大別山牛CART基因多態性與體尺性狀相關性研究

趙拴平, 徐 磊, 賈玉堂

(安徽省農業科學院畜牧獸醫研究所, 安徽 合肥 230031)

大別山黃牛是我國優良的地方品種牛，主要產于安徽省大別山東部的金寨﹑岳西﹑六安等縣和湖北省大別山西部的黃陂﹑大悟﹑英山等縣，是大別山地區著名的地方品種。大別山牛體型小、耐粗飼、適應性強、抗病力強、容易管理，是我國寶貴的地方牛遺傳種質資源。

CART基因(可卡因-苯丙胺調節轉錄肽基因，Cocaine-and amphetamine-regulated transcript)是一種類生長抑制素多肽，最早從綿羊下丘腦抽提物中分離獲得[1]，研究發現，CART基因參與動物攝食、能量代謝調節、應激反應等多種生理過程。E.Valle等研究發現CART基因位于牛20號染色體[2]，包含3個外顯子和2個內含子，SNP位點主要集中在基因的內含子和啟動子區[2-3]，牛CART基因SNPs位點與生長性狀關聯分析發現，多態性位點A1A1(C1)基因型個體的體重顯著高于A1B1基因型個體(P<0.05)，A2A2(C2)基因型個體的體重顯著低于A2B2基因型個體(P<0.05)[3]。

本研究依據牛CART基因序列(NC_007318.6)設計引物，利用PCR、測序和生物信息學技術分析大別山牛CART基因SNPs位點與體尺性狀的相關性，以期為大別山牛品種資源保護和開發利用奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

試驗樣品為安徽大別山黃牛血樣300份，樣本間無親緣關系，頸靜脈采血法采集每頭牛血液10 mL，ACD 抗凝，低溫帶回實驗室，-80℃冰箱凍存備用。

1.2 基因組DNA提取

利用DNA提取試劑盒(天根生化科技有限公司，北京)進行血液樣品基因組提取，1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測其完整性，核酸分析儀測定其純度和濃度。

1.3 基因組DNA池構建及PCR擴增

分別取20份大別山牛稀釋DNA樣各1.0 μL，混合均勻，構建4個獨立大別山牛基因組DNA池。……