光照影響綠尾虹雉繁殖效果初報

陳冬梅， 何松， 韋毅， 2， 符明泰， 2， 陳黎， 鄧江宇， 周材權

(1.西南野生動植物資源保護教育部重點實驗室，西華師范大學生命科學學院，四川南充637002； 2. 西華師范大學生命科學學院珍稀動植物研究所，四川南充637002； 3. 四川寶興蜂桶寨國家級自然保護區，四川寶興625700)

光照影響綠尾虹雉繁殖效果初報

陳冬梅1， 2*， 何松1， 韋毅1， 2， 符明泰1， 2， 陳黎1， 鄧江宇3， 周材權1， 2*

(1.西南野生動植物資源保護教育部重點實驗室，西華師范大學生命科學學院，四川南充637002； 2. 西華師范大學生命科學學院珍稀動植物研究所，四川南充637002； 3. 四川寶興蜂桶寨國家級自然保護區，四川寶興625700)

為探討繁殖期增加光照時間改善綠尾虹雉Lophophoruslhuysii繁殖性能的可行性，于2016年2月26日—5月26日進行了人工補充光照試驗。選擇體質量相近的綠尾虹雉成體8只(4♂、4♀)，隨機分成1個對照組和1個試驗組，每組4只(2♂、2♀)，每組2個重復，每個重復2只(1♂、1♀)。對照組為自然光照，試驗組為自然光照結合人工補充光照達到每天16 h(16L∶8D)的光照時間。結果表明：試驗組雌鳥血液雌二醇、雄鳥血液睪酮極顯著高于對照組(P<0.01)；試驗組血液黃體生成素、垂體泌乳素顯著高于對照組(P<0.05)。試驗組雄鳥的求偶行為較對照組出現更早，頻率更高；試驗組開產期比對照組提前了26 d，產卵期延長了2 d，受精率提高了80%，平均卵質量增加了3.0 g，產卵數增加了1枚。在綠尾虹雉季節性產卵習性的基礎上，本地日照環境下利用自然光照結合人工補充光照達到每天16 h(16L∶8D)的光照時間，可以使綠尾虹雉產卵早、產卵期延長、卵質量增加、受精率提高。

綠尾虹雉；繁殖期；光照；血液生殖激素；繁殖性能

綠尾虹雉Lophophoruslhuysii隸屬于雞形目Galliformes雉科Phasianidae虹雉屬Lophophorus，是我國特有的高原珍稀雉類，國家Ⅰ級重點保護野生動物，被列入瀕危野生動植物種國際貿易公約(CITES)附錄Ⅰ及世界自然保護聯盟(IUCN)全球瀕危物種紅色名錄“易危(VU)”級別(雷富民等，2002；鄭光美，2015)。人類活動干擾和自然災害是綠尾虹雉野生種群主要的致危因素。探索建立人工種群并向自然界實施放歸和復壯，是近年國際上開展瀕危物種保護的一種可行途徑。

在人工飼養歷史上，綠尾虹雉是世界上最難飼養的種類及飼養記錄極少的大型雉類之一，其人工飼養研究歷史較短，飼養繁殖的單位也不多，國內僅有四川寶興蜂桶寨國家級自然保護區、北京動物園及北京瀕危動物馴養繁殖中心開展過飼養繁殖。據了解，目前北京瀕危動物馴養繁殖中心曾擁有的全世界最大人工種群已經全部消失。四川寶興蜂桶寨國家級自然保護區自1993年開始人工飼養，截至2015年尚有9只(4♂、5♀)。

已有的綠尾虹雉人工飼養繁殖研究結果顯示，每年所觀察的參與繁殖個體數不及觀察總數的30%，人工飼養的綠尾虹雉交配行為很少，雌鳥不抱窩，受精率和孵化率都明顯低于野生種群(程彩云等，1996；楊本清等，2012)。四川寶興蜂桶寨國家級自然保護區人工飼養的綠尾虹雉2013—2015年共產卵48枚，其中受精卵僅4枚。研究表明，受精率低是制約綠尾虹雉人工成功繁殖的最關鍵因子，也是綠尾虹雉人工種群數量少的原因之一，要實現綠尾虹雉的遷地保護，就必須解決其繁殖難的問題。如果能在人工控制的條件下提高產卵數、受精率，更大地發揮其繁殖潛力，將有利于人工種群的建立。

