淺析檢驗(yàn)工作中免疫檢驗(yàn)的影響因素及質(zhì)量控制方法

李東昀，苗生虎，姚立騰

（甘肅省武威市人民醫(yī)院，甘肅 武威 733000）

淺析檢驗(yàn)工作中免疫檢驗(yàn)的影響因素及質(zhì)量控制方法

李東昀，苗生虎，姚立騰

（甘肅省武威市人民醫(yī)院，甘肅 武威 733000）

目的分析研討檢驗(yàn)工作中免疫檢驗(yàn)的影響因素及質(zhì)量控制方法。方法回顧性分析2014年4月-2016年4月期間實(shí)施臨床免疫檢驗(yàn)的3600份資料，采集標(biāo)本、收集相關(guān)資料、采取免疫檢驗(yàn)儀器進(jìn)行免疫檢驗(yàn)，對(duì)檢驗(yàn)每個(gè)階段的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，分析出現(xiàn)誤差的原因，并歸納總結(jié)檢驗(yàn)的影響因素，并尋找出質(zhì)量控制對(duì)策。結(jié)果將3600份免疫檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)影響檢疫檢驗(yàn)結(jié)果主要因素是檢驗(yàn)人員技術(shù)、儀器設(shè)備、標(biāo)本。共136份資料出現(xiàn)異常，誤差率為3.78%（136/3600）。其中31份為標(biāo)本污染變異造成、38份為儀器使用不當(dāng)造成、25份為試劑失效造成、42份為操作人員操作失誤造成。為了降低免疫檢驗(yàn)結(jié)果的誤差情況，需要加強(qiáng)對(duì)影響因素的控制，才能提高質(zhì)量控制。結(jié)論檢驗(yàn)工作中免疫檢驗(yàn)，會(huì)受到許多因素影響，從而造成檢驗(yàn)質(zhì)量不達(dá)標(biāo)。為此臨床中應(yīng)當(dāng)做好監(jiān)督與管理，著重控制影響因素，才能提高免疫檢驗(yàn)質(zhì)量。

免疫；檢驗(yàn)；質(zhì)量控制；影響因素

0 引言

免疫檢驗(yàn)為臨床中常見(jiàn)的監(jiān)測(cè)技術(shù)，對(duì)臨床診斷及治療有著重要意義，而檢驗(yàn)工作中免疫檢測(cè)結(jié)果會(huì)受到許多因素影響，造成免疫檢測(cè)質(zhì)量下降[1-2]。此次將3600例免疫資料納入到研討范圍內(nèi)，其目的則在于分析其影響免疫檢測(cè)的主要因素，在此基礎(chǔ)上提出相應(yīng)的對(duì)策。具體報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

從本院2014年4月至2016年4月期間實(shí)施臨床免疫檢驗(yàn)資料中，抽取3600份資料納入到研討范圍中，作為研究對(duì)象。主要檢測(cè)項(xiàng)目是乙肝五項(xiàng)，HBSAg（乙肝表面抗原）、抗-HBS（乙肝表面抗體）、HBeAg（e抗原）、抗-HBe（e抗體）、抗-HBc（核心抗體）[3]。

1.2 方法

采集血清樣本，對(duì)樣本進(jìn)行血清測(cè)試，采用全自動(dòng)生化檢測(cè)儀器，進(jìn)行檢測(cè)時(shí)應(yīng)全程嚴(yán)格依照規(guī)范化流程進(jìn)行。對(duì)于免疫檢驗(yàn)標(biāo)本必須抽取受檢者的晨起空腹靜脈血，對(duì)血液中乙肝病毒進(jìn)行檢測(cè)，分辨其血清學(xué)標(biāo)志[4]。

1.3 分析影響因素

檢驗(yàn)過(guò)程中，經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)影響免疫檢驗(yàn)結(jié)果，主要因素有：

