探討結核感染T淋巴細胞斑點試驗在結核診斷中的價值

楊雪梅

探討結核感染T淋巴細胞斑點試驗在結核診斷中的價值

楊雪梅

目的 研究分析結核感染T淋巴細胞斑點試驗在診斷結核病的臨床使用效果。方法 對我院256例接受結核感染T淋巴細胞斑點試驗病例進行分析，共分成結合感染組和非結合感染組，計算結核感染T淋巴細胞斑點試驗的一致百分率、靈敏度、特異性、陽性預測、陰性預測值等指標，計算ROC曲線下面積。 結果 此次研究的各項指標中，一致百分比、靈敏度、特異性、陽性預測、陰性預測值等指標分別為93.75%、95.88%、53.85%、97.49%、41.18%，ROC曲線下面積為0.749，P=0.000。結論 使用結核感染T淋巴細胞斑點試驗能夠提升結合感染診斷的準確率，臨床應用價值較高。

肺部感染；肺結核；T淋巴細胞

結核病是本世紀對人類健康危害非常大的傳染疾病，從上世紀中期就已經形成了全球性惡化的趨勢[1-2]。由于目前世界范圍內結核病的流行回升，對人類的危害性又有所提升，因此早期診斷和治療十分重要，傳統的檢測是采取結核菌素試驗、血沉、結核抗體特異性等檢測[3-4]。結核菌涂片、結核菌培養及病理是肺結核的診斷金標準[5]，可是因為培養時間長，取材難，對早期診斷不利[6]。所以尋找快速、準確、靈敏度和特異性較高的檢查方式非常重要。目前臨床中使用的結核感染T淋巴細胞斑點試驗（T-SPOT.TB）具有比較好的效果[7]。此次根據我院2013年5月—2014年12月的256例接受該種診斷方式的患者來分析研究，探討該診斷方式的使用價值，現進行以下報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年5月—2014年12月對256例接受T-SPOT. TB診斷的病例進行分析，共有男性患者136例、女性患者120例，平均年齡為（56.30±18.94）歲。

1.2 入組標準

1.2.1 結核感染組 菌陽；病理明確干酪樣壞死；實驗性抗結核治療1個月后隨訪，復查肺部CT，進行對比，影像學較前改善者。

1.2.2 非結核感染組 無結核密切接觸史；經抗結核治療臨床癥狀及病灶影像學未明顯改善。

1.3 方法

結核感染T淋巴細胞斑點試驗：肝素抗凝管采集5 ml外周靜脈血送黑龍江省大慶市第二醫院檢測。陽性結果為：測量孔斑點數為陰性對照的2倍以上或較陰性對照增加6個點或以上[8]。

1.4 統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據處理，計量資料以（）表示，分析結核感染T淋巴細胞斑點試驗的一致百分率、靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值，并繪制ROC曲線，計算曲線下面積，以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

結核感染組243例，非結核感染組組13例，結核感染T淋巴細胞斑點試驗的一致百分率為93.75%（240/256），靈敏度為95.88%（233/243），特異度為53.85%（7/13），陽性預測值為97.49%（233/239），陰性預測值為41.18%（7/17）。ROC曲線下面積為0.749。

3 討論

γ-干擾素釋放試驗的原理為結核桿菌對人體造成干擾后，巨噬細胞將其吞噬，會產生病原特異度蛋白片段，和細胞組織相容性符合，通過巨噬細胞表面進行表達，最終提呈給T淋巴細胞，T淋巴細胞和記憶T淋巴細胞能夠對分枝桿菌抗原進行識別。初次感染后，結合分枝桿菌會產生記憶T淋巴細胞分泌γ-干擾素和其他一些細胞因子對T淋巴細胞增殖進行刺激，讓巨噬細胞被激活，該過程是針對特異結核分枝桿菌免疫原得到的反應，所以對患者的T細胞的γ-干擾素釋放反應進行檢測可以判斷患者是否感染了結核分枝桿菌。通過特異蛋白刺激全血或純化的外周血單核細胞，進而通過檢測γ-干擾素的表達來判斷是否有結核分支桿菌感染。人們分析卡介苗和致病結核菌的基因排列了解到：由于特殊抗原保守基因存在于結核分枝桿菌中，結核菌進化后，RD1會消失，所以RD1的基因并不會在卡介苗和非致病性結核菌中存在。

