血清HE4、CA125檢測及ROMA模型在卵巢癌診斷中的應用價值

董動麗，顧勁松，趙紹杰，唐 艷，趙婷婷

(南京醫(yī)科大學附屬無錫婦幼保健院婦科，江蘇無錫 214002)

血清HE4、CA125檢測及ROMA模型在卵巢癌診斷中的應用價值

董動麗，顧勁松△，趙紹杰，唐 艷，趙婷婷

(南京醫(yī)科大學附屬無錫婦幼保健院婦科，江蘇無錫 214002)

目的 探討人附睪分泌蛋白4(HE4)、糖類抗原125(CA125)及卵巢惡性腫瘤風險預測模型(ROMA)在卵巢癌診斷中的應用價值。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗及化學發(fā)光方法檢測56例卵巢癌患者、73例卵巢良性腫瘤患者及50例健康對照者血清HE4及CA125水平，根據(jù)患者的絕經(jīng)狀況通過公式計算ROMA指數(shù)，繪制受試者工作特征(ROC)曲線并計算曲線下面積(AUC)。結(jié)果 HE4、CA125水平及ROMA指數(shù)在卵巢癌組分別為(345.33±605.03)pmol/L、 (701.46±1 500.30)U/mL、(58.72±31.00)%，卵巢良性腫瘤組分別為(53.84±14.68)pmol/L、(44.25±45.81)U/mL、(10.80±6.75)%，健康對照組分別為(46.03±10.26)pmol/L、(17.39±10.64)U/mL、(6.92±3.85)%，卵巢癌組血清HE4、CA125水平及ROMA指數(shù)高于卵巢良性腫瘤組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。健康對照組和卵巢良性腫瘤組比較，HE4水平和ROMA指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。而CA125水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。血清HE4、CA125水平和ROMA指數(shù)對卵巢癌診斷的靈敏度分別為71.43%、76.79%、89.28%，特異度分別為93.15%、53.42%、94.52%，ROC-AUC分別為0.930、0.809、0.937,當對卵巢癌診斷的特異度為95.00%時，HE4、CA125和ROMA指數(shù)對卵巢癌診斷的靈敏度分別為80.40%、53.60%和83.90%。結(jié)論 聯(lián)合檢測HE4和CA125計算ROMA指數(shù)對卵巢癌診斷靈敏度和特異度較高。

卵巢腫瘤；人附睪分泌蛋白4；糖類抗原125；卵巢惡性腫瘤風險預測模型

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)三大常見惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌，居第3位，但死亡率居第1位。糖類抗原125(cancer antigen 125,CA125)是目前臨床上最常用于卵巢癌診斷的腫瘤標志物，但CA125水平升高并不僅限于卵巢惡性腫瘤中，在一些卵巢良性腫瘤、子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔炎性疾病患者體內(nèi)也有一定的表達，對卵巢癌診斷的特異度較低。人附睪分泌蛋白4(human epididymis protein 4，HE4)是一種新型的腫瘤標志物，在正常卵巢組織和卵巢良性腫瘤組織中不表達或低表達，而在卵巢癌組織中表達明顯升高，對卵巢癌的早期診斷及鑒別診斷有重要價值。而通過聯(lián)合檢測血清HE4和CA125水平，計算卵巢惡性腫瘤風險預測模型(risk of ovarian malignancy algorithm，ROMA)指數(shù)預測患卵巢癌的風險，對卵巢癌診斷具有更高的靈敏度和特異度。本研究通過對56例卵巢癌患者、73例卵巢良性腫瘤患者及50例健康對照組血清HE4及CA125水平進行測定，根據(jù)絕經(jīng)與否按不同公式計算相應的ROMA指數(shù)，評估HE4和CA125聯(lián)合檢測及ROMA指數(shù)在卵巢癌診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年8月至2015年7月在本院因卵巢腫瘤住院的患者129例，所有患者術(shù)前均未應用激素及放化學治療，病理診斷經(jīng)本院兩位以上病理科醫(yī)生確診，根據(jù)術(shù)后病理診斷分為卵巢良性腫瘤組和卵巢癌組。卵巢癌組56例，絕經(jīng)35例，未絕經(jīng)21例，年齡19～75歲，平均年齡(54.30±12.00)歲；卵巢良性腫瘤組73例，絕經(jīng)19例，未絕經(jīng)54例，年齡21～76歲，平均年齡(49.40±14.00)歲；另系統(tǒng)抽樣選取無錫市婦幼保健院體檢中心體檢合格的健康婦女50例為健康對照組，年齡22～78歲，平均年齡(50.28±11.04)歲，均排除心、肝、腎等重要臟器疾病。所有研究對象的絕經(jīng)標準：(1)年齡大于或等于60歲；(2)年齡小于60歲，自然閉經(jīng)大于或等于12個月且雌激素水平處于絕經(jīng)期范圍[1]。