檢驗(yàn)標(biāo)本。血清標(biāo)本是導(dǎo)致免疫檢查結(jié)果出現(xiàn)偏差的基本原因，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行采集和收藏時(shí)，都會(huì)受到一些不利因素影響，例如在采集時(shí)，交叉反應(yīng)物、補(bǔ)體等均會(huì)影響標(biāo)本，明顯增加了假陽(yáng)性率，因此免疫檢驗(yàn)結(jié)果也受到影響。另外，在保存和收藏標(biāo)本時(shí)，受環(huán)境、光照、濕度和溫度等因素的影響，均會(huì)造成標(biāo)本成分出現(xiàn)直接性變異，容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量受到影響。

儀器設(shè)備。檢驗(yàn)設(shè)備會(huì)直接影響到檢測(cè)質(zhì)量，在免疫檢驗(yàn)時(shí)，需要提前檢查設(shè)備，檢測(cè)試劑是否有效合理，若檢測(cè)試劑或設(shè)備的性能不好，將會(huì)帶來(lái)不利的影響，為此，需要加強(qiáng)對(duì)儀器設(shè)備方面的控制。

操作技術(shù)。操作人員的技術(shù)是主觀影響因素，免疫檢驗(yàn)人員的個(gè)人差異會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成一定影響，例如個(gè)人技術(shù)水平、標(biāo)本的標(biāo)記、操作的規(guī)范化、掌握操作技能的程度等均會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果。因此，需要多加培訓(xùn)操作人員，提高技術(shù)水平，才能保障檢驗(yàn)工作的正常進(jìn)行。

2 結(jié)果

將3600份免疫檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，影響檢疫檢驗(yàn)結(jié)果主要因素是檢驗(yàn)人員技術(shù)、儀器設(shè)備、標(biāo)本。共136份資料出現(xiàn)異常，誤差率為3.78%（136/3600），其中31份為標(biāo)本污染變異造成、38份為儀器使用不當(dāng)造成、25份為試劑失效造成、42份為操作人員操作失誤造成。為了降低免疫檢驗(yàn)結(jié)果的誤差情況，需要對(duì)影響因素加以控制，才能提高質(zhì)量控制。

3 討論

免疫檢查主要包括抗原抗體反應(yīng)、放射免疫、酶免疫等，檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[5-8]將直接影響到臨床醫(yī)師對(duì)疾病的判斷及對(duì)治療措施的選擇，甚至影響其治療效果。為此，必須確保免疫檢查的準(zhǔn)確性。免疫檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)受到各種因素的影響，主要包括對(duì)樣本的采集、收藏、轉(zhuǎn)移、保存、檢驗(yàn)等均會(huì)受到各種外源性和內(nèi)源性的因素影響[8-11]，從而造成檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)錯(cuò)誤或誤差。為此，必須了解影響免疫檢驗(yàn)結(jié)果的因素，并加強(qiáng)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量控制。

對(duì)于樣本，加強(qiáng)采集與保存。對(duì)樣本進(jìn)行采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照激素類血清樣本的標(biāo)準(zhǔn)采集方式進(jìn)行，一般采集晨起靜脈血液，妥善保存標(biāo)本，防止變性[11-13]。加強(qiáng)對(duì)儀器和試劑的保養(yǎng)和檢查，定期維護(hù)設(shè)備，使用前需要測(cè)試。定期培訓(xùn)考核檢驗(yàn)人員，使其工作技能得到提高，確保其結(jié)果的準(zhǔn)確性[14-15]。檢驗(yàn)結(jié)束后，詳細(xì)記錄檢驗(yàn)資料、填寫報(bào)告單、反復(fù)清洗儀器等，做好交接工作，并復(fù)查免疫檢驗(yàn)結(jié)果。

