”。

1.4 文獻篩選、資料提取與質量評價 由2名評價者按照納入與排除標準獨立篩選文獻、提取資料和評價納入研究的方法學質量。如遇分歧，則討論解決或交由第三方協助裁定。制定數據提取資料，提取的內容主要包括：第一作者、發表時間、研究地區、種族、例數、各基因型數量、基因型檢測方法等資料。

納入研究的方法學質量評價參照STREGA標準，包括:(1)樣本量充分與否；(2)診斷標準交代清楚與否；(3)分組配匹情況；(4)對照組與病例組是否具有可比性，對照組基因型分布是否符合H-W遺傳平衡定律；(5)基因檢測方法合理與否；(6)數據充分與否。以上6項，每滿足一項記為一分，總分大于或等于3分者為質量可靠。

1.5 統計學處理 采用CoChrane協作網提供的Reveiwmanager 5.2軟件和Stata12.0軟件進行Meta分析。使用Reveiwmanager 5.2軟件繪制森林圖，呈現IL-4-590C/T與哮喘相關性在5中遺傳模型下的基因型分布(TC+CC和TT，CC和TC+TT，CC和TT，CT和TT，C和T)，并采用 2檢驗判斷各研究結果間的異質性，若P>0.10，I2<50%時，研究結果間同質，采用固定效應模型進行合并分析，計算OR值及95%CI；反之，則采用隨機效應模型進行合并分析。發表偏倚通過使用Reveiwmanager 5.2軟件繪制漏斗圖直觀判斷及通過使用Stata12.0軟件Egger′s回歸法和Begg′s秩相關法定量評估，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 文獻檢索結果 初檢出文獻715篇，經 EndNote X7去除重復文獻后剩余589篇，按入選標準和排除標準再經逐層篩選后，最終納入研究的文獻共計7篇[12,15-20]，共計1 167例為病例組和1 011例健康者為對照組，3篇中文文獻[15-16,18]，4篇英文文獻[12,17,19-20]，其中，6篇為亞洲人群[12,15-19]，1篇為歐洲人群[20]，1篇為非洲人群[17]，所有納入研究的對照組基因型分布均符合HWE平衡(P>0.05)。文獻篩選流程及結果見圖1。

圖1 文獻篩選流程及結果

2.2 納入研究的基本特征 納入的研究中，一項研究[20]的種族來自歐洲，一項研究的種族來自非洲[17]，其余都來自亞洲，納入研究的基本特征見表1。

PCR:聚合酶鏈反應；RFLP:限制性片段長度多態性。

2.3 Meta分析結果

2.3.1 總體 通過Reveiwmanager 5.2軟件對納入的7篇文獻進行合并分析，結果顯示5種遺傳基因型CT+CC和TT，CC和CT+TT，CC和TT，CC和CT，C和T都可增加兒童支氣管哮喘發病風險(CT+CC和TT，OR=0.7，95%CI0.57～0.85，P<0.01；CC和CT+TT，OR=0.56，95%CI0.43～0.72，P<0.01；CC和TT，OR=0.46，95%CI0.33～0.64，P<0.01；CC和CT，OR=0.64，95%CI0.48～0.85，P<0.01；CT，OR=0.45，95%CI：0.27～0.77，P<0.01)，見圖2。

2.3.2 亞組分析 人種亞組分析結果顯示，在亞洲人群中基因型CC和CT+TT，CC和TT，CC和CT，C和T與兒童支氣管哮喘發病風險存在相關性(CC和CT+TT，OR=0.50，95%CI0.35～0.72，P<0.01；CC和TT，OR=0.50，95%CI0.27～0.95，P=0.04；CC和CT，OR=0.61，95%CI0.41～0.92，P=0.02；C和T，OR=0.47，95%CI0.23～0.95，P=0.03)；在非亞洲人群中基因型CC和CT+TT；CC和TT；CC和CT與兒童支氣管哮喘發病相關(CC和CT+TT，OR=0.63，95%CI0.44～0.90，P=0.01；CC和TT，OR=0.49，95%CI0.25～0.96，P=0.04；CC和TT，OR=0.67，95%CI0.45～0.98，P=0.04)。見表2。