對抗原A、抗原B孔進行反應判斷：（1）孔點0～5屬于無反應性，抗原A、B斑點數和無反應性對照孔斑點數做減法計算，數值大于6，則為陽性。（2）當無反應性對照孔點數超過6，抗原A、B斑點數為無反應性的2倍以上，則為陰性。結合感染T淋巴細胞斑點試驗是ELISPOT技術與γ-干擾素釋放試驗的結合體，可以檢測出結合感染情況。特別是針對活動性結核分枝桿菌感染的敏感性比較高。

此次研究中，對256例接受結核感染T淋巴細胞斑點試驗病例進行分析，共分成結合感染組和非結合感染組，使用結合感染T淋巴細胞斑點實驗，統計一致百分比、靈敏度、特異性、陽性預測、陰性預測值等指標，計算ROC曲線下面積。結果此次研究的各項指標中，一致百分比、靈敏度、特異性、陽性預測、陰性預測值等指標分別為93.75%、95.88%、53.85%、 97.49%、41.18%，ROC曲線下面積為0.749。結核感染T淋巴細胞特異度和陰性預測值并不理想，這一結果和其他的一些報道存在出入，所以，結核感染T淋巴細胞斑點試驗對結核進行排除診斷效果不理想。綜上所述，由于目前世界范圍內結核病的流行回升，對人類的危害性又有所提升，臨床中進行結核病診斷的額時候，除了使用T-SPOT.TB診斷之外，還應該根據患者的臨床癥狀表現和病理來進行綜合的考慮，就算T-SPOT.TB陰性也不能夠排出患者結合感染的可能性。對于老年群體和免疫功能較差的群體使用T-SPOT.TB診斷的效果還應該要進行更加深入的研究探討。

[1] 高玉然，張翠英，劉琳，等. 結核抗體檢測及結核菌素試驗在結核病診斷中的價值[J].中國熱帶醫學，2011，11（5）：542-544.

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[3] 李愛華，張國龍，沈青玉，等. 不同取痰方式對新發結核病患者結核菌檢出率的影響[J].國際檢驗醫學雜志，2013，34（15）：1941-1942.

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[5] 孟小蓉，包勇. 結核感染T細胞檢測在結核病合并終末期腎病透析患者中的早期診斷價值[EB/OL]. 中華肺部疾病雜志（電子版），2013，6（3）：71-74.

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[8] 鄭春燕，李海，楊莉，等. 酶聯免疫斑點技術在快速診斷結核性胸膜炎中的應用[J].廣東醫學，2013，34（16）：2503-2506.

To Investigate the Value of T Lymphocyte Spot Test in Diagnosis of Tuberculosis

YANG Xuemei Department of Clinical Laboratory, Daqing Second Hospital, Daqing Heilongjiang 163412, China

Objective To study the clinical effect of T lymphocyte spot test inthe diagnosis of tuberculosis. Methods In our hospital 256 patients

Tlymphocyte spot test cases of TB infection were analyzed and divided into combined and non combined infection group infection, combined infection of T lymphocytes in experimental spots, statistical consistency percentage, sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive indicators of disease area of ROC curve calculation. Results All the indexes of the study, consistent percentage, sensitivity, specif i city, positive predictive value, negative predictive indexes were 93.75%, 95.88%, 53.85%, 97.49%, 41.18%, the area under the ROC curve was 0.749, P=0.000. Conclusion The use of tuberculosis infection T lymphocyte spot test can improve the accuracy of diagnosis of combined infection,the clinical value of high.

pulmonary infection; pulmonary tuberculosis; T lymphocyte

R521

A

1674-9316（2017）10-0118-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2017.10.066

黑龍江省大慶市第二醫院檢驗科，黑龍江 大慶 163412