表1 3組血清HE4、CA125水平及ROMA指數(shù)比較

a：P<0.05，與卵巢良性腫瘤組及健康對照組相比；b：P<0.05，與健康對照組相比。

1.2 方法 所有對象均采集清晨空腹靜脈血，分離血清，-20 ℃冰箱保存，應用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢查血清HE4水平，檢測試劑盒購置瑞典康乃格公司，儀器為BD-RAD酶標儀，絕經(jīng)前患者血清HE4水平大于或等于72.60 pmol/L為陽性，絕經(jīng)后患者血清水平大于或等于104.00 pmol/L為陽性，應用電化學發(fā)光免疫方法檢查血清CA125水平，血清CA125水平大于或等于35 U/mL為陽性。運用Moore等[2]提出的ROMA指數(shù)計算公式絕經(jīng)前：PI(predictive)=-12+2.38×IN(HE4)+0.062 6×LN(CA125)，絕經(jīng)后：PI=-8.09+l.04×LN(HE4)+0.732×LN(CA125)，ROMA(%)=exp(PI)/[1+exp(PI)]×100%，通過相應分析軟件自動計算出相應的ROMA指數(shù)。絕經(jīng)前ROMA指數(shù)小于或等于11.4%，絕經(jīng)后ROMA指數(shù)小于或等于29.9%，高于臨界值定為高風險。

2 結(jié) 果

2.1 血清HE4、CA125水平及ROMA指數(shù)統(tǒng)計學分析 卵巢癌組血清HE4和CAl25水平及ROMA指數(shù)分別與卵巢良性腫瘤組和健康對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。而卵巢良性腫瘤組和健康對照組比較，HE4和ROMA指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，CA125水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2 血清HE4、CA125水平及ROMA指數(shù)對卵巢癌檢測效能的比較 以病理診斷為金標準，通過對HE4、CA125水平及ROMA指數(shù)對卵巢良惡性腫瘤做計數(shù)資料分析，HE4、CA125及ROMA在卵巢良惡性腫瘤中的檢測情況，見表2。由表2計算HE4、CA125及ROMA對卵巢癌診斷的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值及準確率(表3)。由表3可以看出，通過ROMA模型對卵巢惡性腫瘤診斷的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值及準確率均高于HE4和CA125。

2.3 ROC曲線及其曲線下面積 以縱坐標表示靈敏度，橫坐標表示1-特異度，繪制受試者工作特征曲線(ROC)及曲線下面積(AUC)。HE4、CA125及ROMA對卵巢癌診斷的ROC-AUC分別為0.930、0.809、0.937。由以上數(shù)據(jù)可以看出，在對卵巢癌診斷中，HE4優(yōu)于CA125，HE4、CA125聯(lián)合檢測計算ROMA指數(shù)對卵巢癌的診斷優(yōu)于HE4。當對卵巢癌診斷的特異度為95.00%時，HE4、CA125及ROMA指數(shù)對卵巢癌診斷的靈敏度分別為80.40%，53.60%和83.90%。HE4、CA125及ROMA指數(shù)對卵巢癌診斷的ROC曲線，見圖1。

表2 血清HE4、CA125水平及ROMA指數(shù)在卵巢良、惡性腫瘤中的檢測情況(n)

表3 血清HE4、CA125水平及ROMA指數(shù)對卵巢癌檢測效能的比較[%(n/n)]

圖1 HE4、CAl25及ROMA指數(shù)對卵巢癌診斷的ROC曲線

3 討 論

卵巢癌是女性生殖器官常見三大惡性腫瘤之一，其病死率居婦科惡性腫瘤之首。在美國每年約有22 340例婦女診斷為卵巢癌，其中15 280例死于卵巢癌，卵巢癌患者5年生存率還不到30%。早期卵巢癌患者進行有效治療后五年生存率高達85%，而晚期卵巢癌五年生存率僅有20%。因此提高卵巢癌生存率的關(guān)鍵在于早期診斷，但卵巢解剖位置較深，早期缺乏典型的臨床癥狀，給早期診斷帶來一定的困難，80%的卵巢癌患者確診時已為晚期[3]。

CA125是目前臨床上最常用于卵巢癌診斷及監(jiān)測卵巢癌復發(fā)的腫瘤標志物，普遍分部于包括卵巢癌、輸卵管癌、子宮內(nèi)膜癌等惡性腫瘤中。但CA125對早期卵巢癌診斷的靈敏度較低，尤其對Ⅰ期卵巢癌患者診斷的陽性率僅有10%。雖然CA125對晚期卵巢癌診斷具有較高的靈敏度，但仍有近20%的卵巢癌患者血清CA125檢測陰性。另外，CA125在一些卵巢良性腫瘤如卵巢漿液性囊腺瘤、卵巢黏液性囊腺瘤、卵巢子宮內(nèi)膜異位癥中也有較高表達，故對卵巢癌診斷的特異性較低。因此尋找對卵巢癌早期診斷靈敏度和特異度均較高的腫瘤標志物顯得尤為重要[4-5]。