2.4 敏感性分析 為了評估本次研究結果的穩定性，進行敏感性分析，對納入研究依次剔除1篇文獻后重新進行 Meta分析，結果顯示各遺傳模型合并效應量無明顯改變，說明此次研究結果較穩定。

2.5 發表偏倚分析 以IL-4-590C/T與哮喘相關性研究的OR值為橫坐標，以其自然對數的標準誤為縱坐標，使用Reveiwmanager 5.2軟件繪制漏斗圖，圖形中的三點基本對稱，無明顯發表偏移(圖3)；使用Stata12.0軟件對納入 Meta分析的7篇文獻進行發表偏倚的定量評價(表3)，差異無統計學意義(P>0.05)。

圖2 IL-4-590C/T基因多態性與哮喘相關性基因型CC和CT與兒童哮喘相關性

項目基因模型樣本量哮喘組對照組相關秩檢驗ORCIZP模型異質性檢驗PI2(%)總體CC+CT和TT116711010.700.57～0.853.6<0.01F12.740.0845CC和CT+TT116711010.560.43～0.724.47<0.01F0.750.2720CC和TT8066820.460.33～0.644.68<0.01F11.10.1337CC和CT5605790.640.48～0.853.11<0.01F5.360.620C和T242626220.450.27～0.772.94<0.01R87.85<0.0192亞洲人CC+CT和TT9107720.700.49～0.991.990.05R12.270.0359CC和CT+TT9107720.500.35～0.723.79<0.01F7.070.2229CC和TT6415110.500.27～0.952.110.04R11.040.0555CC和CT3293550.610.41～0.922.350.02F4.410.490C和T184015440.470.23～0.952.110.03R80.33<0.0194非亞洲人CC+CT和TT2572390.570.29～1.121.630.10F0.080.770CC和CT+TT2572390.630.44～0.902.510.01F0.850.360CC和TT1651710.490.25～0.962.070.04R0.030.860CC和CT2312240.670.45～0.982.050.04F0.860.350C和T5864780.400.17～0.982.000.05R7.5<0.0187

F：固定效應模型；R：隨機效應模型。

圖3 Ⅱ-4-590C/T基因多態性與哮喘相關性基因型CC和CT漏斗圖

基因型Begg'sTestZPEgger'stestZPCC+CT和TT0.370.71-0.870.417CC和CT+TT1.110.2660.920.394CC和TT0.370.7110.680.522CC和CT0.370.7110.60.572C和T0.370.711-0.880.417

3 討 論

哮喘是一種復雜的氣道疾病，可能是由環境因素、免疫因素、遺傳因素多種因素共同作用導致的慢性氣道炎癥及氣道重構[21]。哮喘是兒童期最常見的慢性疾病，發病率和病死率呈逐年遞增趨勢[22]。第3次中國城市兒童哮喘流行病學調查，我國城區0～14歲兒童哮喘總患病率為3.02%[23]，較10年前明顯增加[24]。此病由于病程長易反復，給患兒家庭以及社會造成巨大的經濟負擔。然而，目前哮喘的發病機制仍未闡明，隨著遺傳學和分子生物學的快速發展，越來越多的研究開始注重基因多態性方面的研究，尋找哮喘的治愈方法已經變得刻不容緩。

IL-4早在20世紀中期被發現并命名為B細胞生長因子，來源于Th2細胞，是誘導T細胞產生炎癥反應的早期啟動因素，促進IgE的產生，在支氣管哮喘呼吸道高反應性中發揮著重要作用[25]。1995 年Rosenwasser等[26]報道IL-4基因啟動子區-590堿基位點存在C-T突變且等位基因與總IgE水平有關。張林媛等[27]研究發現IL-4-590C/T位點在女童中CC基因型攜帶者患病危險性顯著降低；而Cui等[28]未發現IL-4-590C/T與中國人過敏性哮喘有關。