光照是鳥類季節性繁殖的一個重要控制因子。已有研究證明，增加光照時間可影響鳥類的繁殖生理(內分泌、性腺等)變化、提高繁殖性能(Lewis & Perry，1995；Bentley，1997；Jacquet，1997；王學斌，李東風，2002)。采用合理的人工光照處理延長繁殖期的有關實驗已在紫翅椋鳥Sturnusvulgaris、樹雀鹀Spizllaarborea、卡納麗島絲雀Serinuscanarius、綠頭鴨Anasplatyrhynchus、疣鼻棲鴨Cairinamoschata、環頸雉Phasianuscolchicus、紅腹錦雞Chrysolophuspictus、樹麻雀Passermontanus及黃腹角雉Tragopancaboti等多種鳥類上先后獲得了成功并已應用于生產實踐(周寶仁，李秋香，1987；丁長青等，1992；Bentley，1997；Lewis & Perry，1998；張錄強等，2000；Tepelietal.，2002；楊志宏等，2010)。有關綠尾虹雉對光照刺激的反應，迄今在國內外尚無報道。因此，本試驗首次嘗試采用自然光照結合人工補充光照的處理方法以期提高綠尾虹雉的繁殖性能。

1 材料和方法

1.1 試驗動物

本試驗在四川蜂桶寨國家級自然保護區大水溝管護站(102.87795°E，30.57141°N，海拔1 610 m)的綠尾虹雉人工飼養場進行。試驗動物為該飼養場人工飼養的綠尾虹雉。飼養籠舍為半開放式，坐落在溪水出山口處的河漫灘上，兩面是坡度超過50°的陡峭山坡和山崖，植被為原始林和發育良好的次生林。單間籠舍長20 m，寬5 m(室內5 m×5 m，室外5 m×15 m)。每個籠舍置飲水器、料盤和產卵箱各1個，自配混合飼料，制粒后飼喂，同時添加新鮮的時令蔬菜，自由采食、飲水。

試驗前對綠尾虹雉進行糞便寄生蟲檢測(鏡檢)(趙小紅，2013)以及血液禽流感病毒、新城疫病毒、傳染性支氣管炎病毒的檢測(四川成都正大集團檢測中心檢測)。糞便寄生蟲檢測和血液病毒檢測皆呈陰性，說明綠尾虹雉健康狀況良好。

1.2 試驗設計

選擇體質量相近的健康成體8只(4♂、4♀)(表1)，隨機分成1個對照組和1個試驗組，每組4只(2♂、2♀)，每組2個重復，每個重復2只(1♂、1♀)。試驗組的2個重復分別編號為1號籠、2號籠，對照組的2個重復分別編號為3號籠、4號籠。試驗組為自然光照結合人工補充光照達到每天16 h(16L∶8D)的光照時間。

表1 試驗動物基本情況表

2015年10月1日—12月31日觀察發現，綠尾虹雉在冬季自然光照的時間大概是7 h，為達到繁殖期16 h的光照時間，采用逐漸增加人工光照時間的方法。試驗分預試期和正試期，預試期進行光照的過渡調節(人工逐漸增加光照時間)和飼料的過渡調配(逐漸將休產期飼料換為繁殖期飼料)。