HE4是一種新型的腫瘤標志物，屬于乳清酸性4-二硫化中心蛋白家族，由Krichhoff等[6]于1991年在人附睪上皮細胞中發(fā)現(xiàn)。2003年Hellstrom等[7]通過卵巢癌患者與健康者血清HE4水平比較后發(fā)現(xiàn)大多數(shù)卵巢癌患者血清HE4水平明顯升高，表明HE4可作為卵巢癌診斷的一種新的腫瘤標志物。2008年Moore等發(fā)現(xiàn)應用單個腫瘤標志物對卵巢癌診斷時，血清HE4具有較高的靈敏度和特異度，HE4和CA125聯(lián)合檢測用于卵巢癌診斷具有更高的靈敏度和特異度，在聯(lián)合應用二者對卵巢癌診斷的基礎(chǔ)之上。Moore等[2]于2009年提出了ROMA模型，他是通過聯(lián)合檢測血清HE4與CAl25水平，結(jié)合患者絕經(jīng)狀態(tài)按不同公式計算ROMA指數(shù)來預測卵巢腫瘤患者中卵巢癌發(fā)病風險的數(shù)學模型。此計算方法不強調(diào)HE4和CA125的臨界值，只是將兩者測得的血清水平按照絕經(jīng)于否代入相應公式，得出的風險預測概率。通過該模型計算的ROMA指數(shù)可將卵巢腫瘤患者區(qū)分為患卵巢癌高危組和低危組。有研究發(fā)現(xiàn)該方法對卵巢癌診斷的準確率達93.8%[2]。

本研究通過對卵巢癌、卵巢良性腫瘤患者及健康對照組血清HE4、CA125水平的測定，計算ROMA指數(shù)，結(jié)果顯示在鑒別卵巢良惡性腫瘤中，通過檢測血清HE4水平及ROMA指數(shù)優(yōu)于CA125。在鑒別卵巢良性腫瘤和健康者中，通過檢測血清CA125水平優(yōu)于HE4和ROMA指數(shù)。通過四格表法來評價HE4、CA125、ROMA指數(shù)對卵巢癌的診斷效能，結(jié)果顯示聯(lián)合檢測HE4、CA125計算ROMA指數(shù)在對卵巢癌診斷中，靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值及準確率均高于HE4和CA125單項檢測。研究表明聯(lián)合檢測HE4、CA125計算ROMA指數(shù)可以提高對卵巢癌診斷的靈敏度、特異度及準確率。因此在臨床工作中，通過聯(lián)合檢測HE4、CA125計算ROMA指數(shù)對卵巢癌術(shù)前診斷優(yōu)于應用任何一種單一的腫瘤標志物。本研究還以卵巢良性腫瘤和健康對照組為參照，繪制HE4、CA125及ROMA指數(shù)的ROC曲線及AUC，發(fā)現(xiàn)三者對卵巢癌診斷的AUC分別為0.930、0.809及0.937，三者以ROMA指數(shù)的AUC最大，進一步說明聯(lián)合檢測HE4、CA125計算ROMA可以提高對卵巢癌診斷的效能。2011年Molina等[8]研究也顯示ROMA指數(shù)對卵巢癌診斷靈敏度、特異度及ROC-AUC均較HE4及CA125高。2013年陳燕等[1]也報道ROMA在對卵巢癌診斷中是優(yōu)于HE4和CA125，本研究結(jié)果與此相符。以上研究均表明聯(lián)合檢測HE4、CA125計算ROMA指數(shù)對卵巢癌術(shù)前臨床診斷具有重要的指導價值。由ROC-AUC得出，當對卵巢癌診斷的特異度為95%時，HE4、CA125及ROMA指數(shù)對卵巢癌診斷的靈敏度分別為80.40%、53.60%和83.90%，以ROMA指數(shù)對卵巢癌診斷的靈敏度最高，再次表明在對卵巢癌診斷中聯(lián)合檢測HE4、CA125計算ROMA指數(shù)具有較高臨床應用價值。卵巢癌初次治療原則是以手術(shù)為主，初次手術(shù)的徹底性與預后密切相關(guān)，術(shù)中應防止瘤體破裂污染。因此術(shù)前對卵巢腫瘤性質(zhì)做出正確評估顯得尤為重要。通過聯(lián)合檢測HE4、CA125計算ROMA指數(shù)可提高術(shù)前對卵巢腫瘤良惡性診斷的準確率，對卵巢腫瘤患者選擇手術(shù)方式具有重要的臨床指導意義。