由于多項研究結果尚未統一，本研究通過對已往有關IL-4-590C/T多態性與兒童哮喘進行分析，此次研究共納入7項病例對照研究，包括1 167例哮喘患者和1 011例健康對照。通過對IL-4-590C/T位點多態性進行基因分型和關聯分析，結果提示IL-4-590C/T基因-590C/T多態性與兒童哮喘發病風險相關。考慮到由于人種不同及地區的差異性，基因多態性分布可能也存在著很大的差異。對種族進行了亞組分析，發現此位點與亞洲、歐洲及非洲的兒童哮喘都具有相關性，但是由于本次研究亞洲人居多，歐洲和非洲的兒童較少，研究結果是否適于其他地區，仍需進一步研究。

本研究的局限性：(1)無法進行基因-基因、基因-環境間的交互作用分析；(2)各文獻中存在年齡、性別差異；(3)本研究納入文獻數量較少，且不同地區在樣本收集過程中使用的檢測方法存在差異；(4)文獻語種限定為中英文，其他語種的文章及未發表的文章未被納入。以上種種的局限因素可能會對結果一定的偏倚。

綜上所述，此次研究通過對各獨立研究進行綜合評價，大大地提高了樣本量，且本次研究無明顯的發表偏移，敏感性分析較好，分析結果提示IL-4基因-590C/T多態性可能與兒童哮喘發病相關，但是上述結論仍需開展更多大規模、高質量的研究加以證實。

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The association between the polymorphisms in the IL-4-590C/T gene and children asthma disease：a Meta analysis*

RenXia,WangShasha,WangShan,ChengFangjuan,MaChengyuan,GuanJian△

(DepartmentoftheSecondRespiratory，theFirstAffiliatedHospitalofShiheziMedicalUniversity，Shihezi，Xinjiang832008，China)

Objective To investigate the relationship between polymorphism of IL-4-590C/T and susceptibility of asthma.Methods The case-control articles reporting the relationship between IL-4-590C/T polymorphism and susceptibility of asthma were collected by China National Knowledge Infrastructure,WanFang data,VIP citation databases,Pubmed,Baidu Scholar，time limits are retrieved from the building a database to January 2016.The Meta-analysis software RevMan5.0 and Stata 12.0 was applied for heterogeneity test and pooledORcalculation.Results Seven case-control studies were selected，including 1 167 cases in the asthma group and 1 101 cases in the control group.Meta-analysis showed that both-590C/T polymorphisms genotypes were significantly associated with asthma,five kinds of senotypesOR(95%CI)were CT+CCvs. TT[0.7(0.57-0.85)],CCvs. CT+TT[0.56(0.43-0.72)],CCvs. TT[0.46(0.33-0.64)],CCvs. CT[0.64(0.48-0.85)],Cvs. T[0.45(0.27-0.77)].From subgroup analysis，genotype CCvs. CT+TT[0.50(0.35-0.72)],CCvs. TT[0.50(0.27-0.95)],CTvs. TT[0.61(0.41-0.92)],Cvs. T[0.47(0.23-0.95)] with risk correlated in Asian children asthma(Pvalue is 0.01,0.04,0.02,0.03).Genotype CCvs. CT+TT[0.63(0.44-0.90)],CCvs. TT[0.49(0.25-0.96)],CCvs. CT[0.67(0.45-0.98)] also indicated a significant correlation between-590C/T polymorphisms of IL-4 and asthma in non-Asian children(Pvalue is 0.01,0.04,0.04).Conclusion Current evidence suggests that the-590C/T polymorphism of IL-4 gene is associated with children asthma．

asthma；interleukin-4；Meta-analysis;polymorphism；-590C/T

2016年度重慶市出版專項資金資助項目

?證醫學·

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.05.020

國家自然科學基金資助項目(81360009)。 作者簡介：任俠(1989-)，碩士在讀，主要從事呼吸系統研究。△

，E-mail:guanjian6@163.com。

R725.6

A

1671-8348(2017)05-0638-04

2016-08-02

2016-10-30)