此次將3600份免疫檢驗(yàn)資料納入到研討范圍中，詳細(xì)分析檢驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的誤差，尋找質(zhì)量控制方法，確保標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)化、試劑及設(shè)備的有效使用，加強(qiáng)檢驗(yàn)人員的培訓(xùn)及技術(shù)規(guī)范化。經(jīng)分析影響這些有效的質(zhì)量控制對(duì)策因素后得知，要想有準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，必須在檢驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)用規(guī)范合理化的操作流程。

免疫檢驗(yàn)，主要是將高靈敏度和高特異性的免疫反應(yīng)二者加以結(jié)合，從而達(dá)到免疫檢驗(yàn)的良好效果。主要用于一些抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素以及藥物相關(guān)的檢測(cè)分析技術(shù)。在臨床上被廣泛接受和使用，主要是因其具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、試劑穩(wěn)定且有效期長(zhǎng)、方法穩(wěn)定快速、檢測(cè)范圍寬、操作簡(jiǎn)單、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。在臨床操作的工作中，免疫檢驗(yàn)主要受以下三個(gè)方面的影響：

（1）標(biāo)本。要特別注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血的情況。一般來(lái)說(shuō)，血紅蛋白中含有血紅素基因，其中具有類似過(guò)氧化物的活性，因此，在以HRP作為標(biāo)記酶的化學(xué)發(fā)光測(cè)定中，如果出現(xiàn)了血清的標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高的情況，就很容易在以后的檢驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)固相的情況，從而使得HRP的反應(yīng)值相應(yīng)偏高，造成假陽(yáng)性的結(jié)果。在樣本的采集以及血清分離的工作中，一定要盡量避免遭受到細(xì)菌的污染。一方面，由于細(xì)菌的生長(zhǎng)而分泌的一些酶有可能會(huì)對(duì)抗原體等蛋白產(chǎn)生一定的分解作用，從而影響檢驗(yàn)效果。另一方面，細(xì)菌的內(nèi)部性酶，如大腸桿菌之類的，會(huì)對(duì)后續(xù)的檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生一定的誤導(dǎo)，因?yàn)樗赡軙?huì)干擾以酶為標(biāo)記物的檢驗(yàn)方式。因此，新鮮標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果更加能夠準(zhǔn)確地反映出機(jī)體的真實(shí)情況。所以，真正行之有效的免疫檢驗(yàn)應(yīng)在采血后的24小時(shí)以內(nèi)完成，以此來(lái)保證檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性和有效性。尤其需要注意的一點(diǎn)是，在血液標(biāo)本采集以后，必須使其充分凝固以后再進(jìn)行血清的分離。如果血液還未開(kāi)始凝固就開(kāi)始進(jìn)行血清分離，容易使血清中殘留部分纖維蛋白，從而造成假陽(yáng)性的結(jié)果。如果在24小時(shí)之內(nèi)不能完成檢測(cè)，那么應(yīng)該將血清分離之后，妥善保存于-20℃的冰箱里備檢，并且做好相關(guān)的原始記錄，如待檢者的姓名、日期、檢查項(xiàng)目等，并且反復(fù)進(jìn)行凍融。

（2）試劑。免疫檢驗(yàn)需要大量相關(guān)的試劑，而不同廠家生產(chǎn)的試劑靈敏度與特異性存在著一定的差別，如果使用劣質(zhì)的試劑，勢(shì)必會(huì)造成假陽(yáng)性或者假陰性的結(jié)果，從而影響免疫檢驗(yàn)的有效性和準(zhǔn)確性。因此，選用高質(zhì)量的試劑對(duì)于免疫檢驗(yàn)成功與否具有重要意義。在進(jìn)行檢驗(yàn)之前，先將試劑從冰箱中取出，待其與室溫平衡1小時(shí)以后方可使用。如果試劑已開(kāi)封，就應(yīng)該妥善使用和保管，每次使用后應(yīng)將其放回2-8℃的冰箱內(nèi)保存，試劑開(kāi)封后盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。不同批次和批號(hào)的試劑不能重復(fù)混用，以免引起混亂，從而造成檢驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤。