預試期(2016年1月1日—2月25日)每周增加1 h人工光照時間，光照強度為5 lx。正試期(2016年2月26日—5月26日)光照時間16 h(16L∶8D)，光照強度為10～15 lx。采用白光LED節能燈懸掛于綠尾虹雉的舍內棲架的正上方，調節燈與棲架的垂直距離以達到所需光照強度(用泰仕TES-1332A照度計測定光照強度)。由于試驗動物為半開放式飼養，試驗組白天自然光照不足的在舍內用人工光照補充(光照時間由正泰KG316T時控開關控制)。試驗期每天24 h全程監控觀察并錄像，以便確切掌握和調節光照時間、確切觀察記錄綠尾虹雉的活動情況(表2)。

表2 綠尾虹雉光照計劃

表3 日糧組成及營養水平

注： 每kg微量元素預混料中含有： 銅： 2 400～6 000 mg， 鐵： 24 000～60 000 mg， 鋅： 22 000～58 000 mg， 錳： 26 000～68 000 mg; 每kg維生素預混料中含有： VA： 5 000 000 IU， VD3： 1 562 500 IU， VE：12 500 mg， VK3： 1 000 mg， VB1： 1 300 mg， VB2： 3 125 mg， VB6：1 875 mg， VB12： 94 mg， D-生物素： 625 mg， D-泛酸： 5 625 mg， 煙酰胺： 20 000 mg。

Notes： Provided per kg of trace mineral premix： Cu： 2 400～6 000 mg， Fe： 24 000～60 000 mg， Zn： 22 000～58 000 mg， Mn：26 000～68 000 mg; provided per kg of vitamin premix： VA： 5 000 000 IU， VD3： 1 562 500 IU， VE： 12 500 mg， VK3： 1 000 mg， VB1： 1 300 mg， VB2： 3 125 mg， VB6： 1 875 mg， VB12： 94 mg， D-biotin： 625 mg， D-pantothenate： 5 625 mg， Nicotinamide： 20 000 mg.

1.3 日糧配制

試驗組和對照組的日糧及營養水平一致(表3)。本試驗中綠尾虹雉繁殖期日糧參照我國雉雞(環頸雉)的種雉產蛋期的營養需要標準進行配制(丁伯良，2000)。將試驗組日糧按配方配制加工制成顆粒料，每隔4 d制作一次。

1.4 測定指標

1.4.1 血液生殖激素指標 將試驗動物禁食12 h后，2016年3月20日(正試期近1個月)08∶00人工物理保定(用不透明口袋遮擋頭部，并用一只手抓住腿)，翅下靜脈采血6～8 mL，分裝在一次性真空采血管中，靜置2 h后離心取血清，測定血液生殖激素。采血方法參見何彥春(2013)。采用深圳新產業免疫MAGLUMI4000儀器，用放射免疫法測定生殖激素指標。測定項目包括卵泡生成素(FSH)、黃體生成素(LH)、垂體泌乳素(PRL)、雌鳥的雌二醇(E2)和雄鳥的睪酮(T)。

1.4.2 繁殖性能指標 以每籠為單位記錄試驗動物的開產日期、總產卵數、產卵期、卵質量、卵的長短徑、卵殼厚度、受精率和孵化率。卵進行人工孵化，孵卵第5天采用禽用照蛋器照卵，觀察卵是否受精。卵殼測定具體方法參見賓冬梅等(2006)。

1.5 數據處理與分析 試驗結果采用SPSS 18.0進行方差分析，差異有統計學意義的進一步用Duncan’s法多重比較。數據用平均值±標準差(Mean±SD)表示。P<0.01表示差異有高度統計學意義，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果分析與討論

2.1 增加光照時間對綠尾虹雉繁殖期血液生殖激素水平的影響

光照是影響鳥類繁殖行為的一個重要的環境條件。研究表明，光照是通過影響激素的分泌和行為來達到調控鳥類的生產繁殖的目的，進而表現為刺激性腺的活動和產卵(Etches，1996；王學斌，李東風，2002；趙興緒，2009)。本試驗結果表明(表4)，試驗組雌鳥血液中的E2、雄鳥血液中的T極顯著高于對照組(P<0.01)；試驗組血液中的LH、PRL顯著高于對照組(P<0.05)；試驗組血液中的FSH高于對照組，但差異無統計學意義(P>0.05)。說明增加光照時間可增加繁殖期綠尾虹雉生殖激素的分泌，有利于綠尾虹雉性腺發育，從而調控其生產繁殖。

表4 增加光照時間對綠尾虹雉繁殖期血液生殖激素的影響

注：**表示差異有高度統計學意義，*表示差異有統計學意義。

Notes：**indicates there is an extremely significant difference，*indicates there is a significant difference.

