熊果酸對糖尿病GK大鼠降糖程度分析

石亞靜+陳雪品+黃菡雪+呂志偉+韓淑英

摘要：文章探討了熊果酸（Ursolic acid，UA）對糖尿病GK大鼠的降糖作用，與模型組比較，UA組大鼠RBG、2hPBG及HbAlc升高百分率均顯著降低（P<0.01），其中對RBG和HbAlc的療效與陽性對照藥物相近，結論表明：熊果酸具有顯著降低糖尿病GK大鼠血糖及改善糖尿病糖代謝異常的作用。

關鍵詞：熊果酸；糖尿病；GK大鼠；降糖程度；糖代謝異常 文獻標識碼：A

中圖分類號：R961 文章編號：1009-2374（2016）35-0089-02 DOI：10.13535/j.cnki.11-4406/n.2016.35.043

2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）是由于體內胰島素相對不足而引起的一種以高血糖為主要特征的代謝綜合征，占據糖尿病的95%以上。糖尿病可以伴發一系列并發癥，如酮癥酸中毒、肢體壞疽、多發性神經炎、失明和腎功能衰竭，嚴重損害糖尿病病人的生活質量，更是其致殘致死的重要原因。前期研究表明，熊果酸具有降糖、調脂、保肝的作用，因此本實驗將GK大鼠（Goto-Kakizaki Rat）作為研究對象，探討熊果酸對2型糖尿病的降糖作用。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 藥物與試劑。熊果酸（中國藥品生物制品檢定所，批號20140224）；羧甲基纖維素鈉（國藥集團化學試劑有限公司，批號20140122）；糖化血紅蛋白檢測試劑盒（Axis-shield Poc AS，批號20141204）；羅氏血糖儀及試紙（瑞士羅氏診斷有限公司）。

1.1.2 動物。35只雄性SPF級GK大鼠，購自上海斯萊克斯實驗動物責任有限公司，許可證號：SCXK（滬）2012-0002，10只同系正常Wistar大鼠，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，許可證號：SCXK（京）2014-0004；于華北理工大學動物實驗中心SPF級屏障實驗室飼養與實驗。

1.2 方法

1.2.1 GK大鼠適應性飼養及糖尿病模型標準。將購買的35只13周GK大鼠在SPF級屏障實驗室進行飼養，并喂養高脂飼料誘導1周，1周末，以連續3次GK大鼠口服葡萄糖兩小時血糖≥11.1mmol·L-1為造模成功標準。

1.2.2 設計組別與藥物干預。篩選30只符合糖尿病模型標準的GK大鼠，按隨機數字表法分成3組，每組10只，分別為模型組（MC）、GLY組和UA組，另取10只Wistar正常大鼠為正常對照組（NC），每日定期按設計灌胃給予相應藥物，格列本脲和熊果酸應用時應以含5g·L-1羧甲基纖維素鈉的PBS溶液（pH=7.4）配制成濃度為2、20g·L-1的混懸液，模型對照組與正常對照組每天灌胃等容積含5g·L-1羧甲基纖維素鈉的PBS溶液（pH=7.4），持續6w。

1.2.3 指標檢測。

第一，一般表征監測。給藥期間密切觀察各組大鼠精神狀態、活動、毛色、體重及大小便等一般狀態。

第二，隨機血糖測定。分別于給藥第0、2、4、6周用血糖儀測定RBG（上午給藥后30min）1次，RBG升高百分率=（各組RBG-正常組RBG）/正常組RBG×100%。

第三，口服葡萄糖2h血糖及糖化血紅蛋白（HbAlc）測定。6周末，取尾靜脈全血測定口服葡萄糖2h血糖（2hPBG），并利用微粒色譜法檢測大鼠血液中HbAlc的含量。口服葡萄糖2h血糖（2hPBG）升高百分率=（各組2hPBG-正常組2hPBG）/正常組2hPBG×100%；HbAlc升高百分率=（各組HbAlc-正常組HbAlc）/正常組HbAlc×100%。

第四，統計分析方法。實驗數據以均數±標準差（±s）表示，用SPSS 13.0版軟件對數據進行分析，組間差異比較采用方差分析，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 一般狀態監測

正常組大鼠毛色白而有光澤，大便正常，并且活動自如，反應機敏；糖尿病模型組大鼠隨著飼養時間加長，毛色日漸變黃無光澤，出現稀便現象，反應愈發遲鈍，到后期常繼發各種感染；與模型組比較，藥物組大鼠反應遲鈍現象減輕，毛色較模型組有光澤，大便成形，色澤正常。

2.2 隨機血糖（RBG）升高百分率計算

由表1結果顯示，給藥前模型組與藥物組RBG升高百分率無統計學差異（P>0.05），給藥后藥物組RBG升高百分率明顯下降（P<0.01），但與正常組比較血糖依舊較高。

2.3 口服葡萄糖2h血糖（2hPBG）升高百分率計算

由表2看出，灌胃葡萄糖之前，各組GK大鼠血糖升高百分率無統計學差異，給糖2h后，藥物組GK大鼠血糖升高百分率較模型組比較顯著降低，具有統計學

意義（P=0.006）。

2.4 糖化血紅蛋白（HbAlc）升高百分率計算

由表3可知：與模型組比較，熊果酸和格列本脲組大鼠血清中的糖化血紅蛋白（HbAlc）升高百分率較模型組明顯下降（P=0.008），其中熊果酸降低大鼠HbAlc升高百分率效果接近陽性對照藥物格列苯脲。

3 討論

UA是一種五環三萜類化合物，廣泛存在于梔子、山楂、女貞子等多種天然藥用植物中，具有抗炎、降糖、調脂、保肝及抗腫瘤等多種藥理作用。前期研究發現，熊果酸可有效地抑制鏈脲佐菌素誘導的糖尿病大鼠飲水、進食量，并可有效糾正體內糖脂代謝紊亂，可能與其擬胰島素樣作用和對脂質合成代謝相關基因調控有關。因此本實驗將與人類糖尿病最相近的GK大鼠作為動物模型，分析熊果酸對2型糖尿病血糖降低程度及糖代謝異常的改善作用。

HbAlc是指血液中與葡萄糖不可逆結合的血紅蛋白，由于其不受運動和食物的影響，其濃度只與紅細胞壽命和該時期平均血糖濃度有關，因此可以穩定可靠地反映120天內的平均血糖濃度。多項臨床試驗發現HbAlc檢測對DM的診斷更準確，對其血糖控制更客觀、穩定，對控制DM并發癥的發生、發展及DM的預后監測均有重要臨床參考價值。國際糖尿病聯盟推出的新版的亞太糖尿病防治指南中明確規定HbAlc是糖尿病監控的“金標準”。

本實驗通過觀察熊果酸對2型糖尿病降糖程度分析，結果顯示，熊果酸能顯著降低GK大鼠血糖，包括隨機血糖、口服葡萄糖2h血糖及糖化血紅蛋白，其中對隨機血糖和糖化血紅蛋白療效與陽性藥物格列苯脲相近，表明熊果酸可以改善糖尿病引起的糖代謝異常，具有良好的開發前景，其降糖具體機制待進一步研究。

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基金項目：河北省自然科學基金（C2010001795）；河北省大學生創新實驗計劃項目（X2016041）。

作者簡介：石亞靜（1994-），女，華北理工大學本科在讀學生，研究方向：麻醉學；韓淑英，華北理工大學教授，碩士生導師，研究方向：糖尿病。

（責任編輯：蔣建華）