綜上所述，HE4可作為卵巢癌診斷新的腫瘤標志物，單項檢測血清HE4在對卵巢良惡性腫瘤鑒別中具有重要意義，通過對血清HE4及CA125檢測計算ROMA指數(shù)可以提高對卵巢癌診斷的靈敏度、特異度和準確率，在對卵巢癌診斷具有重要的臨床應用價值。

[1]陳燕，林鶯鶯，鄭瑜宏，等．血清HE4、CA125和ROMA指數(shù)評估卵巢癌風險性的初步評價[J]．中國免疫學雜志，2013，29(2)：168-174．

[2]Moore RG,Mcmeekin DS,Brown AK,et al.A novel multiple marker bioassay utilizing HE4 and CA125 for the prediction of ovarian cancer in patients with a pelvic mass[J].Gynecol Oncol,2009,112(1):40-46.

[3]Steven J,Skates,PhD.OCS:development of the risk of ovarian cancer algorithm(ROCA)and ROCA screening trials[J].Int J Gynecol Cancer,2012,22(1):24-26.

[4]Chen WT,Gao X,Han XD,et al.HE4 as a serum biomarker for ROMA prediction and prognosis of epithelial ovarian cancer[J].Asian Pac J Cancer Pre,2014,15(1):101-105.

[5]宋曉翠，滕洪濤，張建海，等．聯(lián)合檢測血清HE4和CA125在卵巢癌早期診斷及病情監(jiān)測中的價值[J]．實用醫(yī)學雜志，2012，28(14)：2380-2382．

[6]Krichhoff C,Habben I,Ivell R,et al.A major epididymis-specific cDNA encodes a protein with sequence homology to extracellular proteinase inhibitors[J].Biol Reprod,1991,45(2):350-357.

[7]Hellstrom I,Raycraft J,Hayden-Ledbetter M,et al.The HE4 (WFDC2)protein is a biomarker for ovarian carcinoma[J].Cancer Res,2003,63(13):3695-3700.

[8]Molina R,Escudero JM,Auge JM,et al.HE4 a novel tumor marker for ovarian cancer:comparison with CA125 and ROMA algorithm in patients with gynecological diseases[J].Tumor Biology,2011,32(6):1087-1095.

The value of HE4,CA125,and ROMA model in diagnosis of the ovarian carcinoma

DongDongli，GuJinsong△，ZhaoShaojie，TangYan，ZhaoTingting

(DepartmentofGynecology,theAffiliatedWuxiMaternalandChildHealthHospitalofNanjingMedicalUniversity,Wuxi,Jiangsu214002,China)

Objective To explore the value of human epididymis protein 4(HE4),cancer antigen 125(CA125)and the risk of ovarian malignancy algorithm(ROMA)in the diagnosis of ovarian cancer.Methods Electrochemical luminescence and Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)were used to determine the levels of serum HE4,CA125 in 56 patients with ovarian carcinoma,73 cases of ovarian benign tumor and 50 health women,and the ROMA was calculated by HE4 and CA125 levels depending on the menopause state,drawing the receiver operating characteristics(ROC)curve and calculating the area under the curve(AUC).Results The average levels of the HE4,CA125 and the value of the ROMA were (345.33±605.03)pmol/L,(701.46±1 500.30)U/mL,(58.72±31.00)% in the ovarian carcinoma group,(53.84±14.68)pmol/L,(44.25±45.81)U/mL,(10.80±6.75)% in the ovarian benign tumor group,and (46.03±10.26)pmol/L,(17.39±10.64)U/mL,(6.92±3.85)% in the health control group respectively,compared with the benign tumor group and the health control group,the ovarian carcinoma group were higher in HE4,CA125 and the ROMA value,and the difference were significantly (P<0.05),whereas compared in the ovarian benign group and the health group,except the CA125 was higher in the benign group and the difference had statistical significance(P<0.05),the HE4 level and the value of the ROMA had no statistical significance(P>0.05).The sensitivities of the HE4,CA125 and ROMA were 71.43%,76.79%,89.28%,the specificities were 93.15%,53.42%,94.52% and the ROC-AUCs were 0.930,0.809,0.937 respectively.When the specificity for the diagnosis of the ovarian carcinoma was 95.00%,the sensitivities of the HE4,CA125 and ROMA were 80.40%,53.60%,83.90% respectively.Conclusion HE4 and CA125 combined detection to calculate the ROMA can elevate the sensitivity and specificity for the ovarian carcinoma diagnosis.

ovarian neoplasms;human epididymis protein 4;cancer antigen 125;risk of ovarian malignancy algorithm

董動麗(1983-)，住院醫(yī)師，碩士，主要從事婦產(chǎn)科遺傳學研究。△

，E-mail:gjmsj8851@126.com。

? 著·

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.05.001

R711.75

A

1671-8348(2017)05-0577-03

2016-06-18

2016-08-16)