2.2 增加光照時間對綠尾虹雉繁殖性能的影響

在試驗進行中因試驗組的2號籠所產卵摔碎，對照組的3號籠未產卵，所以本試驗數據分析以試驗組的1號籠與對照組的4號籠比較。結果表明，試驗組綠尾虹雉產第一枚卵的時間比對照組提前了26 d(試驗組3月23日，對照組4月18日)，平均卵質量提高了3.0 g(試驗組88.5 g，對照組85.5 g)，產卵期延長了2 d(試驗組22 d，對照組20 d)，窩卵數增加了1枚(試驗組5枚，對照組4枚)(表5，表6)。因試驗組第一枚卵摔碎，不清楚是否受精，如果是受精卵，故試驗組受精卵為5枚，受精率100%。本試驗不考慮這枚卵是受精卵，故試驗組受精卵為4枚，受精率80%，對照組無受精卵。試驗組和對照組卵的平均長、短徑(長徑×短徑)有差異，分別是67.33 mm×44.98 mm、65.1 mm×44.73 mm。試驗組和對照組的蛋殼厚度一致。對照組的3號籠未產卵的具體原因不清楚，但已有的綠尾虹雉人工飼養繁殖研究結果顯示，每年所觀察的參與繁殖個體數不及觀察個體總數的30%(程彩云等，1996；楊本清等，2012)，所以本試驗研究也表明在自然光照條件下綠尾虹雉沒有全部參與繁殖。

試驗組動物(1號籠)2016年與2015年、2014年產卵情況比較，產第一枚卵的時間分別提前了21 d、22 d，產卵期分別延長了9 d、21 d，總產卵量分別增加了1枚、4枚，平均卵質量分別提高了1.6 g、2.6 g。2016年受精卵4枚，受精率80%，2015年、2014年沒有受精卵。對照組動物(4號籠)2016年與2015年、2014年產卵情況比較，產第一枚卵的時間、產卵期相近或一致，總產卵量為2016年是4枚，2015年、2014年分別是3枚、5枚，對照組動物2016年、2015年、2014年都沒有受精卵。盡管試驗組和對照組動物有限，但本研究提示，采用自然光照結合人工補充光照達到每天光照16 h(16L∶8D)，可使綠尾虹雉產卵時間提前、卵質量增加、受精率提高。

本試驗觀察發現，從人工補充光照16 h到產第一枚卵的時間為27 d，有研究認為，對于野生鳥類或特禽品種，原則上在施以刺激性光照后30～40 d開產比較合適(周寶仁，李秋香，1987)。因而綠尾虹雉人工補充光照較為適宜的時間還有待進行較多的試驗研究比較。

此外，本試驗觀察發現，增加光照時間對綠尾虹雉的繁殖行為有一定的影響。試驗組的雄鳥比對照組更早出現正面炫耀，求偶頻率更高，且試驗組雌鳥的繁殖行為也比對照組的更多。本試驗研究進一步提示，采用人工補充光照增加光照時間可使綠尾虹雉提前進入繁殖期。

研究表明，使鳥類在繁殖期處于一個相對恒定的長光照條件或逐漸延長的光照條件，可以取得較好的繁殖效果，但這個時期的光照時間不要超過17 h，通常采用16L∶8D的光照制度(張錄強等，2001)。