（3）操作技術(shù)。操作技術(shù)直接與免疫檢驗(yàn)的結(jié)果相關(guān)，如操作不當(dāng)將直接導(dǎo)致檢驗(yàn)出錯(cuò)。比如，吸量不準(zhǔn)確就容易導(dǎo)致測(cè)定的差異，從而直接影響檢測(cè)結(jié)果，因此加樣器應(yīng)該及時(shí)清洗并且定期校準(zhǔn)。應(yīng)該避免加錯(cuò)樣本以及加樣過(guò)快，因?yàn)榧訕舆^(guò)快容易造成儀器的污染，從而影響檢驗(yàn)結(jié)果。加樣本以及試劑之時(shí)應(yīng)避免加在孔壁上，造成重復(fù)性差異。

（4）溫度。如果弱陽(yáng)性的樣本檢測(cè)不出來(lái)，或由于溫度不夠等原因造成。應(yīng)盡量減少受熱不均等情況出現(xiàn)，并且貼密封膜，防止污染物的浸入，以免影響免疫檢驗(yàn)。

（5）洗板。用來(lái)檢驗(yàn)以及備用的蒸餾水一定要合格，量筒一定要保持干凈清潔。如果洗板不干凈，或者儀器的針孔堵塞，都容易造成假陽(yáng)性；實(shí)驗(yàn)室的室溫應(yīng)該保持在25℃左右，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該加裝空調(diào)，以此來(lái)確保室內(nèi)溫度在不同的季節(jié)保持穩(wěn)定，使之對(duì)免疫檢驗(yàn)的影響最小。

（6）發(fā)光值。在一切準(zhǔn)備就緒后，待等量的發(fā)光液混合均勻，避免漏加情況的出現(xiàn)。如果發(fā)光液變質(zhì)，可能會(huì)造成假陰性；如果發(fā)光液發(fā)光時(shí)間不足，可能會(huì)造成假陰性，從而影響免疫檢驗(yàn)的結(jié)果。

總而言之，檢驗(yàn)工作中的免疫檢驗(yàn)會(huì)受到許多因素的影響，從而造成檢驗(yàn)質(zhì)量不達(dá)標(biāo)。為此，臨床中應(yīng)當(dāng)做好監(jiān)督與管理，著重控制影響因素，才能提高免疫檢驗(yàn)質(zhì)量。

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Analyze the Influencing Factors and Quality Control Methods of Immunoassay in the Inspection Work

LI Dong-yun,MIAO Sheng-hu,YAO Li-teng
(The People’s Hospital of Wuwei,Gansu,China)

ObjectiveTo analyze the influencing factors and quality control methods of immunoassay in the inspection work.MethodsRetrospective data of 3600 clinical immune test analysis from April 2014 to April 2016,Specimen collection,collection of relevant information,to take immune immune testing equipment inspection,inspection of each stage of the data analysis,analysis of the reasons of the errors,and analyze the influence factors of the inspection summary,and find out the quality control countermeasures.ResultsThe results of 3600 tests were compared and analyzed.It was found that the main factors that affected the results of quarantine inspection were the technical personnel,equipment and specimens.A total of 136 data were abnormal,and the error rate was 3.78(136/3600).31 of them were caused by the variation of the sample contamination,and the other one was caused by improper use of the instrument,and the 25 one was caused by the failure of the reagent,and the 42 one was caused by the misoperation of the operator.In order to reduce the error of immune test results,it is necessary to strengthen the control of the influencing factors in order to improve the quality control.ConclusionThe immune test in the inspection work will be affected by many factors,resulting in poor quality inspection. In order to improve the quality of immune test,we should do a good job of supervision and management.

Immunity;Inspection;Quality Control;Influencing Factors

10.19335/j.cnki.2096-1219.2017.05.12

李東昀，出生年月：1963年12月；性別：女；職稱：主管檢驗(yàn)師；主要研究方向：從事臨床檢驗(yàn)工作。