多發性骨髓瘤患者免疫表型及循環血miRNA表達情況研究

李 興，馬麗娜，彭大為△，王美清

(中南大學湘雅醫學院附屬?？卺t院/?？谑腥嗣襻t院:1.腫瘤化療科;2.神經內科，?？?70208)

·經驗交流· doi:10.3969/j.issn.1671-8348.2017.04.037

多發性骨髓瘤患者免疫表型及循環血miRNA表達情況研究

李 興1，馬麗娜2，彭大為1△，王美清1

(中南大學湘雅醫學院附屬?？卺t院/海口市人民醫院:1.腫瘤化療科;2.神經內科，?？?70208)

[摘要] 目的 研究及分析多發性骨髓瘤患者免疫表型及循環血微RNA(miRNA，miR)的表達情況。方法 選取2010年1月至2015年6月于該院進行診治的65例多發性骨髓瘤患者為觀察組，同時期的65例正常骨髓患者為對照組，將兩組的免疫表型及循環血 miRNA表達情況進行檢測及比較，并比較觀察組中不同分期及治療情況者的檢測結果。結果 觀察組的CD38、CD56、CD138及CD20陽性率均高于對照組，循環血 miR-21及miR-32高于對照組，而循環血miR-16及miR-335則低于對照組，且觀察組中分期較高及復治難治者的CD38、CD56、CD138及CD20陽性率、循環血 miR-21及miR-32均高于分期較低及初治者，循環血miR-16及miR-335則低于分期較低及初治者(均P<0.05)。結論 多發性骨髓瘤患者的免疫表型及循環血 miRNA呈現異常表達的狀態，且其表達水平受疾病分期及治療情況的影響也較大。

多發性骨髓瘤；免疫表型分型；微RNAs

多發性骨髓瘤在惡性血液疾病中并不少見，臨床對于本病的相關研究較多，其中關于血液指標相關的研究尤為多見[1-2]，而循環血微RNA(miRNA，miR)是近年來在本病研究中較為多見的指標，但是對其細致全面的探討仍相對不足，另外，較多研究顯示，免疫表型異常在此類患者中也較為明顯，但是關于此方面的全面研究也十分匱乏[3]。因此，本文就多發性骨髓瘤患者免疫表型及循環血miRNA的表達情況進行研究分析，結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年1月至2015年6月于本院進行診治的65例多發性骨髓瘤患者為觀察組，同時期的65例正常骨髓患者為對照組。兩組研究對象的年齡與性別等一般資料差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。

復治患者指接受1次及1次以上治療后出現病情進展者；難治指對初始治療無反應或反應較差的患者。

1.2 方法 采集兩組研究對象的骨髓液及循環血標本送檢，骨髓標本及血液標本送檢，將兩組的免疫表型及循環血 miRNA表達情況進行檢測及統計。其中骨髓標本檢測指標為免疫表型相關指標，包括CD38、CD56、CD138、CD20，以三色流式分析方案進行檢測，另外血液標本檢測指標則為miR-16、miR-21、miR-335及miR-32，其以實時定量PCR擴增法進行處理。然后將兩組研究對象的上述檢測指標進行分別統計及比較，并比較觀察組中不同分期及治療情況者的檢測結果。

2 結 果

2.1 兩組研究對象的免疫表型比較 觀察組的CD38、CD56、CD138及CD20陽性率均高于對照組，且觀察組中不同分期及治療情況者的表達也存在明顯差異，即分期較高及復治難治者的陽性率均高于分期較低及初治者，差異有統計學意義(均P<0.05)，見表2。