本試驗在本地日照環境下，利用自然光照結合人工補充光照，在繁殖期采用16L∶8D的光照制度取得了較好的繁殖結果。由于本試驗條件有限，以及試驗動物較少等原因，試驗中未進行光照時間對比試驗，因而不能判斷16L∶8D的光照是否是最適光照制度。由于對綠尾虹雉休產期的光照制度缺乏系統的研究，雌雄鳥是否對光照刺激的反應同步，或也如其他鳥類對雄鳥提前幾周實施刺激性光照(張錄強等，2001)，以及相關的詳細生化反應、最佳的光照制度等有待在以后的試驗中探討。

本試驗的受精卵為人工孵化，4枚受精卵都沒有孵化成功。導致孵化不成功的原因很多，例如卵殼質量、卵質量、卵的營養物質、孵化條件等，但本試驗在孵化過程中沒有控制好孵化條件也許是孵化不成功的主要原因。因試驗場經常停電，停電后即使馬上用柴油機發電，電源的不穩定性也許影響了孵化機正常工作。

本試驗動物綠尾虹雉屬于珍稀動物，數量有限，結果有待于進一步驗證，但本試驗初次嘗試研究通過調節光照制度來提高人工飼養綠尾虹雉繁殖性能的可行性，可為進一步探究提高綠尾虹雉人工繁殖適宜的光照制度提供一定的參考。

致謝：本試驗得到了四川寶興蜂桶寨國家級自然保護區董偉、王勇、左林、馬洪的支持和幫助，在此特表謝忱！

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Preliminary Report on the Effects of Artificial Illumination on Reproduction ofLophophoruslhuysii

CHENDongmei1， 2*，HESong1，WEIYi1， 2，FUMingtai1， 2，CHENLi1，DENGJiangyu3，ZHOUCaiquan1， 2*

(1. Key Laboratory of Southwest China Wildlife Resources Conservation (Ministry of Education)， College of Life Sciences， China West Normal University， Nanchong， Sichuan Province 637002， China; 2.Institute of Rare Animals and Plants， College of Life Sciences， China West Normal University， Nanchong， Sichuan Province 637002， China; 3. Fengtongzhai National Nature Reserve， Baoxing， Sichuan Province 625700， China)

This study investigated the possibility of increasing illumination time to improve the reproductive performance of the Chinese monals (Lophophoruslhuysii) during the breeding season. Artificial supplementary lighting tests were conducted during February 26 to May 26， 2016. A total of 8 adultL.lhuysii(4♂， 4♀) with the similar mass and size were chosen and randomly divided into an experimental group (2♂， 2♀) and a control group (2♂， 2♀). Natural lighting was used in the control group， and in the experimental group， the natural lighting and artificial supplementary lighting were combined and the illumination time was extended to 16 h (16L∶8D) per day. The results showed that the blood estradiol of femaleL.lhuysiiand the blood testosterone of male in the experimental group were extreme significantly higher than those in control group (P<0.01). The blood luteinizing prime and prolactin in experimental group were significantly higher than those of control group (P<0.05). The blood follicle stimulating hormone of experimental group was higher than that of control group， but the difference was not significant (P>0.05). The courtship behavior of the males in experimental group appeared more early and frequently than that of control group. The first spawning date in experimental group was 26 d earlier than that of control group， the spawning period delayed 2 d， the fertility rate went up by 80%， the average egg mass increased 3.0 g， and the egg laying number increased 1. On the basis ofL.lhuysiiannual spawning， combined use of natural lighting and artificial supplementary lighting can promoteL.lhuysiito lay eggs， increase the egg weight， and increase the fertility rate.

Lophophoruslhuysii; breeding season; illumination; blood reproductive hormone; reproductive performance

2016-08-10 接受日期：2016-11-18

四川省應用基礎研究項目(2015JY0249); 四川省教育廳項目(10ZX007)

陳冬梅， 女， 碩士， 副教授， 主要從事動物營養及飼養研究

*通信作者Corresponding author， E-mail：cdmfjm@163.com; drcqzhou1@163.com

10.11984/j.issn.1000-7083.20160207

Q959.7

A

1000-7083(2017)01-0019-06