2.2 兩組研究對象的循環血miRNA指標表達情況比較 觀察組的循環血 miR-21及miR-32高于對照組，而循環血miR-16及miR-335則低于對照組，且觀察組中不同分期及治療情況者的表達也存在明顯差異，即分期較高及復治難治者的循環血 miR-21及miR-32均高于分期較低及初治者，分期較高及復治難治者的循環血miR-16及miR-335均低于分期較低及初治者，差異有統計學意義(均P<0.05)，見表3。

a:P<0.05,與對照組比較；b:P<0.05，與Ⅱ期患者比較；c:P<0.05,與Ⅰ期患者比較；d:P<0.05,與初治患者比較；-：此項無數據。

表3 兩組研究對象的循環血 miRNA指標表達情況比較±s)

a:P<0.05,與對照組比較；b:P<0.05,與Ⅰ～Ⅱ期患者比較；c:P<0.05,與Ⅰ期患者比較；d:P<0.05，與初治患者比較。

3 討 論

多發性骨髓瘤作為臨床的惡性漿液性細胞病，臨床對其重視程度較高，相關研究也較多。此類惡性腫瘤患者的臨床表現較為多樣，其中骨痛、貧血及多器官異常等均十分常見[4-5]，因此其臨床表現對于疾病的診斷特異性相對較低，而臨床用于本病診斷的指標主要以組織學活檢為主，漿細胞瘤的檢出是本病診斷的主要標準，但是臨床中近年來出現較多與疾病相關的血液及其他指標異常的研究[6-7]，而這些指標對于疾病的有效診斷具有積極的臨床意義，故在本病的診斷過程中，對于這些指標的全面細致掌握極為重要。本病作為漿液性細胞疾病，對于本病患者進行漿細胞免疫表型的變化研究價值則較高[8-9]，以往臨床中也可見關于多發性骨髓瘤患者漿細胞免疫表型變化的相關研究，但是眾多研究之間不僅僅存在著一定的差異，且存在差異極大的情況，鑒于此種情況的存在，對于多發性骨髓瘤患者進行進一步的免疫表型特點的研究分析則極為必要，CD38、CD56、CD138及CD20作為漿細胞檢測中特異程度較高的幾類指標，對其在多發性骨髓瘤患者中的表達情況探討價值較高，空間也較大[10]。另外，循環血 miRNA指標是近年來在臨床中多類疾病中均呈現出較大異常狀態的指標，其對于基因轉錄后的水平表達具有較大的影響作用，且其調控作用也較為明顯，因此其在疾病診斷中的價值較高[11-12]。而多發性骨髓瘤作為惡性腫瘤中的一類，其此方面的變化探討更是有必要，較多與惡性腫瘤相關的基因指標在此類患者中可呈現異常的狀態，其中miR-16、miR-21、miR-335及miR-32作為在惡性腫瘤患者中表達異常程度較高的幾類指標，其與骨髓瘤細胞的增殖機制及過程均有密切的關系，對于異常漿細胞也有積極的反映價值[13-15]，臨床認為此方面在多發性骨髓瘤患者中的變化研究價值較高，另外臨床認為此類指標對于預后的反映價值也較高，鑒于這些因素筆者認為對上述指標進行全面探討的價值意義重大。

本文中筆者就多發性骨髓瘤患者免疫表型及循環血 miRNA表達情況進行觀察研究，并與正常骨髓的患者進行比較，比較結果顯示，多發性骨髓患者的CD38、CD56、CD138及CD20陽性率均高于正常骨髓者，循環血 miR-21及miR-32高于正常骨髓者，而循環血miR-16及miR-335則低于正常骨髓者，且多發性骨髓瘤患者中不同分期及治療情況者的表達也存在明顯差異，說明其不僅僅對于疾病的診斷有積極的臨床價值，且對于疾病分期和治療情況者也有積極的檢測價值。分析原因，疾病發生發展過程中，漿細胞的異常表達表現出免疫表型的異常，而這種異常的檢出為疾病的診斷提供了依據，另外，循環血miRNA指標的異常表達提示此類患者致癌基因的異常，因此可對本類疾病的診斷提供依據。綜上所述，筆者認為多發性骨髓瘤患者的免疫表型及循環血 miRNA呈現異常表達的狀態，且其表達水平受疾病分期及治療情況的影響也較大。

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李興(1982-)，主治醫師，碩士，主要從事腫瘤研究。△

，E-mail:PengDawei@163.com。

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